[目的]系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)的發(fā)病機制至今未完全清楚,但是T淋巴細胞功能失調在SLE的發(fā)病中具有重要的作用;另外,一些研究發(fā)現(xiàn)microRNA-181a(miR-181a)的異常表達與SLE發(fā)生、發(fā)展密切相關。近年來的科研及臨床實驗提示間充質干細胞(MSCs)對SLE患者具有一定的治療作用,然而其機制并不太清楚。本課題將明確miR-181a的靶基因,并研究MSCs對SLE患者外周血T淋巴細胞中miR-181a和SLE相關炎癥因子表達的影響,探討SLE的發(fā)病機制及MSCs治療SLE的作用機理。[方法]一、雙熒光素酶報告基因載體分析microRNA-181a的靶位點。首先使用生物信息學軟件預測microRNA-181a(miR-181a)的靶位點,選出最可能的下游靶基因進行下一步驗證試驗;然后構建靶基因質粒并將其轉染于接種培養(yǎng)的HEK293T細胞;最后收集細胞樣品檢測螢火蟲熒光素酶活性。二、microRNA-181a對T淋巴細胞的影響及機制。分別構建miR-181a及其靶基因OPN(SPP1)過表達、干擾表達的慢病毒載體以及相應的慢病毒對照載體,轉導Jurkat細胞后獲得穩(wěn)轉細胞株;收...

【文章頁數(shù)】：120 頁

【學位級別】：博士

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英文摘要
前言
第一部分 雙熒光素酶報告基因載體分析microRNA-181a的靶位點
    引言
    材料與方法
    結果
    討論
第二部分 microRNA-181a對T淋巴細胞的影響及機制
    引言
    材料與方法
    結果
    討論
第三部分 間充質干細胞對系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者T淋巴細胞中microRNA-181a的影響及機制
    引言
    材料與方法
    結果
    討論
結論
局限性
展望
參考文獻
綜述 間充質干細胞治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡的研究進展
    參考文獻
攻讀學位期間獲得的學術成果
致謝



本文編號：3839192