目的闡明Genistein對(duì)惡性黑素瘤LiBr細(xì)胞Livin基因表達(dá)的影響和對(duì)惡性黑素瘤細(xì)胞凋亡、周期及增殖的作用，為進(jìn)一步探索Genistein治療惡性黑素瘤的可能性和揭示Genistein的抑癌機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法分別在基因和蛋白水平上應(yīng)用RT-PCR和Western blot檢測(cè)、確認(rèn)惡性黑素瘤LiBr細(xì)胞Livin基因的表達(dá)；在體外以高表達(dá)Livin基因的惡性黑素瘤LiBr細(xì)胞為試驗(yàn)對(duì)象，應(yīng)用RT-PCR檢測(cè)Genistein作用LiBr細(xì)胞后Livin基因的表達(dá)變化，并初步探討其劑量及時(shí)間效應(yīng)；取最適濃度的Genistein作用LiBr細(xì)胞后應(yīng)用Annexin V-FITC/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞凋亡的影響；應(yīng)用PI單染流式細(xì)胞術(shù)分析其對(duì)細(xì)胞周期的改變；應(yīng)用Western blot檢測(cè)其對(duì)凋亡效應(yīng)蛋白caspase-3表達(dá)的影響及應(yīng)用MTT比色法檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞增殖的作用。結(jié)果經(jīng)RT-PCR和Western blot檢測(cè)，惡性黑素瘤LiBr細(xì)胞高表達(dá)Livin基因；Genistein作用LiBr細(xì)胞后能顯著下調(diào)Livin基因表達(dá)，并且下調(diào)過(guò)程呈劑量和時(shí)間依賴關(guān)系，40u... 

【文章來(lái)源】：寧夏醫(yī)科大學(xué)寧夏回族自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
材料與方法
    1 研究對(duì)象
    2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    3 主要實(shí)驗(yàn)試劑
    4 實(shí)驗(yàn)方法
        4.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        4.2 RT-PCR 檢測(cè) LiBr 細(xì)胞 Livin 的表達(dá)
        4.3 Western blot 檢測(cè)、確認(rèn)惡性黑素瘤 LiBr 細(xì)胞 Livin 的表達(dá)
        4.4 Genistein 下調(diào) Livin 基因的劑量效應(yīng)
        4.5 Genistein 下調(diào) Livin 基因的時(shí)間效應(yīng)
        4.6 Annexin V-FITC/PI 雙染流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率
        4.7 Western blot 檢測(cè) Genistein 引起 LiBr 細(xì)胞 caspase-3 蛋白表達(dá)變化的影響
        4.8 PI 單染流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期
        4.9 MTT 檢測(cè) LiBr 細(xì)胞的增殖
    5 質(zhì)量控制
    6 數(shù)據(jù)處理
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述 1
    參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述 2
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄
個(gè)人簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]惡性黑素瘤研究進(jìn)展[J]. 郝慧霞,莎娜.  醫(yī)學(xué)綜述. 2010(12)
[2]Livin基因在惡性腫瘤診斷和治療中的研究進(jìn)展[J]. 周濤琪,張幸平.  實(shí)用腫瘤雜志. 2010(02)
[3]三羥異黃酮對(duì)肝癌細(xì)胞HepG2的ADAM17表達(dá)的調(diào)節(jié)[J]. 劉永存,王作仁,周愛萍,李鋒.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2009(09)
[4]凋亡抑制蛋白Livin在喉癌中的表達(dá)和意義[J]. 張建中,巴云鵬,呂明栓.  中國(guó)耳鼻咽喉頭頸外科. 2008(10)
[5]RNA干擾沉默Livin基因表達(dá)對(duì)食管癌裸鼠移植瘤的抑制作用[J]. 王春麗,何婷玉,馮龍,馬云云,郭文濤,趙國(guó)強(qiáng).  腫瘤基礎(chǔ)與臨床. 2008(05)
[6]非小細(xì)胞肺癌組織中凋亡抑制蛋白Livin的表達(dá)及意義[J]. 高楊,夏慶安,吳瑜,周立君,任淑華.  山東醫(yī)藥. 2008(24)
[7]凋亡抑制蛋白Livin與腫瘤靶向治療[J]. 王莉娜,李莉,張彥兵,曹博淦,肖菊香.  陜西醫(yī)學(xué)雜志. 2008(05)
[8]FHIT,Livin,Smac在口腔鱗癌中的表達(dá)及意義[J]. 陳冰,孫雷,王波.  口腔醫(yī)學(xué)研究. 2008(02)
[9]livin基因在胃癌中的表達(dá)研究[J]. 汪志兵,張振玉,羅新華,王勁松.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2008(04)
[10]惡性黑素瘤最新動(dòng)態(tài)(二)[J]. 李薈元.  中國(guó)美容醫(yī)學(xué). 2008(02)



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