目的:分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(SFRP5)在多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。然而,SFRP5在黑色素瘤中的作用尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)旨在探討SFRP5對(duì)黑色素瘤細(xì)胞生物學(xué)特征的影響并闡明具體機(jī)制。方法:分別使用免疫組織化學(xué)和Western blot檢測(cè)SFRP5在黑色素瘤組織和黑色素細(xì)胞中的表達(dá)量。在體外,利用MTT實(shí)驗(yàn)、集落形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SFRP5對(duì)黑色素瘤細(xì)胞增殖的影響;流式實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SFRP5對(duì)黑色素瘤細(xì)胞凋亡的影響;劃痕愈合實(shí)驗(yàn)和Tanswell遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SFRP5對(duì)黑色素瘤細(xì)胞遷移的影響;Tanswell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SFRP5對(duì)黑色素瘤細(xì)胞侵襲的影響。機(jī)制方面,利用Western blot探討SFRP5在黑色素瘤細(xì)胞中對(duì)Wnt信號(hào)通路的調(diào)控;Western blot和qRT-PCR檢測(cè)SFRP5對(duì)上皮間葉轉(zhuǎn)化(EMT)以及基質(zhì)金屬蛋白酶2/9(MMP2/9)的影響。在體內(nèi),將處理后的黑色素瘤細(xì)胞接種于裸鼠皮下,觀察SFRP5對(duì)黑色素瘤生長(zhǎng)的影響;免疫組化、Western blot和qRT-PCR檢測(cè)SFRP5對(duì)血管生成的影響;HE染色觀察SFRP5對(duì)黑色素瘤肺轉(zhuǎn)移的作用;免疫組織化學(xué)檢測(cè)瘤體內(nèi)EMT和MMP2/9的表達(dá)情況。結(jié)果:我們發(fā)現(xiàn)SFRP5在黑色素瘤組織和黑色素瘤細(xì)胞中表達(dá)明顯減少。在體外,過表達(dá)SFRP5對(duì)黑色素瘤細(xì)胞的增殖和凋亡沒有影響,但明顯抑制黑色素瘤細(xì)胞遷移和侵襲。機(jī)制方面,過表達(dá)SFRP5通過Wnt信號(hào)通路抑制EMT和減少M(fèi)MP2/9表達(dá),從而抑制黑色素瘤細(xì)胞遷移和侵襲。在裸鼠體內(nèi),過表達(dá)SFRP5通過減少血管生成抑制黑色素瘤生長(zhǎng)以及減少肺轉(zhuǎn)移。結(jié)論:SFRP5抑制黑色素瘤細(xì)胞遷移與侵襲,其機(jī)制可能與Wnt信號(hào)通路有關(guān)。
【學(xué)位單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R739.5
【部分圖文】：

圖 1.1 SFRP5 在黑色素瘤組織中表達(dá)下調(diào)Figure1.1 SFRP5 expression was downregulated in melanoma tissuesA: SFRP5 在黑色素瘤組織和正常皮膚組織中的免疫組化結(jié)果；B：SFRP5 陰性表達(dá)率和陽(yáng)性表達(dá)率；C：GEPIA 數(shù)據(jù)庫(kù)中 SFRP5 在正常皮膚組織和黑色素瘤組織中的表達(dá)量。A: Representative immunohistochemical staining of SFRP5 in normal skin and melanoma

圖 1.2 SFRP5 在黑色素瘤細(xì)胞中表達(dá)下調(diào) 1.2 SFRP5 expression was downregulated in melanoma析 SFRP5 在人黑色素細(xì)胞和黑色素瘤細(xì)胞株中的表達(dá)sion in human epidermal melanocytes cell line and meln blot analysis. ***P＜0.001

結(jié)果顯示過表達(dá) SFRP5 對(duì) A375 細(xì)胞和 GLL-19 細(xì)胞的凋亡沒有影響（圖2.1D）。圖 2.1 過表達(dá) SFRP5 對(duì)黑色素瘤細(xì)胞增殖和凋亡的影響Figure 2.1 The effect of SFRP5 overexpression on proliferation and apoptosisA：Western blot 分析 A375 細(xì)胞和 GLL-19 細(xì)胞轉(zhuǎn)染 AdSFRP5 后 SFRP5 的表達(dá)量；B：

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1 ;維生素D可降低黑色素瘤細(xì)胞的攻擊性[J];微循環(huán)學(xué)雜志;2019年04期

2 羅振革,高杰英,李紅,彭虹,朱錫華;CD44單克隆抗體對(duì)人黑色素瘤細(xì)胞的體內(nèi)外生物學(xué)特性的影響[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;1996年05期

3 王結(jié)義;王龍生;宋家g

本文編號(hào)：2824929