目的:本研究旨在體外驗證過表達和沉默表達Caveolin-1對2型糖尿病小鼠內(nèi)皮祖細胞(Endothelial progenitor cells,EPCs)功能、PI3K和AKT表達水平的影響。闡明Caveolin-1是否參與EPCs功能的調(diào)節(jié),PI3K/AKT信號通路是否與Caveolin-1對EPCs功能的調(diào)節(jié)有關(guān)。方法:(1)EPCs原代培養(yǎng)及鑒定:體外分離培養(yǎng)8周齡雄性2型糖尿病db/db小鼠骨髓EPCs,采用密度梯度離心法獲取單核細胞,再將單核細胞接種于纖維連接蛋白包被的培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)傳代;通過免疫熒光鑒定EPCs。(2)轉(zhuǎn)染EPCs及檢測轉(zhuǎn)染效果:分別采用過表達慢病毒空白載體、過表達慢病毒載體、沉默表達慢病毒空白載體和沉默表達慢病毒載體轉(zhuǎn)染EPCs。故本研究分為過表達空白載體組、過表達組、沉默表達空白載體組、沉默表達組和未轉(zhuǎn)染的對照組。通過慢病毒感染效率探索各組慢病毒轉(zhuǎn)染的最佳MOI值,確定轉(zhuǎn)染時加入EPCs的病毒量。通過實時熒光定量PCR法(qPCR)分別檢測各組慢病毒載體(包含3個沉默表達慢病毒載體和一個過表達慢病毒載體)轉(zhuǎn)染EPCs后Caveolin-1的mRNA表...

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【學位級別】：碩士

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個人簡歷
摘要
abstract
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
創(chuàng)新性與不足
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝
攻讀碩士學位期間發(fā)表論文及獲獎情況



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