本文關(guān)鍵詞：STIM1在黑色素瘤增殖中的作用研究

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【摘要】：目的：Ca2+是細(xì)胞內(nèi)普遍存在的第二信使,參與多種細(xì)胞功能的調(diào)控。Ca2+穩(wěn)態(tài)失調(diào)與惡性腫瘤的增殖密切相關(guān)。STIM1,定位于ER膜,作為Ca2+感受器,觸發(fā)一系列級(jí)聯(lián)反應(yīng),引起SOCE激活。已有研究報(bào)道STIM1在多種腫瘤高表達(dá),但STIM1在腫瘤中的調(diào)控作用仍是有爭(zhēng)議的。本研究擬通過研究STIM1在黑色素瘤增殖中的作用研究,為進(jìn)一步闡明黑色素瘤發(fā)病機(jī)制提供理論依據(jù)。 方法： ●Westernblotting驗(yàn)證STIM1在黑色素瘤細(xì)胞系：A2058、G361細(xì)胞中STIM1的表達(dá)情況； ·利用慢病毒載體系統(tǒng)構(gòu)建STIM1-shRNA干擾載體,感染G361黑色素瘤細(xì)胞系,利用Westernblotting驗(yàn)證慢病毒感染后STIM1的阻斷效果； ·以G361細(xì)胞為研究對(duì)象,阻斷/不阻斷STIM1,采用MTS細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞計(jì)數(shù)、流式細(xì)胞周期分析研究STIM1與黑色素瘤細(xì)胞增殖的生物學(xué)行為的關(guān)系； ·利用免疫組化研究黑色素瘤組織和色素痣組織中STIM1的表達(dá)情況 結(jié)果： ●Westernblotting結(jié)果顯示：STIM1在人黑色素瘤細(xì)胞株A2058、G361中均有基礎(chǔ)表達(dá)； ●STIM1-shRNA慢病毒干擾載體感染G361細(xì)胞系后,westernblotting檢測(cè)結(jié)果顯示,G361細(xì)胞中STIM1表達(dá)明顯被抑制； ·阻斷G361細(xì)胞STIM1表達(dá)后,細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示細(xì)胞增殖能力減弱;流式細(xì)胞周期結(jié)果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞周期發(fā)生G0/G1期阻滯； ·與色素痣組織相比,人體黑色素瘤組織STIM1表達(dá)水平顯著增高(66.7%vs.20.0%,p0.05) 結(jié)論： ●STIM1與黑色素瘤細(xì)胞異常增殖密切相關(guān)： ●STIM1在黑色素瘤組織中異常高表達(dá),提示STIM1可能與黑色素瘤的發(fā)生相關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R739.5
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本文編號(hào)：1294532