天皰瘡(pemphigus)是自身抗體介導作用于表皮角質(zhì)形成細胞橋粒芯糖蛋白的自身免疫性大皰性皮膚和粘膜疾病，尋常型天皰瘡(pemphigus vulgaris，PV)是其中最為常見的亞型。盡管已經(jīng)公認橋粒芯糖蛋白-1(desmoglein 1，Dsg1)和橋粒芯糖蛋白-3(desmoglein 3，Dsg3)及其自身抗體與天皰瘡發(fā)病相關，但其確切的發(fā)病機制仍不清楚。新近有研究發(fā)現(xiàn)了人體組織橋粒芯糖蛋白-4(desmoglein4，Dsg4)是PV自身抗體的靶抗原，為該病的研究提供了新的線索。 本項研究目的是擴增人皮膚組織Dsg4胞外域(extracellular domains，ECD)EC1、EC2、EC3和EC4的核酸序列，進一步探討其在PV發(fā)病中的作用。 首先根據(jù)Genebank中人Dsg4的cDNA序列資料，設計Dsg4胞外域EC1、EC2、EC3和EC4 4個DNA片段的特異性引物，通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(reverse-transcription polymerase chain reaction，RT-PCR)法，以提取的人正常皮膚組織總RNA為模板，擴...

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1質(zhì)粒pET32a的物理圖譜

人皮膚組織來源于四川大學華西醫(yī)院皮膚性病科門診色素痣切除術所帶病變周圍正常活體組織，供者為男性，23歲。原核表達質(zhì)粒pET32a(質(zhì)粒物理圖譜見附圖1)、宿主菌(大腸桿菌DH5a)和表達宿主菌(大腸桿菌BLZ)I菌株由四川大學華西基礎醫(yī)學與法醫(yī)學院感染免疫研究室提供。2、主要試劑....

圖2人皮膚組織總RNA電泳圖譜

1、表皮組織RNA瓊脂糖凝膠電泳分析表皮組織總RNA提取產(chǎn)物經(jīng)1.5%瓊脂糖凝膠電泳分析，55、185、285條帶清晰(圖2)，說明RNA無降解。123生2851855S圖2人皮膚組織總RNA電泳圖譜Fig.2EleetroPhorogramoftotalRNArfomhuman....

圖4aDgs4ECI的DNA序列

圖4aDgs4ECI的DNA序列Fig.4aDNASequeneeofDsg4ECI

圖4b重組融合Dsg4Ecl蛋白表達質(zhì)粒陽性克隆的測序結果

圖4aDgs4ECI的DNA序列Fig.4aDNASequeneeofDsg4ECI

本文編號：3938915