【摘要】：病毒性疾病發(fā)病率高,流行范圍廣,對(duì)人類的健康構(gòu)成很大威脅,特別是艾滋病及其病原病毒的發(fā)現(xiàn)、SAPS病毒的流行等,使病毒性疾病日益引起人們的重視。水痘-帶狀皰疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)歸類于皰疹病毒科,人是其唯一的宿主,是引起人類水痘和帶狀皰疹兩種疾病的病原。在免疫力低下的患者中,特別是HIV感染者,水痘和帶狀皰疹可出現(xiàn)嚴(yán)重的并發(fā)癥;特別是帶狀皰疹具有特征性的神經(jīng)痛,年老體弱者疼痛劇烈,甚至難以忍受,某些帶狀皰疹患者甚至在皮疹消退后,仍遺留神經(jīng)痛,此種神經(jīng)痛可持續(xù)數(shù)月甚至數(shù)年之久。因此及時(shí)有效地控制VZV感染無論是對(duì)于減少并發(fā)癥還是減少后遺神經(jīng)痛都是非常必要的。近年來新型抗病毒藥物的出現(xiàn)和發(fā)展為VZV感染的治療提供了更多的選擇,如阿昔洛韋、更昔洛韋等。 目的:本實(shí)驗(yàn)通過VZV Vero細(xì)胞培養(yǎng)的方法分離VZV野生菌株,并運(yùn)用細(xì)胞病變法評(píng)價(jià)抗病毒藥物更昔洛韋和阿昔洛韋的Vero細(xì)胞毒性和體外抗VZV野生菌株和標(biāo)準(zhǔn)菌株活性。 方法:①采用Vero細(xì)胞培養(yǎng)的方法分離鑒定VZV野生菌株;②將分離鑒定的野生菌株VZV4和標(biāo)準(zhǔn)菌株VZV-Ellen確定感染滴度,計(jì)算半數(shù)組織培養(yǎng)感染量(median tissue culture infective dose,TCID50);③檢測(cè)Vero細(xì)胞、Hela細(xì)胞、McCoy細(xì)胞對(duì)VZV的敏感性;④確定更昔洛韋和阿昔洛韋Vero細(xì)胞毒性,分別計(jì)算更昔洛韋和阿昔洛韋的半數(shù)中毒濃度(median toxic concentration,TC50)和最大無毒濃度(maximal nontoxic concentration,TC0);⑤進(jìn)行更昔洛韋和阿昔洛韋體外抗VZV活性實(shí)驗(yàn),分別計(jì)算更昔洛韋和阿昔洛韋抗野生菌株VZV4和標(biāo)準(zhǔn)菌株VZV-Ellen的半數(shù)有效濃度(50% effective concentration,EC50)和治療指數(shù)(therapeutic index,TI)。 結(jié)果:①通過對(duì)VZV引起細(xì)胞病變的直接觀察、Giemsa染色、HE染色、直接免疫熒光等方法,4株野生型VZV病毒得到鑒定;②臨床分離的野生菌株VZV4的TCID50為10~(-3.08±0.35)/0.2mL,標(biāo)準(zhǔn)菌株VZV-Ellen的TCID50為
【圖文】：

圖1第3天，未染色，loox圖1、2示:可見生長成致密單層vem細(xì)胞貼壁良好，圖2第3天，未染色，Zoox生長旺盛，分布均勻，死亡細(xì)胞數(shù)很少見McCyo細(xì)胞為成纖維細(xì)胞型形態(tài)，系雙極或三極，細(xì)胞呈梭形，邊界比上皮型細(xì)胞清楚，胞體較大，胞漿豐富。傳代48h后，細(xì)胞貼壁良好，生長旺盛，，分布均勻，呈紡錘形，層次感強(qiáng)，有雙極樹突狀結(jié)構(gòu)，已形成致密單層(圖4)。圖3Hela細(xì)胞

士研究生學(xué)位論文結(jié)果結(jié)果1Veor細(xì)胞、Hela細(xì)胞和McCoy細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞生長狀態(tài)的好壞直接影響著培養(yǎng)的結(jié)果。對(duì)生長良好細(xì)胞在置顯微鏡下進(jìn)行了形態(tài)學(xué)觀察。見Veor細(xì)胞和Hela細(xì)胞為上皮型細(xì)胞形，具有扁平不規(guī)則多角形，中有圓形核，細(xì)胞緊密相連成單層膜。傳代4h8，細(xì)胞貼壁良好，生長旺盛，分布均勻，層次感強(qiáng)，已形成致密單層(圖1一3)。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號(hào)】：R752.12

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2639294