光動力療法殺傷皮膚鱗狀細胞癌中的作用及機制的研究
本文關鍵詞:細胞外信號調(diào)節(jié)激酶在氨基酮戊酸—光動力療法殺傷皮膚鱗狀細胞癌中的作用及機制的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
《寧夏醫(yī)科大學》 2013年
細胞外信號調(diào)節(jié)激酶在氨基酮戊酸—光動力療法殺傷皮膚鱗狀細胞癌中的作用及機制的研究
張秀娟
【摘要】:目的探討細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(Extracellular-signal Regulated Protein KinaseERK)在δ-氨基酮戊酸光動力療法(5-Aminolevulinic Acid for PhotodynamicTherapy ALA-PDT)殺傷皮膚鱗狀細胞癌(Squamous Cell Carcinoma SCL-1)細胞中的作用及機制,為ALA-PDT治療皮膚鱗狀細胞癌提供新的實驗室依據(jù)。 方法將SCL-1細胞分為空白對照組(con組),紅光照射組,ALA組,ALA-PDT組,ERK阻斷劑組。用western-blot檢測各組細胞干預30min,60min,90min后ERK1/2蛋白產(chǎn)物及磷酸化ERK1/2蛋白產(chǎn)物的表達;用細胞免疫熒光化學法檢測各組細胞干預30min,60min,90min后磷酸化ERK1/2蛋白產(chǎn)物的表達;用MTT酶聯(lián)免疫法檢測各組細胞干預24h,48h,72h后的光密度值,計算細胞的存活率;用Annexin V-FITC/PI雙染流式細胞術檢測各組細胞干預后24h,48h,72h細胞的凋亡率;用電子顯微鏡技術觀察各組細胞干預后24h,48h,72h細胞超微結構的變化。 結果經(jīng)western-blot檢測,ERK1/2蛋白產(chǎn)物在各組細胞中表達差別無統(tǒng)計學意義,磷酸化ERK1/2在空白對照組、紅光照射組、ALA組細胞中的表達無明顯差別,在ALA-PDT組細胞中的表達明顯高于其余各組,在ERK阻斷劑組細胞中的表達明顯低于其余各組;細胞免疫熒光化學檢測的結果和western-blot一致;MTT檢測結果表明,,空白對照組、ALA組及紅光照射組之間相比細胞存活率無明顯差別,ALA-PDT組細胞的存活率與空白對照組、ALA組、紅光照射組之間相比明顯降低,ERK阻斷劑組細胞的存活率與空白對照組、ALA組、紅光照射組、ALA-PDT組之間相比更加降低;流式細胞儀檢測結果表明,空白對照組、ALA組及紅光照射組之間相比細胞凋亡率無明顯差別,ALA-PDT組細胞的凋亡率與空白對照組、ALA組、紅光照射組之間相比明顯升高,ERK阻斷劑組細胞的凋亡率與空白對照組、ALA組、紅光照射組、ALA-PDT組之間相比更加升高;電子顯微鏡檢測結果表明,空白對照組、ALA組及紅光照射組之間相比較細胞超微結構變化無差別,ALA-PDT組與其余各組相比細胞損傷明顯,ERK阻斷劑組與其它各組相比細胞損傷更明顯。 結論阻斷ERK通路可以降低SCL-1細胞內(nèi)p-ERK1/2的表達;增強ALA-PDT對SCL-1細胞的殺傷作用。
【關鍵詞】:
【學位授予單位】:寧夏醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:R739.5
【目錄】:
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本文編號:206421
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