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IL-18和IL-33在濕疹患者外周血單一核細(xì)胞中的表達(dá)及其臨床意義

發(fā)布時間:2017-05-29 03:11

  本文關(guān)鍵詞:IL-18和IL-33在濕疹患者外周血單一核細(xì)胞中的表達(dá)及其臨床意義,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:濕疹是由多種內(nèi)外因素引起的一種具有明顯滲出傾向的皮膚炎癥反應(yīng),皮疹具有多樣性,瘙癢劇烈,易復(fù)發(fā),可遷延多年不愈,各個年齡階段均可發(fā)生。從疾病發(fā)生機理上,濕疹主要是由各種內(nèi)外因子激發(fā)引起的一種遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn),T輔助細(xì)胞(Th1/Th2)失衡引發(fā)的細(xì)胞因子分泌紊亂是濕疹發(fā)病的主要作用機制。檢索國內(nèi)外文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn),白介素-18(interleukin 18,IL-18)和白介素-33(interleukin 33,IL-33)在Th1與Th2細(xì)胞介導(dǎo)的免疫平衡中扮演著重要的角色。因此本課題旨在研究IL-18和IL-33在濕疹發(fā)病中的作用機理及二者與部分實驗室指標(biāo)的相關(guān)性。本實驗初步探討:1.IL-18m RNA和IL-33m RNA在濕疹患者與正常人外周血單一核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear,PBMC)中的表達(dá)差異;2.IL-18m RNA和IL-33m RNA在不同分型濕疹患者外周血單一核細(xì)胞中的表達(dá)量及其差異;3.應(yīng)用白芍總苷(Total Ghcosides of Paconia,TGP)治療2周、4周后濕疹患者外周血單一核細(xì)胞中IL-18m RNA和IL-33m RNA表達(dá)水平的變化,探討白芍總苷在濕疹治療中的作用;4.IL-18m RNA和IL-33m RNA表達(dá)量之間的相關(guān)性,從而探討這兩個因子在濕疹發(fā)病中的相互作用;5.IL-18m RNA和IL-33m RNA在濕疹患者外周血單一核細(xì)胞中的表達(dá)量與濕疹皮損面積及嚴(yán)重度指數(shù)(Eczema area and severity index,EASI)的相關(guān)性;6.IL-18m RNA和IL-33m RNA的表達(dá)量與相關(guān)實驗室指標(biāo)之間的相關(guān)性;7.家族過敏史與IL-18m RNA和IL-33m RNA表達(dá)量之間的相關(guān)性,從而探討家族過敏史與濕疹的關(guān)系。方法:選擇2013年5月-2014年11月就診于天津市中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院門診和天津市人民醫(yī)院門診的濕疹患者80例作為本實驗觀察對象。根據(jù)其病史及臨床表現(xiàn)分為濕疹急性期、亞急性期和慢性期三組,其中急性期30例,亞急性期20例,慢性期30例。診斷標(biāo)準(zhǔn)按照趙辨主編的《臨床皮膚病學(xué)》。另隨機選取天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院同期健康體檢者40例作為對照組。對照組均無特殊病史,近期(一個月內(nèi))無全身感染性疾病,未使用抗生素與糖皮質(zhì)激素等。三組患者性別構(gòu)成及年齡分布差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P㧐0.05)。實驗采用實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real-time Fluorescence Quantitative Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)方法,對80例濕疹患者和40例健康者外周血單一核細(xì)胞中IL-18m RNA和IL-33m RNA的表達(dá)水平進(jìn)行檢測,PCR后的產(chǎn)物經(jīng)1.5%瓊脂糖溴化乙錠凝膠電泳,于紫外成像儀下攝像證實。按照EASI評分標(biāo)準(zhǔn)對80例濕疹患者皮損面積及嚴(yán)重度進(jìn)行評分。利用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS18.0處理實驗數(shù)據(jù),以P0.05或P0.01有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:1.濕疹患者和正常對照組PBMC中IL-18"緾T值分別為:5.60±0.88,6.73±0.35;IL-33"緾T值分別為:3.04±0.80,6.39±0.29,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P㩳0.01)。2.急性期組、亞急性期組、慢性期和對照組PBMC中IL-18"緾T值分別為:5.17±0.73,5.37±0.68,6.18±0.85,6.73±0.35,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P㩳0.01)。3.急性期組、亞急性期組、慢性期和對照組PBMC中IL-33"緾T值分別為:2.72±0.62,2.78±0.45,3.51±0.87,6.39±0.29,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P㩳0.01)。