跨膜接頭蛋白PAG1過表達對皮膚鱗癌細胞A431運動能力的影響
本文關鍵詞:跨膜接頭蛋白PAG1過表達對皮膚鱗癌細胞A431運動能力的影響 出處:《腫瘤防治研究》2016年09期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的研究跨膜接頭蛋白PAG1過表達對人皮膚鱗狀細胞癌A431運動能力的影響。方法構建PAG1-EGFP融合蛋白的慢病毒表達載體,采用反轉錄病毒轉染的方法建立PAG1過表達的A431細胞株,實驗分為3組:親本細胞組(未進行基因轉染的A431細胞)、對照組(A431細胞轉染僅含EGFP陰性對照病毒)、實驗組(A431細胞轉染PAG1-EGFP病毒)。流式細胞術檢測細胞轉染率,實時熒光定量PCR及Western blot檢測轉染后PAG1 mRNA及其蛋白表達,進一步驗證細胞轉染成功與否;利用劃痕修復實驗、Transwell遷移實驗、侵襲實驗三種不同的方法檢測PAG1基因的過表達是否會對皮膚鱗癌細胞的生長、遷移和侵襲能力產(chǎn)生影響。結果實驗組和對照組目的基因病毒的轉染表達率分別為(94.97±0.15)%、(94.60±0.35)%;實驗組細胞中PAG1基因m RNA的表達量約為親本細胞組的1.6倍(P=0.000),轉染后實驗組中PAG1蛋白的相對表達水平明顯增加(P=0.000),建立了穩(wěn)定過表達PAG1的A431細胞系;PAG1過表達明顯降低A431細胞愈合率(P=0.000);實驗組A431細胞遷移、侵襲能力明顯降低(P=0.001,P=0.000)。結論 PAG1的過表達能抑制人皮膚鱗癌細胞運動能力,影響腫瘤的浸潤及遠處轉移。
[Abstract]:Objective To investigate the effect of overexpression of PAG1 overexpression on the expression of PAG1 - EGFP fusion protein in human skin squamous cell carcinoma A431 cells . Conclusion The overexpression of PAG1 can inhibit the movement of human skin squamous carcinoma cells and influence invasion and distant metastasis of tumor .
【作者單位】: 青島大學附屬醫(yī)院燒傷整形外科;青島大學醫(yī)學院免疫教研室;青島市市立醫(yī)院(集團)胸外科;
【分類號】:R739.5
【正文快照】: 0引言物:5’-GATGACCTTGCCCACAGCCT-3’,下游引皮膚鱗狀細胞癌(cutaneous squamous cell物:5’-ATCTCTGCCCCCTCTGCTGA-3’。反應條carcinoma,c SCC)起源于表皮角質形成細胞,是件:95℃10 min;95℃10 s、60℃20 s、72℃10 s,世界第二大最常見的非黑色素瘤皮膚癌[1]。腫瘤40個循
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