【摘要】：當(dāng)今社會(huì),人們壓力越來(lái)越大,焦慮、抑郁、精神緊張等負(fù)性情緒逐漸增多。長(zhǎng)期的負(fù)性情緒可以造成機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)紊亂,引發(fā)心身疾病,心身疾病持久不愈又可以加重負(fù)性情緒,形成惡性循環(huán)。銀屑病屬于典型的心身疾病。銀屑病病程長(zhǎng)、易復(fù)發(fā)、難治愈,影響外觀,對(duì)患者的精神狀態(tài)影響甚大。銀屑病的發(fā)病機(jī)制不清,遺傳、精神神經(jīng)因素可能在其發(fā)病中起到重要作用。遺傳學(xué)研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了許多銀屑病易感基因,其中REL基因和TNIP1基因可能在銀屑病的發(fā)病過(guò)程和易感性等方面發(fā)揮了重要的作用。目的探討REL、TNIP1基因多態(tài)性及負(fù)性情緒與銀屑病的相關(guān)性,為銀屑病患者的預(yù)防和臨床治療提供重要理論依據(jù)和指導(dǎo)。方法在2014年5月至2015年12月間收集419例銀屑病患者和416例健康對(duì)照。采用焦慮自評(píng)量表(SAS)、抑郁自評(píng)量表(SDS)、匹茲堡隨眠指數(shù)(PSQI)量表對(duì)受試對(duì)象進(jìn)行負(fù)性情緒和睡眠質(zhì)量的評(píng)定;提取受試者全血DNA,用連接酶檢測(cè)反應(yīng)方法對(duì)REL基因SNP位點(diǎn)rs702873及TNIP1基因SNP位點(diǎn)rs17728338進(jìn)行基因檢測(cè)分型。利用epidata軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)錄入,所有描述性統(tǒng)計(jì)利用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。對(duì)基因分型數(shù)據(jù)利用軟件SPSS 13.0和PLINK1.07進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果銀屑病組伴焦慮和抑郁人數(shù)比例分別為44.9%、63%,健康對(duì)照組伴焦慮和抑郁人數(shù)比例分別為7.5%、11.8%,銀屑病組顯著高于對(duì)照組(P=0.000)。銀屑病組SAS評(píng)分為41.33±8.00分,SDS評(píng)分為45.21±9.06分,健康對(duì)照組SAS評(píng)分為36.57±7.66分,SDS評(píng)分為29.08±10.36分,銀屑病組SAS、SDS得分顯著高于對(duì)照組(P=0.000)。銀屑病組和健康對(duì)照組存在睡眠障礙人數(shù)比例分別為59.2%、32.2%,銀屑病組顯著高于對(duì)照組(P=0.000)。銀屑病組PSQI平均得分為7.36±2.31分,健康對(duì)照組PSQI平均得分為3.46±2.02分,銀屑病組顯著高于健康對(duì)照組(P=0.000)。年齡及家庭年收入水平與銀屑病患者的SAS評(píng)分呈顯著負(fù)相關(guān);女性銀屑病患者PSQI評(píng)分顯著高于男性銀屑病患者;非尋常型銀屑病患者PSQI評(píng)分顯著高于尋常型銀屑病患者;銀屑病患者心理狀況評(píng)分(SAS評(píng)分、SDS評(píng)分)與睡眠質(zhì)量評(píng)分(PSQI評(píng)分)呈顯著的正相關(guān)。銀屑病組和健康對(duì)照組中REL基因多態(tài)位點(diǎn)rs702873的A等位基因頻率分別為9.90和17.30,銀屑病組A等位基因頻率較健康對(duì)照組顯著降低(P0.01,OR=0.525,95%CI:0.393-0.701)。銀屑病組和健康對(duì)照組中TNIP1基因多態(tài)位點(diǎn)rs17728338的A等位基因頻率分別為15.16和8.05,銀屑病組A等位基因頻率較健康對(duì)照組顯著增高(P0.01,OR=2.039,95%CI:1.491-2.789)。銀屑病REL基因多態(tài)位點(diǎn)rs702873的A等位基因頻率在伴焦慮組為6.38,不伴焦慮組為12.77,A等位基因頻率在銀屑病伴焦慮組明顯低于不伴焦慮組(P0.01)。銀屑病REL基因多態(tài)位點(diǎn)rs702873的A等位基因頻率在伴抑郁組為6.25,不伴抑郁組為15.81,A等位基因頻率在銀屑病伴抑郁組明顯低于不伴抑郁組(P0.01)。銀屑病TNIP1基因多態(tài)位點(diǎn)rs17728338的A等位基因頻率在伴焦慮組為19.68,不伴焦慮組為11.47,A等位基因頻率在銀屑病伴焦慮組顯著高于不伴焦慮組(P0.01)。銀屑病TNIP1基因多態(tài)位點(diǎn)rs17728338的A等位基因頻率在伴抑郁組為18.18,不伴抑郁組為10.32,A等位基因頻率在銀屑病伴抑郁組顯著高于不伴抑郁組(P0.01)。結(jié)論1、焦慮、抑郁等負(fù)性情緒和睡眠障礙與銀屑病密切相關(guān);2、銀屑病患者心理狀況評(píng)分(SAS評(píng)分、SDS評(píng)分)與睡眠質(zhì)量評(píng)分(PSQI評(píng)分)呈顯著的正相關(guān),表明隨著SAS評(píng)分及SDS評(píng)分的升高,PSQI評(píng)分也逐漸升高。3、REL基因多態(tài)位點(diǎn)rs702873和TNIP1基因多態(tài)位點(diǎn)rs17728338等位基因及基因型與銀屑病具有遺傳相關(guān)性,與銀屑病的發(fā)病年齡、家族史無(wú)明顯相關(guān)性;4、負(fù)性情緒與REL基因多態(tài)位 rs702873和TNIP1基因多態(tài)位點(diǎn)rs17728338交互作用對(duì)銀屑病具有相關(guān)性。
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R758.63
【圖文】：

