目的:檢測(cè)內(nèi)皮抑素基因腺病毒載體表達(dá)系統(tǒng)（Ad-mES）體外生物學(xué)活性及其治療小鼠黑色素瘤的效果;初步探討內(nèi)皮抑素的抗腫瘤機(jī)理。方法:在HEK293細(xì)胞內(nèi)擴(kuò)增腺病毒,50%組織培養(yǎng)感染劑量法測(cè)定其滴度;RT-PCR、Western Blot和ELISA法檢測(cè)目的基因的表達(dá);MTT法和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)靶細(xì)胞的體外生長(zhǎng)情況。多因素多水平析因分析法設(shè)計(jì)測(cè)定體內(nèi)轉(zhuǎn)染率;觀察各組小鼠腫瘤的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移和生存率,Western Blot、免疫組化和透射電鏡等鑒定組織內(nèi)目的基因的表達(dá)、血管生成和靶細(xì)胞的生長(zhǎng)。結(jié)果:腺病毒的滴度為10¹⁰pfu/ml,靶細(xì)胞明確表達(dá)內(nèi)皮抑素基因,Ad-mES抑制內(nèi)皮細(xì)胞的增殖;治療小鼠黑色素瘤時(shí),取瘤內(nèi)注射和間隔7天給藥Ad的體內(nèi)轉(zhuǎn)染率最高（MOI=500時(shí),37.33%）。治療組小鼠平均生存時(shí)間延長(zhǎng),腫瘤體積增長(zhǎng)減慢,腫瘤新生血管生成減少。結(jié)論:Ad-mES對(duì)小鼠黑色素瘤有較好的治療效果。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：97 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

HEK293感染Ad一mES5d(x200)圖l一8HEK293細(xì)胞感染Ad一GFP5d(x200)

圖1一7HEK293感染Ad一mES5d(x200)圖l一8HEK293細(xì)胞感染Ad一GFP5d(x200)圖1一9小量擴(kuò)增時(shí)GFP陽(yáng)性細(xì)胞(x200)圖l一10Ad一mES和Ad一GFP濃縮后的終產(chǎn)物圖1一11培養(yǎng)72h的黑色素瘤細(xì)胞(x200)圖1一12培養(yǎng)72h的ECV304細(xì)胞(X200)

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]重組人血管內(nèi)皮抑制素抗腫瘤效應(yīng)的應(yīng)用研究[J]. 劉江秋,李忠義,陳林生,孫亦紅,徐璐,汪軍遠(yuǎn),劉萬(wàn)興,夏結(jié)來(lái).  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2001(01)



本文編號(hào)：2923327