【摘要】： 第一部分正常皮膚的CLSM檢測及生理學評價 目的:對正常人群皮膚的生理狀態(tài)相關指標進行測定和評價。方法:運用在體共聚焦激光掃描顯微鏡與組織病理切片相對照,分辨皮膚的各層結構;并對100例正常人的前額、面頰、背部、前臂屈側和伸側進行表皮各層和真皮淺層的成像,包括角質層、顆粒層、棘層、基底層及真皮乳頭層,分別測量各層的厚度、細胞直徑、密度等指標,并進行統(tǒng)計學分析。結果:CLSM圖像與組織病理切片可對照辨認出各層細胞及結構;角質層在深色皮膚的個體及曝光部位較明亮,面部的皮溝和皮紋較明顯;非曝光部位顆粒層角質形成細胞直徑明顯大于曝光部位;曝光部位的真皮乳頭排列較隨意,數(shù)量較多,形狀不規(guī)則;而非曝光部位的皮膚真皮乳頭比較平整,數(shù)量較少,形狀為規(guī)則的橢圓形。表皮各層細胞厚度測定顯示:角質層為1.6～11.1 um(均值為7.065±1.14);顆粒層為3.2～14.3 um(均值為8.32±1.36);棘層為10.4～29.3um(均值為19.32±2.86);表皮最小厚度為30.6～48.8um(均值為34.7±2.13),在前臂屈側最薄(p＜0.05)。顆粒層的細胞直徑為20.7～39.6um(均值30.62±4.33):棘細胞層的直徑為14.4～24.7um(均值20.19±2.22);基底層角質形成細胞的直徑為7～10.1 um(均值9.44±0.96)。結論:正常人表皮各層厚度和細胞大小因部位而有所不同,曝光部位的角質層較厚;顆粒層細胞最大,而且非曝光部位各層的細胞直徑大于曝光部位,表明曝光部位可能受外界影響較大。通過初步測定正常漢族人表皮的形態(tài)學指標,為進一步的疾病檢測奠定了基礎。 第二部分CLSM在色素異常性疾病觀察和診斷中的應用 目的:對正常人生理狀態(tài)下表皮內黑素分布的相關測定指標進行測定,并對CLSM在白癜風、無色素痣的鑒別診斷和黃褐斑的隨訪中的應用進行評價。方法:將在體共聚焦激光掃描顯微鏡圖像與組織病理切片相對照,并對100例正常人的前額、面頰、背部、前臂屈側和伸側進行基底層角質形成細胞黑素帽的直徑、密度、亮度進行測量。對臨床Nd∶YAG激光治療隨訪的黃褐斑患者進行隨訪檢測,分析其相應的組織學特征;對臨床確診的白癜風和無色素痣患者的圖像進行分析,歸納相應的診斷指標,并在盲態(tài)下評價該指標診斷的有效性。結果:通過上述研究,我們發(fā)現(xiàn)正常皮膚中在基底層角質形成細胞中可檢測到“黑素帽”結構,而黑素細胞不易發(fā)現(xiàn)。黃褐斑患者皮損癥狀的臨床評分與CLSM評分具有良好的一致性;在Nd∶YAG激光治療隨訪過程中皮損改善程度的臨床評分和CLSM評分亦高度相關。治療后半小時基底層角質形成細胞的黑素帽結構崩解,隨后黑素顆粒隨表皮代謝由下而上逐漸排出;黃褐斑患者治療結束后,基底層樹枝狀黑素細胞大量出現(xiàn)。黑素分布的主要范圍(A,Area),黑素亮度(B,Brightness)是否＞3,皮損區(qū)與周圍分界是否清晰(C,Clearance)以及黑素密度(D,Density)是否≤30%可作為白癜風與無色素痣的鑒別診斷的主要標準,其敏感性和特異性分別可達80%～92.5%和58.06%～81.7%,其中黑素密度(D,Density)是否≤30%的特異性和敏感性平衡較好;指標兩兩結合可顯著提高鑒別診斷的特異性。結論:CLSM圖像可作為黃褐斑患者癥狀評價的可靠指標之一;治療后黃褐斑患者基底層樹枝狀黑素細胞的存在可能是復發(fā)的基礎;上述ABCD4個指標可作為白癜風與無色素痣鑒別診斷的重要依據(jù)。 第三部分CLSM用于基底細胞癌和日光性角化病的診斷 目的:對CLSM在基底細胞癌和日光性角化中的診斷標準進行初步設定,并評價其診斷的有效性。方法:對經組織病理學確診的基底細胞癌和日光性角化的圖像分別進行分析,歸納各自相應的特異性診斷指標,并在盲態(tài)下采用回顧性分析方法分別對所有圖像進行判讀,評價CLSM圖像診斷的特異性和敏感性。同時對基底細胞癌患者臨床診斷的準確率與CLSM診斷的準確率相對照。結果:基底細胞癌的診斷指標設為1)拉長的單一形態(tài)的基底細胞核;2)極性細胞核同一軸向分布;3)炎細胞浸潤;4)真皮血管增多;5)表皮角質形成細胞多形性。其中同一軸向的極性核的敏感性(90.9%)和特異性(97.4%)都較高;隨著CLSM診斷標準的兩兩疊加,診斷的敏感性和特異性均有一定程度的提高,其中以拉長的單一形態(tài)的細胞核和同一軸向分布相結合的敏感性和特異性平衡最好,分別為90.9%和97.4%。隨著符合診斷的標準數(shù)目的增加,基底細胞癌診斷的特異性逐漸增加,5個標準均符合的特異性最高,為100%。臨床高度懷疑BCC診斷的為29例其中病理確診的為18例,診斷率為62.1%;CLSM圖像可顯著提高診斷的準確性(93.1%)。日光性角化病的診斷指標設為角化過度;角質形成細胞不典型增生;真皮淺層炎癥細胞浸潤;血管增多增粗;光化性彈力纖維變性;其中角質形成細胞不典型增生的敏感性(97.1%)和特異性(83.3%)較高,可作為主要的診斷指標。 結論:CLSM對基底細胞癌和日光性角化病的診斷指標具有較高的敏感性和特異性,可顯著提高臨床診斷的準確率,因此可作為有效可靠的診斷手段用于二者的早期篩查、診斷和治療隨訪觀察。
【圖文】：

VivasCope1500系統(tǒng)

復旦大學博士研究生論文)中各層的形態(tài)學特征，，并進一步進行定性和定像結果按照水平面方向沿矢狀面對正常皮膚進方向在XY軸平面進行平切)，如圖ZA、B所示。面HE組織病理學圖片，通過細胞所在的層次，深CLSM圖像中相應各層的特征。
【學位授予單位】：復旦大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2008
【分類號】：R751;R730.4

【引證文獻】

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1 呂岳華;光動力治療鮮紅斑痣前后激光共聚焦顯微鏡的觀察分析[D];復旦大學;2010年

本文編號：2615985