發(fā)布時間：2018-05-14 23:11

  本文選題：細胞因子誘導的殺傷細胞 + 惡性黑色素瘤��； 參考：《蘇州大學》2012年碩士論文

【摘要】：目的體外培養(yǎng)獲得細胞因子誘導的殺傷細胞（CIK細胞），研究其表型與生物學活性，并探討分析自體CIK細胞聯(lián)合化療治療惡性黑色素瘤術(shù)后患者的臨床意義。 方法利用Ficoll分離液從外周血中分離單個核淋巴細胞，通過INF-γ、rhIL-2、rhIL-1α、anti-CD3McAb誘導培養(yǎng)，獲得大量CIK細胞。流式細胞分析法對CIK細胞進行動態(tài)表型分析；MTT法檢測不同階段CIK細胞的殺傷活性。對37例惡性黑色素瘤術(shù)后行六周期化療的患者進行回顧性分析研究，其中12例患者化療結(jié)束后接受CIK細胞回輸治療，25例單純化療，化療均采用CVD方案：順鉑20mg/m~2D1-5，長春堿1.6mg/m~2D1-5，氮烯咪胺800mg/m~2D1。對自體CIK細胞治療前后患者外周血T細胞亞群檢測結(jié)果進行隨訪觀察，并應(yīng)用log-rank檢驗對兩組中位生存期及中位無進展生存期進行比較。 結(jié)果①CIK細胞體外顯著擴增，培養(yǎng)第14天至21天期間形成高峰平臺，CIK細胞對K562及Raji細胞的細胞毒活性在14天時達峰值，分別為（76.65±16.78）%與（75.32±15.61）%。②CIK聯(lián)合化療組患者外周血NK、CIK（CD3~+CD56~+）、CD3~+與CD4~+細胞百分比以及CD4~+/CD8~+比值明顯升高，CD8~+細胞比例下降；而單純化療組上述指標沒有顯著變化。③CIK聯(lián)合化療組與單純化療組患者的中位總生存期分別為66個月（95%CI：47.04~85.09月）與45個月（95%CI：）a，差異無統(tǒng)計學意義(χ~2=1.710，P=0.191)；兩組中位無進展生存期分別為33個月（95%CI：18.830~48.570月）與17個月（95%CI：8.441~26.22月），差異有統(tǒng)計學意義(χ~2=6.768，P=0.009)。 結(jié)論培養(yǎng)至第14天CIK細胞增殖與殺傷活性均達到峰值，適合應(yīng)用于治療。采用自體CIK細胞治療惡性黑色素瘤術(shù)后患者可以促進化療后免疫功能的恢復，，延長無進展生存期。
[Abstract]:Objective to study the phenotype and biological activity of cytokine induced killer cells in vitro and to explore the clinical significance of autologous CIK cells combined with chemotherapy in the treatment of malignant melanoma. Methods Mononuclear lymphocytes were isolated from peripheral blood by Ficoll isolate, and a large number of CIK cells were obtained by induction and culture with INF- 緯 -rhIL-2rhIL-1 偽 anti-CD3 McAb. The dynamic phenotypic analysis of CIK cells by flow cytometry was used to detect the cytotoxicity of CIK cells at different stages. A retrospective study was conducted on 37 patients with malignant melanoma who received six cycles of chemotherapy after operation. Among them, 12 patients received CIK cell therapy after chemotherapy and 25 received chemotherapy alone. Chemotherapy was performed with CVD regimen: cisplatin 20 mg / mt2D1-5, vincristine 1.6 mg / mt2D1-5, azomidine 800 mg / mD1. The T cell subsets in peripheral blood of patients with autologous CIK cells before and after treatment were followed up, and the median survival time and median progression-free survival time were compared by log-rank test. Results 1CIK cells proliferated significantly in vitro, and the cytotoxic activity of 1CIK cells against K562 and Raji cells reached the peak at 14 days from day 14 to day 21. In the combination chemotherapy group of 76.65 鹵16.78% and 75.32 鹵15.61)%.2CIK respectively, the percentage of CD3- CD56 ~ + CD3- and CD4- cells and the ratio of CD4- / CD8- were significantly increased and the percentage of CD8- cells decreased. The median total survival time of patients in CIK combined chemotherapy group and simple chemotherapy group was 66 months, 95 CI: 47.04 ~ 85.09 months, respectively. There was no significant difference between the two groups (蠂 2 + 1.710 P 0.191) and 45 months respectively (蠂 2 + 1.710 P 0.191), the median survival time of the patients in the combination chemotherapy group and simple chemotherapy group was 66 months ~ 95 CI: 47.04 ~ 85.09 months respectively, and there was no significant difference between the two groups (蠂 ~ 2 + 1.710 P 0.191). There were significant differences between the retention period of 95% (18.830 ~ 48.570 months) and 95% (8.441 ~ 26.22 months) of 17 months (蠂 ~ (2 / 2) 6.768 / P ~ (0.009). Conclusion the proliferation and cytotoxicity of CIK cells reached the peak on the 14th day of culture, which is suitable for treatment. Using autologous CIK cells to treat malignant melanoma patients after operation can promote the recovery of immune function after chemotherapy and prolong the progression-free survival.
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R739.5

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本文編號：1889889