目的本研究主要從細(xì)胞水平探討整合素αvβ5在高糖/oxLDL狀態(tài)下誘導(dǎo)HLSECs功能障礙的分子機(jī)制及相關(guān)信號(hào)途徑。方法體外培養(yǎng)HLSECs并用葡萄糖（25mM,24h）/ox-LDL（100μg/ml,24h）處理,分別使用αvβ5抑制劑RGDfv,FAK抑制劑DF228,ERK抑制劑PD98059進(jìn)行干預(yù)。MTT比色法用于檢測HLSECs活力并確定實(shí)驗(yàn)分組;采用RT-PCR,Western blotting和免疫熒光技術(shù)檢測整合素αvβ5,FAK,ERK,VN的表達(dá)水平;掃描電子顯微鏡檢測葡萄糖/ox-LDL對(duì)HLSECs的影響。采用SPSS21.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果1.葡萄糖或oxLDL作用下,整合素αv,整合素β5,FAK,ERK,VN的表達(dá)均以時(shí)間及濃度依賴方式增加,且在葡萄糖濃度25mM,24h,oxLDL濃度100μg/ml,24h時(shí)升高最明顯,此時(shí)的細(xì)胞活力最強(qiáng)。兩者同時(shí)作用時(shí)升高更為顯著（P<0.05）。2.使用整合素αvβ5抑制劑RGDfv對(duì)各組細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)時(shí),ERK,FAK及VN的表達(dá)下調(diào)。使用FAK抑制劑DF228干預(yù)HLSECs,ERK及... 

【文章來源】：甘肅中醫(yī)藥大學(xué)甘肅省

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

圖 2 倒置相差顯微鏡下正常 HLSECs 的形態(tài)Fig. 2. The shape of HLSECs (×200)2.2 CD31 相關(guān)抗原鑒定肝竇內(nèi)皮細(xì)胞免疫熒光方法檢測結(jié)果鏡下顯示，CD31（綠色）均勻地分布于 HLSECs 的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜中（圖 3A），而在陰性對(duì)照組未見綠色熒光熒光分布（圖 3B）。

高糖/oxLDL 狀態(tài)下整合素 αvβ5 通過 FAK/ERK 信號(hào)途徑誘導(dǎo)肝竇毛細(xì)血管化第 2 章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果內(nèi)皮細(xì)胞的形態(tài)肝竇內(nèi)皮細(xì)胞在倒置相差顯微鏡下觀察顯示：細(xì)胞形態(tài)扁平、細(xì)胞核突起位于中央，細(xì)胞間緊密靠攏，呈“鵝卵石”樣結(jié)構(gòu)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]舌鱗癌細(xì)胞Tca8113中蛋白激酶C和絲裂原活化蛋白激酶激酶/細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶通路對(duì)誘導(dǎo)型一氧化氮合酶表達(dá)的影響[J]. 高雪峰,焦海斌,葉昌成,劉英群.  華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2018(02)
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