本文關(guān)鍵詞：抑黑方和促黑方調(diào)節(jié)人黑色素瘤A375細(xì)胞黑色素合成及酪氨酸酶活性的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：從臨床治療黃褐斑和白癜風(fēng)常用中藥中篩選調(diào)節(jié)黑色素合成的有效中藥以研制抑制和促進(jìn)黑色素合成的中醫(yī)方劑，觀察該方對(duì)黑色素合成及酪氨酸酶活性的作用，探討抑黑方和促黑方治療色素障礙性皮膚病的作用機(jī)制和中醫(yī)病機(jī)，為中醫(yī)治療色素障礙性皮膚病提供有效方劑。 方法：從近30年中國期刊全文數(shù)據(jù)庫檢索治療黃褐斑和白癜風(fēng)總結(jié)出常用270味中藥作為候選中藥，用95%乙醇室溫提取1周制備中藥醇提物；以100μg/ml藥物濃度處理人黑色素瘤A375細(xì)胞48小時(shí)后，用MTT法測定細(xì)胞生長活性，用NaoH裂解法測定黑色素含量，計(jì)算藥物抑制或促進(jìn)黑色素合成率，選出黑色素合成抑制率或促進(jìn)率高的藥物，分別檢測藥物作用量效關(guān)系；運(yùn)用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)選出最佳的藥物組合組成抑制或促進(jìn)黑色素合成方劑，，分別命名為抑黑方和促黑方。檢測抑黑方和促黑方對(duì)人黑色素瘤A375細(xì)胞黑色素合成的量效和時(shí)效關(guān)系，用多巴氧化法檢測對(duì)人黑色素瘤A375細(xì)胞酪氨酸酶活性的量效和時(shí)效關(guān)系，在倒置顯微鏡下觀察黑色素瘤A375細(xì)胞形態(tài)變化并拍照。 結(jié)果：1.調(diào)節(jié)人黑色素瘤A375細(xì)胞黑色素合成中藥的篩選和方劑研制。分別用270味中藥醇提物以100μg/ml濃度處理人黑色素瘤A375細(xì)胞48h后，對(duì)加藥組與對(duì)照組的黑色素含量和細(xì)胞數(shù)光密度值（OD）進(jìn)行單因素方差分析，選擇對(duì)黑色素合成有明顯差異而對(duì)細(xì)胞數(shù)無明顯差異的藥物，結(jié)果確定抑制黑色素藥物6味：荔枝核、香附、豬苓、薏苡仁、枸杞子和龜板；促進(jìn)黑色素藥物6味：木香、川楝子、巴戟天、杜仲、蟬蛻和白芷。經(jīng)過正交試驗(yàn)分析優(yōu)選出由分別上述兩組中藥組成的抑制黑色素合成方和促進(jìn)進(jìn)黑色素合成方，分別命名為抑黑方和促黑方。 2.抑黑方和促黑方對(duì)人黑色素瘤A375細(xì)胞黑色素合成作用呈量效和時(shí)效關(guān)系。當(dāng)抑黑方和促黑方藥物濃度為6.25～100μg/ml時(shí),隨著藥物濃度增加,對(duì)人黑色素瘤A375細(xì)胞黑色素合成抑制率和促進(jìn)率都增強(qiáng)，藥物濃度至100μg/ml時(shí)達(dá)到最高峰值；當(dāng)濃度為200～800μg/ml時(shí),隨著藥物濃度增高，黑素抑制率和促進(jìn)率都呈下降趨勢，至800μg/ml時(shí)都降至最低峰值。 3.抑黑方和促黑方對(duì)人黑色素瘤A375細(xì)胞酪氨酸酶活性作用呈量效和時(shí)效關(guān)系。抑黑方和促黑方濃度為6.25～100μg/ml時(shí)，隨著藥物濃度增加，對(duì)人黑色素瘤A375細(xì)胞酪氨酸酶活性抑制率和促進(jìn)率都增加，藥物濃度為100μg/ml達(dá)最高峰值；當(dāng)濃度為200～800μg/ml時(shí)，隨著藥物濃度增加，對(duì)酪氨酸酶活性抑制率和促進(jìn)率都呈下降趨勢，至800μg/ml時(shí)降至最低峰值。 4.正常人黑色素瘤A375細(xì)胞鏡下呈梭形，當(dāng)用100μg/ml藥物濃度處理細(xì)胞48小時(shí)后，抑黑方與對(duì)照組比較，細(xì)胞體積減小，細(xì)胞樹突變少，細(xì)胞內(nèi)黑素顆粒明顯減少；促黑方與對(duì)照組比較，細(xì)胞體積增大，細(xì)胞樹突增多，細(xì)胞呈梭形，三級(jí)或多級(jí)，細(xì)胞內(nèi)黑素顆粒顯著增加。 結(jié)論: 1.本研究為治療色素障礙性皮膚病提供了有效方劑抑黑方和促黑方。 2.抑黑方抑制黑色素合成和促黑方促進(jìn)黑色素合成具有劑量和時(shí)間依賴性作用。 3.抑黑方和促黑方對(duì)黑色素合成作用與調(diào)節(jié)酪氨酸酶活性作用呈正相關(guān)。 4.通過文獻(xiàn)分析和實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明：色素障礙性皮膚病存在肝郁、腎虛、風(fēng)濕邪侵病機(jī)。
【關(guān)鍵詞】：人黑色素瘤細(xì)胞A375 黑色素 酪氨酸酶 抑黑方 促黑方
【學(xué)位授予單位】：河南中醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號(hào)】：R739.5
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-12
• 材料與方法12-20
• 1 實(shí)驗(yàn)材料12-14
• 2 實(shí)驗(yàn)方法14-18
• 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法18-20
• 結(jié)果20-36
• 1 調(diào)節(jié)人黑色素瘤 A375 細(xì)胞黑色素合成中藥的篩選20
• 2 所選 12 味中藥對(duì)人黑色素瘤 A375 細(xì)胞黑色素合成的作用20-28
• 3 正交實(shí)驗(yàn)確定抑制黑色素合成和促進(jìn)黑色素合成最佳藥物組合28-32
• 4 抑黑方和促黑方對(duì)人黑色素瘤 A375 細(xì)胞黑色素合成的作用32-33
• 5 抑黑方和促黑方對(duì)人黑色素瘤 A375 細(xì)胞酪氨酸酶活性的作用33-34
• 6 抑黑方和促黑方對(duì)人黑色素瘤 A375 細(xì)胞形態(tài)學(xué)的影響34-36
• 討論36-42
• 1 抑黑方和促黑方對(duì)人黑色素瘤 A375 細(xì)胞黑色素合成的作用36-37
• 2 抑黑方和促黑方對(duì)人黑色素瘤 A375 細(xì)胞酪氨酸酶活性的作用37-38
• 3 抑黑方和促黑方體現(xiàn)中醫(yī)對(duì)色素障礙性皮膚病病因病機(jī)的探討38-42
• 結(jié)論42-44
• 參考文獻(xiàn)44-46
• 附錄 1 文獻(xiàn)綜述46-52
• 參考文獻(xiàn)51-52
• 附錄 2 在校期間論文論著和科研情況52

