本文關(guān)鍵詞：人參皂苷Rg1對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡的免疫調(diào)節(jié)作用的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：目的Rg1對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周血T淋巴細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用。方法收集處于非活動(dòng)期的系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者和性別和年齡匹配(±2歲)健康受試者各10名。從患者和健康受試者外周血分離CD3+T細(xì)胞,用伴刀豆球蛋白(Con A)體外刺激,并向培養(yǎng)基中加入Rg1。培養(yǎng)48小時(shí)后,細(xì)胞收集用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。T淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)采用CCK-8法。CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞和產(chǎn)生IFN-γ和IL-4的CD4+T細(xì)胞比例采用流式細(xì)胞儀測(cè)定。Th1/Th2相關(guān)細(xì)胞因子IFN-γ和IL-4基因表達(dá)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR測(cè)定。IFN-γ和IL-4細(xì)胞培養(yǎng)上清水平采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定。結(jié)果Rg1明顯抑制ConA誘導(dǎo)的健康受試者和系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者T淋巴細(xì)胞增殖,且抑制率健康受試者高于系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者;Rg1降低系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生IFN-γ的CD4+T細(xì)胞比例抑制IFN-γ產(chǎn)生和m RNA表達(dá);Rg1增加系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生IL-4的CD4+T細(xì)胞比例,增強(qiáng)IL-4產(chǎn)生和m RNA表達(dá),而對(duì)健康受試者T淋巴細(xì)胞影響不大。結(jié)論Rg1可能通過調(diào)節(jié)T細(xì)胞活化和Th1/Th2平衡來改善系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的免疫功能。
【關(guān)鍵詞】：人參皂苷Rg1 系統(tǒng)性紅斑狼瘡 T淋巴細(xì)胞 干擾素-γ 白介素-4
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R593.241
【目錄】：

• 摘要2-3
• Abstract3-6
• 引言6-7
• 第1章 實(shí)驗(yàn)材料和方法7-22
• 1.1. 實(shí)驗(yàn)材料7-12
• 1.1.1. 臨床資料和標(biāo)本收集7-8
• 1.1.2. 實(shí)驗(yàn)試劑8-9
• 1.1.3. 實(shí)驗(yàn)儀器9-10
• 1.1.4. PCR引物10-11
• 1.1.5. 實(shí)驗(yàn)耗材11
• 1.1.6. 主要試劑的配置方法11-12
• 1.2. 實(shí)驗(yàn)方法12-22
• 1.2.1. 人外周血CD3+T淋巴細(xì)胞的分離12-15
• 1.2.2. CCK-8 法檢測(cè)T淋巴細(xì)胞的增殖15-17
• 1.2.3. 熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)17-20
• 1.2.4. 流式檢測(cè)CD4+、CD8+細(xì)胞比例以及CD4+IFN-γ+和CD4+IL-4+細(xì)胞比例20-21
• 1.2.5. ELISA法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清中IFN-γ及IL-4 蛋白水平21
• 1.2.6. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法21-22
• 第2章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果22-32
• 2.1. 人外周血T淋巴細(xì)胞分選成功22
• 2.2. 培養(yǎng) 48h后T淋巴細(xì)胞光鏡下形態(tài)22-23
• 2.3. T淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-26
• 2.3.1. 不同濃度ConA對(duì)T淋巴細(xì)胞增殖的刺激作用23-24
• 2.3.2. ConA誘導(dǎo)的T淋巴細(xì)胞在不同細(xì)胞濃度時(shí)的增殖效果24-25
• 2.3.3. 不同濃度Rg1對(duì)ConA誘導(dǎo)的T淋巴細(xì)胞增殖效果的影響25
• 2.3.4. 人參皂苷Rg1對(duì)ConA誘導(dǎo)的人外周血T淋巴細(xì)胞的增殖作用的影響25-26
• 2.4. 人參皂苷Rg1對(duì)人外周血T淋巴細(xì)胞IFN-γ及IL-4mRNA水平的影響26-28
• 2.5. 人參皂苷Rg1對(duì)人外周血T淋巴細(xì)胞CD4+、CD8+細(xì)胞比例的影響28-29
• 2.6. 人參皂苷Rg1對(duì)人外周血T淋巴細(xì)胞CD4+IFN-γ+和CD4+IL-4+細(xì)胞比例的影響29-30
• 2.7. 人參皂苷 Rg1 對(duì)人外周血 T 淋巴細(xì)胞培養(yǎng)上清 IFN-γ及 IL-4 蛋白水平的影響30-32
• 第3章 討論32-36
• 結(jié)論36-37
• 參考文獻(xiàn)37-40
• 知情同意書40-41
• 綜述 人參皂苷免疫調(diào)節(jié)作用的研究進(jìn)展41-51
• 綜述參考文獻(xiàn)47-51
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果51-52
• 致謝52-53

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：709337