目的:通過SD（Sprague Dawley,SD）大鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn),探索葛根素聯(lián)合脂肪干細(xì)胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）支架修復(fù)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松（postmenopausal osteoporosis,PMOP）大鼠脛骨缺損的能力。方法:（1）將36只3月齡雌性SD大鼠,采用雙側(cè)卵巢切除法進(jìn)行絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松大鼠造模,造模成功3個月后,均實(shí)施雙側(cè)脛骨近端骨缺損造模,之后按干預(yù)措施不同隨機(jī)分為3組:A組右側(cè)脛骨缺損處植入載ADSCs羥基磷灰石支架,左側(cè)脛骨缺損處未行特殊處理作為對照,腹腔注射葛根素注射液,2g/d;B組右側(cè)脛骨缺損處植入載ADSCs羥基磷灰石支架,左側(cè)未處理作為對照,腹腔注射生理鹽水;C組右側(cè)骨缺損處植入普通羥基磷灰石支架,左側(cè)未處理作為對照,腹腔注射生理鹽水。3組分別于骨缺損術(shù)后第2、4、8、12周行體重測量、體脂率檢測、骨密度掃描及處死后進(jìn)行大體觀察、左右兩側(cè)脛骨缺損處病理切片觀察。（2）計算機(jī)檢索MEDLINE、Web of Science、EBSCO、The Cochrane Library等數(shù)據(jù)庫,篩選葛根素治療骨質(zhì)疏松癥的相關(guān)... 

【文章來源】：廣西中醫(yī)藥大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

葛根素化學(xué)結(jié)構(gòu)式

8范圍區(qū)域進(jìn)行備皮，備皮完成后于固定板上俯臥位固定，再次用碘伏消毒液消毒背部備皮區(qū)域皮膚，取備皮區(qū)域原點(diǎn)處，作一長約0.5-1.0cm切口，逐層切開皮膚、肌肉，可見乳白色脂肪團(tuán)，鈍性分離，找到粉紅色或黃紅色卵巢，絲線結(jié)扎輸卵管根部，小型電刀切除卵巢，觀察無活動性出血后，將輸卵管輕柔還納至原位，逐層縫合肌肉、皮膚，碘伏消毒，術(shù)后3天肌肉注射青霉素8萬U（0.1ml）。術(shù)后復(fù)蘇期間以取暖器加熱保暖，待大鼠蘇醒且可自由取食、活動后放回籠中常規(guī)飼養(yǎng)。圖2去卵巢大鼠模型制備（2）ADSCs提取取造模后3個月的SD大鼠，采取左側(cè)腹股溝切口入路提取脂肪，所有手術(shù)均由同一組實(shí)驗(yàn)人員完成。術(shù)前使用動物備皮刀對左側(cè)腹股溝區(qū)域進(jìn)行備皮，碘伏消毒液消毒腹部左下部注射點(diǎn)周圍皮膚3遍，左手抓持大鼠背部皮膚，翻轉(zhuǎn)使大鼠腹部朝上，保持頭低臀高位使腹腔臟器前移，避免注射器進(jìn)針時損傷臟器，由腹腔左下區(qū)域，傾斜45°，“Z”形進(jìn)針，邊進(jìn)針邊回抽，觀察無血液回流后，10%的水合氯醛(0.3ml/100g體重)腹

122.2.1ADSCs形態(tài)觀察原代細(xì)胞接種24h后可見大部分細(xì)胞開始貼壁，為多角形的單層細(xì)胞，部分細(xì)胞呈長梭形，類似成纖維細(xì)胞，細(xì)胞核居中，細(xì)胞成簇分布（圖3）。圖3ADSCs形態(tài)觀察（40×）2.2.2ADSCs免疫表型根據(jù)我們課題組前期的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，該方法所提取的細(xì)胞，流式細(xì)胞術(shù)鑒定發(fā)現(xiàn)，其表面抗原CD29、CD90、CD44表達(dá)陽性,CD45，CD11b表達(dá)陰性，符合ADSCs的表面抗原特征[22]。2.2.3ADSCs成骨誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)茜素紅S屬一種蒽醌類衍生物，是茜素磺酸鈉鹽，它能與碳酸鈣或磷酸鈣中的鈣鹽螯合形成橙紅色復(fù)合物，其對少量的沉積物及可得到可靠的結(jié)果。ADSCs成骨誘導(dǎo)14d后出現(xiàn)聚集趨勢，圍繞著成骨結(jié)節(jié)生長，成骨結(jié)節(jié)被茜素紅S染成紅色，而加入完全培養(yǎng)基的對照組仍為梭形、多角形的ADSCs，未見明顯紅色結(jié)節(jié)（圖4）。2.2結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3511801