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 詹紅生;含藥血清實(shí)驗(yàn)方法及其在中藥新藥研制中的應(yīng)用展望[J];浙江中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2000年02期

2 郭念筠;滋補(bǔ)肝腎法治療自癜風(fēng)的臨床體會(huì)[J];北京醫(yī)學(xué);1980年04期

3 陳可平;王禾;;滋補(bǔ)肝腎疏風(fēng)解郁法治療白癜風(fēng)150例療效分析[J];北京中醫(yī);2006年10期

4 寧嶺;皮膚的美白[J];日用化學(xué)工業(yè);1998年03期

5 鄧燕,楊柳;當(dāng)歸對(duì)體外黑素細(xì)胞和酪氨酸酶的激活作用[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2003年03期

6 馬慧軍,朱文元,岳學(xué)狀,王大光;甲氧沙林對(duì)培養(yǎng)人表皮黑素細(xì)胞黑素合成的影響及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究[J];臨床皮膚科雜志;2004年09期

7 馬慧軍,朱文元,王大光,岳學(xué)狀;中藥單體胡椒堿促進(jìn)表皮黑素細(xì)胞黑素合成的實(shí)驗(yàn)研究[J];臨床皮膚科雜志;2005年01期

8 成愛華;韓梅海;;黑素再生中藥對(duì)體外培養(yǎng)的黑素細(xì)胞酪氨酸酶基因和c-kit基因表達(dá)的影響[J];中國臨床醫(yī)學(xué);2008年01期

9 羅增香;項(xiàng)蕾紅;李劍;張勇;鄭志忠;;兩味中藥單體對(duì)人黑素細(xì)胞酪氨酸酶活性及黑素合成的影響[J];中國麻風(fēng)皮膚病雜志;2008年08期

10 易建平;黃聯(lián)繼;易建昌;;歸芪二白凝膠外治黃褐斑62例療效觀察[J];新中醫(yī);2006年05期

  本文關(guān)鍵詞：抑黑方和促黑方調(diào)節(jié)人黑色素瘤A375細(xì)胞黑色素合成及酪氨酸酶活性的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：271867