研究表明，人體內天然存在的抗角蛋白自身抗體（anti-keratin auto antibody,AK auto Ab）是維持機體免疫狀態(tài)平衡的重要成員。一些病理情況下（如銀屑病、接觸性皮炎等），AK auto Ab的存在有利于限制病情的進展，促進損傷的修復，對機體具有有益的保護作用。動物實驗和體外研究都提示當機體內AK auto Ab水平低下時，人為補充抗角蛋白抗體有可能成為該類疾病新的治療措施。 目的： 目的基因的高效表達是制備有應用價值的治療性抗體的重要前提�？贵w除用于基礎研究外，還可以在臨床診斷和治療中應用，特別是具有低免疫原性、可以快速到達作用靶點和可迅速清除等優(yōu)點的小分子抗體。我們利用噬菌體抗體庫技術篩選獲得了高親和力、高特異性人源性抗角蛋白抗體。為了提高其產(chǎn)量，我們用大腸桿菌包涵體表達然后體外變性、復性的方法及巴氏畢赤酵母表達等不同方法表達小分子抗角蛋白抗體，以得到高表達的抗角蛋白抗體并為其下一步應用研究打下基礎。 方法：實驗內容共分為3個部分，操作方法簡述如下： 1．抗角蛋白Fab抗體在大腸桿菌中的包涵體表達與復性 以已構建好的質粒p3MH／F... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：95 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
縮略語表
中文摘要
英文摘要
前言
文獻回顧
    1 角蛋白及天然抗角蛋白自身抗體
    2 基因工程抗體及其表達策略
實驗內容
    1 抗角蛋白Fab抗體在大腸桿菌中的包涵體表達與復性研究
        1.1 實驗材料
        1.2 方法與步驟
        1.3 結果
        1.4 討論
    2 人源性抗角蛋白單鏈抗體在巴氏畢赤酵母的分泌表達
        2.1 實驗材料
        2.2 方法與步驟
        2.3 結果
        2.4 討論
    3 人源性抗角蛋白抗體Fab段在巴氏畢赤酵母的分泌表達
        3.1 實驗材料
        3.2 方法與步驟
        3.3 結果
        3.4 討論
小結
參考文獻
個人簡歷
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]畢赤酵母表達系統(tǒng)[J]. 樊建勇.  國外醫(yī)學.預防.診斷.治療用生物制品分冊. 2003(05)
[2]抗角蛋白單克隆抗體5G5對培養(yǎng)角質形成細胞增殖的影響[J]. 張亮,趙小東,劉玉峰,劉彥仿,蘭風華.  中華皮膚科雜志. 2001(04)
[3]包含體蛋白質的復性研究進展[J]. 寧云山,李妍,王小寧.  生物技術通訊. 2001(03)
[4]重組包涵體蛋白質的折疊復性[J]. 馮小黎.  生物化學與生物物理進展. 2001(04)
[5]天然抗角蛋白自身抗體抑制角質形成細胞及鱗狀細胞癌細胞增殖的作用[J]. 王文清,劉玉峰,趙小東,馬翠玲.  中華皮膚科雜志. 2001(03)
[6]天然抗角蛋白自身抗體對體外培養(yǎng)角質形成細胞細胞周期的影響(英文)[J]. 李承新,萬業(yè)宏,劉玉峰,孫林潮.  第四軍醫(yī)大學學報. 2001(05)
[7]畢赤酵母的密碼子用法分析[J]. 趙翔,霍克克,李育陽.  生物工程學報. 2000(03)
[8]抗角蛋白自身抗體研究現(xiàn)狀與展望[J]. 王剛,劉玉峰.  中國皮膚性病學雜志. 2000(01)
[9]從半合成噬菌體抗體庫中篩選抗角蛋白人抗體[J]. 王剛,化冰,王琰,劉玉峰.  中國免疫學雜志. 2000(01)
[10]酵母表達系統(tǒng)表達外源基因的研究進展[J]. 鄭敏,張飛雄,劉麗.  首都師范大學學報(自然科學版). 1999(04)



本文編號：3187835