邐第二部分ＲＥＬ、ＴＮＩＰ１基因多態(tài)性及負(fù)性情緒與銀屑病相關(guān)性研究邐逡逑片段的ＰＣＲ（Ｌｏｎｇ－Ｒａｎｇｅ邋Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ邋Ｃｈａｉｎ邋Ｒｅａｃｔｉｏｎ，ＬＲ－ＰＣＲ）擴(kuò)增出整個(gè)基因片逡逑段，然后把ＬＲ＿ＰＣＲ產(chǎn)物稀釋１００倍后再作為ＤＮＡ的模板，進(jìn)行外顯子的擴(kuò)增。逡逑１．２．７．２．２連接酶檢測(cè)反應(yīng)（ｌｉｇａｓｅ邋ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ丨＇ｅａｃｔｉｏｎ，ＬＤＲ）原理和測(cè)序分型原理逡逑ＬＤＲ的原理是使用高溫連接酶來(lái)識(shí)別基因多態(tài)性的位點(diǎn)。如果高溫連接酶逡逑檢測(cè)到ＤＮＡ和互補(bǔ)的兩條寡聚核苷酸接頭對(duì)應(yīng)處存在著基因點(diǎn)突變類型的堿基逡逑錯(cuò)配，那么連接反應(yīng)就不能進(jìn)行＾３２１．逡逑如圖１－２：右邊的探針和模板有一個(gè)堿基不能配對(duì)，因此，連接反應(yīng)不能進(jìn)逡逑行，所以沒(méi)有連接產(chǎn)物；左邊的探針和模板ＤＮＡ完全的互補(bǔ)，所以能進(jìn)行連逡逑接反應(yīng)。通過(guò)溫度控制循環(huán)，該特異性連接反應(yīng)可以反復(fù)的進(jìn)行，一直達(dá)到線逡逑性擴(kuò)增的效果。逡逑

逡逑如圖１－３：檢測(cè)結(jié)果說(shuō)明，左邊位點(diǎn)即突變位點(diǎn)一，是Ａ／Ｃ雜合子；右邊逡逑位點(diǎn)即突變位點(diǎn)二，是Ｔ純合子。逡逑ａ－邐＜】！物邋２逡逑邐邋—＊邋邋邐P櫹楸荊模灣義稀昵柏危危矗沖義希懾澹媯椋歟酰歟歟椋穡歟澹澹潁錚翦義襄危垮文康捏遙繞渝五五五五義襄危咤魏恢壞鬩誨五�？］辶x希停酰歟簦椋穡歟澹澹蹋模隋義希臀壞鬩誨澹迷雍獻(xiàn)櫻粒緬澹╁蝁>變位：點(diǎn)二（托合子Ｔ邋）逡逑？邋邐邐邐邋３ｆ邐邐邐邐邋３ｒ逡逑邐１邋邐禽邋－＾５？光探計(jì)邐邐￡邐１逡逑Ｇ邐Ａ逡逑ＵＥＳ？邐ＬＤＰｋＳＪｍ逡逑７邐！，逡逑Ｔ邋｜逡逑￣！邐＂１連接產(chǎn)物邐ｊ４邐ｋ逡逑丨丨■丨丨■丨—一—＊邐」長(zhǎng)度不間邐太邐＾—★逡逑ｔ邋？n,序儀檢測(cè)逡逑ｉｒ逡逑．＾邐邐逡逑圖１－３：測(cè)序分型原理逡逑Ｆｉｇ．邋１－３邋Ｔｈｅ邋ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ邋ｏｆ邋ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ邋ｂｙ邋ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ逡逑１．２．７．２．３多重ＰＣＲ擴(kuò)增逡逑Ａ在ＰＣＲ的薄壁管中，配制２０Ｗ的多重ＰＣＲ體系：１０ｍＭＴｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ７．４），逡逑２．ＯｍＭ邋ＭｇＣ１２，５０ｍＭ邋ＫＣ１，０．５｜ｉＭ邋Ｐｒｉｍｅｒｓ邋，２００ｍＭ邋ｄＮＴＰｓ，１Ｕ邋ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ。再力口逡逑入２以基因組ＤＮＡ。ＰＣＲ反應(yīng)體系見(jiàn)表１－７逡逑４３逡逑

圖５：電泳與Ｇｅｎｅｍａｐｐｅｒ分析逡逑Ｆｉｇ．邋１－５邋Ｔｈｅ邋ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ邋ａｎｄ邋Ｇｅｎｅｍａｐｐｅｒ邋ａｎａｌｙｓｉｓ逡逑１．３統(tǒng)計(jì)學(xué)方法逡逑１．３．１整理數(shù)據(jù)：將Ｇｅｎｅｍａｐｐｅｒ軟件數(shù)掘分析結(jié)果得出的ＲＥＬ貓因多態(tài)位點(diǎn)逡逑ｒｓ７０２８７３和ＴＮＩＰＩ基因多態(tài)位點(diǎn)ｒｓｌ７７２８３３８的基因分型數(shù)據(jù)，導(dǎo)入Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ邋Ｅｘｃｅｌ逡逑表中，讓研宄對(duì)象的臨床資料和基因型相對(duì)應(yīng)，篩選出每個(gè)基因型及等位基因逡逑４７逡逑

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本文編號(hào)：2780589