過表達miR-330-3p通過BMI1對黑色素瘤A375細胞增殖、侵襲及凋亡的影響
發(fā)布時間:2021-03-27 23:58
目的探討過表達miR-330-3p對黑色素瘤A375細胞增殖、侵襲及凋亡的影響。方法采用miR-330-3p模擬物轉(zhuǎn)染黑色素瘤A375細胞,設(shè)置空白組(未進行轉(zhuǎn)染)、miR-330-3p正常對照組(轉(zhuǎn)染無義序列)、miR-330-3p模擬物轉(zhuǎn)染組(轉(zhuǎn)染miR-330-3p模擬物),采用CCK-8法檢測各組A375細胞的增殖,Transwell檢測各組細胞侵襲能力,流式細胞儀檢測各組細胞凋亡,Western blot檢測各組細胞BMI1蛋白表達,應(yīng)用Targetscan和雙熒光素酶報告基因?qū)嶒灆z測BMI1是否為miR-330-3p的靶基因。結(jié)果 miR-330-3p過表達后,A375細胞的增殖和侵襲能力下降,細胞凋亡率上升,BMI1蛋白表達水平下降,生物信息學(xué)分析及雙熒光素酶實驗證實BMI1為miR-330-3p的靶基因。結(jié)論過表達miR-330-3p抑制A375細胞增殖和侵襲,促進其凋亡,與下調(diào)BMI1的表達相關(guān)。
【文章來源】:解剖科學(xué)進展. 2020,26(06)
【文章頁數(shù)】:4 頁
【文章目錄】:
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 細胞培養(yǎng),轉(zhuǎn)染和分組
1.3 q RT-PCR檢測mi R-330-3p的表達水平
1.4 Western blot檢測BMI1蛋白表達
1.5 CCK-8檢測細胞增殖
1.6 Transwell檢測細胞侵襲能力
1.7 流式細胞儀檢測細胞凋亡
1.8 mi R-330-3p的靶基因預(yù)測及雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?br> 1.9 統(tǒng)計分析
2 結(jié)果
2.1 q RT-PCR檢測mi R-330-3p轉(zhuǎn)染效率
2.2 Western blot檢測各組細胞BMI1蛋白表達
2.3 CCK-8檢測細胞增殖活性
2.4 Transwell檢測細胞侵襲能力
2.5 流式細胞儀檢測細胞凋亡
2.6 mi R-330-3p靶基因預(yù)測及雙熒光素酶實驗
3 討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]Bmi-1、Ki-67在黑色素瘤中的表達及其意義[J]. 尹利華,劉純青,曾亮,孟秀香. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2010(10)
本文編號:3104478
【文章來源】:解剖科學(xué)進展. 2020,26(06)
【文章頁數(shù)】:4 頁
【文章目錄】:
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 細胞培養(yǎng),轉(zhuǎn)染和分組
1.3 q RT-PCR檢測mi R-330-3p的表達水平
1.4 Western blot檢測BMI1蛋白表達
1.5 CCK-8檢測細胞增殖
1.6 Transwell檢測細胞侵襲能力
1.7 流式細胞儀檢測細胞凋亡
1.8 mi R-330-3p的靶基因預(yù)測及雙熒光素酶報告基因?qū)嶒?br> 1.9 統(tǒng)計分析
2 結(jié)果
2.1 q RT-PCR檢測mi R-330-3p轉(zhuǎn)染效率
2.2 Western blot檢測各組細胞BMI1蛋白表達
2.3 CCK-8檢測細胞增殖活性
2.4 Transwell檢測細胞侵襲能力
2.5 流式細胞儀檢測細胞凋亡
2.6 mi R-330-3p靶基因預(yù)測及雙熒光素酶實驗
3 討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]Bmi-1、Ki-67在黑色素瘤中的表達及其意義[J]. 尹利華,劉純青,曾亮,孟秀香. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2010(10)
本文編號:3104478
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