生殖器皰疹(GH)是一種由Ⅱ型單純皰疹病毒(HSV-2)引起的、日益增多的傳染力極強的病毒性、性傳播性疾病。具有潛在致癌性，易引起胎兒早產、死胎并且為HIV感染的危險因素，極易傳播及復發(fā)，目前尚無特效藥物治療。生殖器皰疹的傳統(tǒng)治療包括一般性治療、抗病毒治療以及中醫(yī)藥治療。但需要指出的是，抗皰疹病毒藥物治療僅能減輕HSV感染者的癥狀和改善其體征，減少排毒，但治療還不能徹底清除病毒。一般性的治療和傳統(tǒng)的中醫(yī)藥事實上也只是對癥治療。在防治HSV-2感染的手段中，疫苗是免疫治療的有效手段之一。傳統(tǒng)的疫苗雖然廣泛應用于臨床，但是也存在許多缺點。目前研制的減毒疫苗，基因工程疫苗及DNA疫苗治療疾病都是一個主動免疫的過程，對于目前日益增多的免疫缺陷和免疫功能低下的患者來說，疫苗就不能充分發(fā)揮其治療的優(yōu)勢作用。 近年來隨著人們生活方式的改變，免疫缺陷患者(如AIDS)及醫(yī)源性免疫功能低下的患者逐漸增多，傳統(tǒng)的抗病毒藥物治療及疫苗的主動免疫治療尚不能滿足此類HSV感染的發(fā)病趨勢。作為被動免疫的抗體治療是GH治療有力的補充，用基因工程方法將抗體重鏈可變區(qū)(V_H)和輕鏈可變區(qū)(V_L)通過一段連接肽(Linker)連接而成的重組人源性單鏈抗體在GH治療中的應用將為其治療開辟一
【學位單位】：第一軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2006
【中圖分類】：R752.1
【部分圖文】：

圖3.1外周血淋巴細胞的總RNAFig.3一1Ide沛fieationoftotdRNAofsPlneoeyte1一3:TotalRNAof:Plenoeyte.的合成為模板，01190(dT)2。為逆轉錄第1鏈。經瓊脂糖凝膠電泳

第三章結果與討論21圖3一2cDNA第一鏈Fig.3一2幾e份stsrtnadofCDNA1一2:ProudetofreversertnasePnt.3.1.3scFv基因的擴增3.1.3.1全套V。、VL基因的擴增以CoNA第l鏈為模板，分別以v.，back和v，，for以及v:baek和VLfor為引物，分別PCR擴增全套v.l、.V基因，擴增產物進行瓊脂糖凝膠電泳，表明擴增出的V}，基因片段約為360bp，vl.基因片段約為32Obp

1全套VH、VL基因再擴增以添加酶切位點及連接膚序列凝膠電泳表明，加上連接膚及酶切位點序列后，v;:基因再擴增的產物約為440bp，v.‘基因再擴增的產物約為420bp，見圖3一5。2IM一200D一1000一750一500一2D0一100圖3一5VH、VL基因PCR再擴增產物的瓊脂糖凝膠電泳鑒定Fig3一5Identi五e北onofseeondPCRampli五edProudetsofVH，VLgenebyagarosegelelee仃oPhoreslsM:DNAma宜.kerDL，20001:Seeond故叩五五edProudetsofVHgene2:SecondamPli五edProude始ofVLgene3.1.3.2.2SFcv基因的組裝及擴增基因重疊延伸PCR后，瓊脂糖凝膠中電泳后，得到1條約76Obp的片段，同預期的結果相符。見圖3一6。

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本文編號：2813809