4.首診濕疹患者PBMC中IL-18和IL-33"緾T值分別為:5.39±0.83,2.93±0.86,TGP治療2周后濕疹患者PBMC中IL-18和IL-33"緾T值分別為:7.28±0.65,3.23±0.75,TGP治療4周后濕疹患者PBMC中IL-18和IL-33"緾T值分別為:8.37±0.77,5.13±0.68,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P㩳0.01)。5.IL-18與IL-33的相對定量值"緾T之間呈正相關(guān),r=0.68,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,故IL-18和IL-33m RNA表達(dá)量呈正相關(guān)性(P㩳0.01)。IL-18、IL-33"緾T值與EASI評分之間呈負(fù)相關(guān),r值分別為-0.62,-0.29,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P㩳0.01)。6.IL-18、IL-33"緾T值與嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)目呈負(fù)相關(guān),r值分別為-0.56,-0.59,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P㩳0.01)。IL-18和IL-33m RNA的表達(dá)量與年齡、白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞計數(shù)之間無明顯相關(guān)性(P0.05)。7.有家族過敏史的濕疹患者組IL-18和IL-33"緾T值分別為5.29±0.77,2.76±0.63,無家族過敏史患者組IL-18和IL-33"緾T值分別為6.36±0.66,3.74±0.74,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P㩳0.01)。結(jié)論:濕疹患者外周血單一核細(xì)胞中IL-18m RNA和IL-33m RNA表達(dá)量均顯著高于健康對照組,且IL-18m RNA和IL-33m RNA表達(dá)量與EASI評分之間呈正相關(guān),說明IL-18和IL-33參與了濕疹的發(fā)生發(fā)展。濕疹患者IL-18、IL-33m RNA表達(dá)量與嗜酸性粒細(xì)胞計數(shù)呈正相關(guān),因此臨床上可以將嗜酸性粒細(xì)胞計數(shù)作為評價濕疹疾病嚴(yán)重性的一項實驗室指標(biāo)。經(jīng)白芍總苷治療2周、4周后濕疹患者IL-18和IL-33m RNA表達(dá)量明顯降低,說明白芍總苷對濕疹有一定治療作用,且能調(diào)控IL-18和IL-33m RNA在濕疹患者外周血總表達(dá)量的變化。有家族過敏史的濕疹患者外周血單一核細(xì)胞中IL-18和IL-33m RNA表達(dá)量高于無家族過敏史組,說明家族過敏史可能是濕疹發(fā)病的一項高危因素。
【關(guān)鍵詞】:濕疹 白介素-18 白介素-33 白芍總苷 EASI評分
【學(xué)位授予單位】:天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R758.23
【目錄】:
  • 中文摘要4-7
  • Abstract7-12
  • 縮略語12-13
  • 前言13-15
  • 研究現(xiàn)狀、成果13-14
  • 研究目的、方法14-15
  • 1 實驗對象和方法15-26
  • 1.1 病例來源15
  • 1.2 健康對照組15
  • 1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn)15-16
  • 1.4 排除標(biāo)準(zhǔn)16
  • 1.5 EASI評分標(biāo)準(zhǔn)16-17
  • 1.6 主要試劑17-18
  • 1.7 實驗器材18-19
  • 1.8 試劑的配置19-20
  • 1.9 實驗器具的處理和準(zhǔn)備20-21
  • 1.10 實驗儀器21-22
  • 1.11 實驗方法和步驟22-26
  • 1.12 臨床及實驗室檢查26
  • 1.13 治療方法26
  • 1.14 統(tǒng)計學(xué)方法26
  • 2 實驗結(jié)果26-34
  • 2.1 總RNA純度檢測26-27
  • 2.2 總RNA完整性檢測27
  • 2.3 GAPDH、IL-18、IL-33擴增產(chǎn)物的鑒定27-31
  • 2.4 濕疹患者EASI評分結(jié)果31-32
  • 2.5 濕疹患者IL-18mRNA和IL-33mRNA相對表達(dá)量的分析及與部分指標(biāo)相關(guān)性分析32-34
  • 3 討論34-40
  • 3.1 IL-18在濕疹發(fā)病中的作用機制35-36
  • 3.2 IL-33在濕疹發(fā)病中的作用機制36
  • 3.3 IL-18與IL-3336-38
  • 3.4 IL-18、IL-33與白芍總苷38-40
  • 3.5 家族過敏史與IL-18、IL-3340
  • 4 小結(jié)40-42
  • 結(jié)論42-43
  • 參考文獻(xiàn)43-48
  • 發(fā)表論文和參加科研情況說明48-49
  • 綜述 白介素-18和白介素-33在相關(guān)皮膚病中的研究進(jìn)展49-68
  • 綜述參考文獻(xiàn)61-68
  • 致謝68

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本文編號:404036

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