線粒體遺傳疾病細(xì)胞模型的構(gòu)建:永生淋巴細(xì)胞系和轉(zhuǎn)線粒體細(xì)胞系
發(fā)布時間:2017-08-20 00:05
本文關(guān)鍵詞:線粒體遺傳疾病細(xì)胞模型的構(gòu)建:永生淋巴細(xì)胞系和轉(zhuǎn)線粒體細(xì)胞系
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【摘要】:線粒體基因組突變會引發(fā)多種線粒體遺傳疾病。永生淋巴細(xì)胞系和轉(zhuǎn)線粒體細(xì)胞系是線粒體遺傳疾病研究的重要工具之一。永生淋巴細(xì)胞系使特殊遺傳信息在細(xì)胞水平得以永久保存。轉(zhuǎn)線粒體細(xì)胞系技術(shù)的發(fā)展為線粒體遺傳疾病的分子機(jī)制研究提供了體外細(xì)胞平臺。早期轉(zhuǎn)線粒體細(xì)胞系的胞質(zhì)供體直接來源于未進(jìn)行永生化的患者各組織細(xì)胞或血小板。本文結(jié)合永生化手段,以線粒體4401AG為例,詳細(xì)介紹了從凍存全血構(gòu)建永生化淋巴細(xì)胞,然后再與ρ0 206一起構(gòu)建轉(zhuǎn)線粒體細(xì)胞系的原理、方法和技術(shù)路線,并將兩種細(xì)胞模型的構(gòu)建歸納為4個步驟:(1)永生淋巴細(xì)胞構(gòu)建;(2)轉(zhuǎn)化;(3)篩選;(4)鑒定。為真實反應(yīng)線粒體突變的功能,本文對構(gòu)建的永生淋巴系和轉(zhuǎn)線粒體細(xì)胞系的線粒體突變位點、拷貝數(shù)以及轉(zhuǎn)線粒體細(xì)胞系的細(xì)胞核型進(jìn)行了分析與鑒定,選取了各參數(shù)一致的細(xì)胞系用于貯存與分析,以減少實驗誤差對后續(xù)突變位點功能研究的影響。兩種細(xì)胞模型在細(xì)胞水平上為詮釋線粒體遺傳疾病的分子機(jī)制發(fā)揮了重要作用,但在具體應(yīng)用中需注意它們的局限性,尤其是組織特異性的線粒體疾病。
【作者單位】: 浙江大學(xué)遺傳學(xué)研究所浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)系;
【關(guān)鍵詞】: 線粒體遺傳疾病 永生淋巴細(xì)胞系 轉(zhuǎn)線粒體細(xì)胞系 轉(zhuǎn)化 融合
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(編號:31371270)資助~~
【分類號】:R596.1
【正文快照】:
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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【相似文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 周衛(wèi)東,賈建平;轉(zhuǎn)線粒體細(xì)胞系的構(gòu)建及其在老年性癡呆研究中的應(yīng)用[J];中華老年醫(yī)學(xué)雜志;2003年07期
,本文編號:703612
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