發(fā)布時間：2022-04-23 15:28

　　背景:類風濕性關節(jié)炎（Rheumatoid arthritis,RA）困擾著0.5-1%的世界人口,是影響最為廣泛的自身免疫性疾病之一。RA以關節(jié)腫脹、紅斑、疼痛、以及軟骨和骨結構的破壞及損失為特征。關節(jié)軟骨蛋白,如膠原蛋白等,被認為是潛在的RA自身抗原。Ⅺ型膠原（Collagen Ⅹ,CXI）是軟骨中含量較少的蛋白,由三條不同的α鏈組成[α1（XI）,α2（XI）,α3（Ⅺ）],是具有三螺旋結構的異三聚體。其中α3（Ⅺ）鏈與Ⅱ型膠原（CollagenⅡ,CII）的α（Ⅱ）鏈由同一個基因編碼,兩者具有相同的氨基酸序列,但α3（XI）鏈具有更復雜的糖基化修飾。與CXI結構類似的CII是軟骨中的主要成分,是由三條相同的α鏈形成三螺旋結構[α1（Ⅱ）]。在正常情況下,CXI、CII和Ⅸ型膠原（Collagen Ⅸ,CIX）共同組成細膠原纖維,且CXI是隱藏在細膠原纖維內(nèi)部的。我們已知CII具有一個重要的T細胞表位,而CXI含有一條與CII相同的0α鏈,由此我們可以推測CXI也同樣存在該T細胞表位,由于抗體一般傾向于識別具有某種空間構象的表位,CXI是否與CII具有相同的B細胞表位不得而知。方... 

【文章頁數(shù)】：100 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1.1 免疫與自身免疫性疾病
    1.2 類風濕性關節(jié)炎(Rheumatoid arthritis,RA)
    1.3 RA研究中常用的動物模型
    1.4 研究課題背景
第二章 實驗材料
    2.1 主要實驗儀器和耗材
    2.2 主要試劑
第三章 實驗方法及步驟
    3.1 實驗動物
    3.2 膠原的純化
    3.3 肽段的設計和合成
    3.4 T細胞回憶實驗
    3.5 生產(chǎn)CⅪ特異性單克隆抗體
    3.6 抗體純化與檢測
    3.7 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)
    3.8 Western Blot
    3.9 磁珠介導的多重免疫分析(Luminex)
    3.10 患者隊列
    3.11 關節(jié)炎的誘導(膠原誘導的關節(jié)炎、姥鮫烷誘導的關節(jié)炎和膠原抗體誘導的關節(jié)炎)
    3.12 免疫組織化學分析
    3.13 統(tǒng)計分析
第四章 實驗結果
    4.1 小鼠關節(jié)炎模型的血清CⅡ和CⅪ抗體反應
    4.2 CⅪ含有與CⅡ一致的T細胞糖基化表位(第264位氨基酸糖基化)
    4.3 生產(chǎn)和鑒定抗-CⅪ單克隆抗體
    4.4 D3特異性抗體L10D9能夠結合軟骨,而CⅪ特異性抗體不能與軟骨結合,或只顯示微弱的結合反應
    4.5 L10D9能誘導和加重小鼠急性關節(jié)炎癥,而CⅪ特異性抗體則不具備該能力
    4.6 RA患者和關節(jié)炎動物模型的血清D3表位抗體反應
第五章 討論
參考文獻
英文縮略詞表
博士期間取得的成果
致謝



本文編號：3647461