miRNAs是一種非編碼的小RNA,通過靶向mRNA的3′UTR調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄后翻譯。為明確miR-324-5p對(duì)棕櫚酸誘導(dǎo)的3T3-L1脂肪細(xì)胞凋亡的作用和機(jī)制,體外培養(yǎng)3T3-L1脂肪細(xì)胞,利用棕櫚酸誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的同時(shí)過表達(dá)或抑制miR-324-5p,通過Annexin-V/FITC染色、RT-qPCR等方法檢測(cè)miR-324-5p對(duì)3T3-L1脂肪細(xì)胞凋亡的作用。通過在線軟件預(yù)測(cè)miR-324-5p的靶基因并進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果顯示,過表達(dá)miR-324-5p能夠顯著抑制凋亡相關(guān)基因BCL-2相關(guān)X蛋白（BCL2-associated X protein, Bax）和胱天蛋白酶3（caspase3）的表達(dá)水平（P<0.05）;而抑制miR-324-5p后能夠顯著促進(jìn)這些基因的表達(dá)（P<0.05）;靶基因預(yù)測(cè)及驗(yàn)證結(jié)果表明,miR-324-5p能夠顯著降低淀粉樣前體蛋白（amyloid precursor protein, APP）的表達(dá)水平（P<0.05）。本研究認(rèn)為,miR-324-5p可能通過靶定APP抑制棕櫚酸誘導(dǎo)的3T3-L1脂肪細(xì)胞凋亡。 

【文章來源】：中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 2020,36(08)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    1.4 細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡
    1.5 細(xì)胞凋亡檢測(cè)
    1.6 RNA提取和實(shí)時(shí)熒光定量 PCR(RT-qPCR)
    1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 構(gòu)建3T3-L1前體脂肪細(xì)胞凋亡模型
    2.2 1 000 nmol/L棕櫚酸能夠成功誘導(dǎo)3T3-L1脂肪細(xì)胞凋亡
    2.3 MiR-324-5p在棕櫚酸誘導(dǎo)的凋亡中表達(dá)量持續(xù)降低
    2.4 過表達(dá)miR-324-5p能夠顯著降低凋亡標(biāo)志基因的表達(dá)
    2.5 干擾miR-324-5p能夠顯著性升高凋亡標(biāo)志基因表達(dá)
    2.6 MiR-324-5p能夠靶向APP 3′UTR
    2.7 過表達(dá)miR-324-5p能夠顯著性降低APP表達(dá)
    2.8 干擾miR-324-5p能夠顯著增加APP表達(dá)
3 討論



本文編號(hào)：3475100