背景:機(jī)體骨量的平衡由骨吸收和骨形成所維持,破骨細(xì)胞是體內(nèi)唯一具有骨吸收功能的細(xì)胞,其數(shù)量和活性增加將導(dǎo)致骨質(zhì)疏松癥發(fā)生。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)顯示骨質(zhì)疏松使得老年人發(fā)生髓部骨折的機(jī)會(huì)增加50%,這給社會(huì)和家庭都帶來(lái)了沉重的負(fù)擔(dān)。目前對(duì)于骨質(zhì)疏松主要以雌激素替代及藥物治療為主,但是副作用明顯,甚至增加腫瘤發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn),因此尋求新的治療方式對(duì)臨床意義重大。破骨細(xì)胞分化受多條信號(hào)通路調(diào)控,經(jīng)典的RANK/RANKL（Receptor Activator for Nuclear Factor-κB Ligand）信號(hào)通路是對(duì)破骨細(xì)胞分化最為重要。低頻脈沖電磁場(chǎng)（pulsed electromagnetic felds,PEMF）作為新的治療手段已經(jīng)應(yīng)用于骨質(zhì)疏松癥的局部治療,取得了令人滿意的臨床效果。許多基礎(chǔ)也研究證實(shí)PEMF能夠影響破骨細(xì)胞分化,但是具體的機(jī)制未完全闡明。細(xì)胞內(nèi)活性氧（ROS）是細(xì)胞線粒體電子鏈傳遞過(guò)程中相關(guān)酶促反應(yīng)的副產(chǎn)物。近年來(lái)的研究顯示,細(xì)胞內(nèi)ROS的變化與破骨細(xì)胞分化成熟密切相關(guān)。有一些文獻(xiàn)報(bào)道PEMF可降低其他細(xì)胞內(nèi)ROS水平,因此我們猜想PEMF可能通過(guò)調(diào)控細(xì)胞內(nèi)ROS水平抑制... 

【文章來(lái)源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２?ＰＥＭＦ抑制ＲＡＮＫＬ誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞分化Ａ：?ＴＲＡＰ誘導(dǎo)４天之后，各組細(xì)胞經(jīng)過(guò)??ＴＲＡＰ染色后光鏡下（ｌ〇ｘ）所見(jiàn)圖像，ＲＡＮＫＬ可以促進(jìn)多核且不規(guī)則紫紅色多核破骨細(xì)??

測(cè)目標(biāo)ＲＮＡ表達(dá)水平，試驗(yàn)的結(jié)果表明：與??Ｃｏｎｔｒｏｌ組相比的話，ＲＡＷ２６４．７細(xì)胞經(jīng)過(guò)ＲＡＮＫＬ誘導(dǎo)處理后，ＲＡＮＫＬ組三??個(gè)標(biāo)志基因（ＣＴＳＫ、ＮＦＡＴｃｌ、ＴＲＡＰ）的表達(dá)水平明顯升高，在第２天和第４??天時(shí)，試驗(yàn)結(jié)果呈現(xiàn)相同趨勢(shì)。另一方面，ＲＡＷ２６４．７細(xì)胞經(jīng)過(guò)ＰＥＭＦ刺激??后，三個(gè)標(biāo)志基因的表達(dá)水平明顯下降。Ｓ卩：與ＲＡＮＫＬ組相比較，??ＲＡＮＫＬ＋ＰＥＭＦ組三個(gè)基因表達(dá)水平明顯下降，第４天的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與第２天相??同，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，Ｐ＜〇．〇５?（如圖２－１所示）。??Ａ?Ｂ??｜?５〇０１?ｍ?■?Ｃｏｎｔｒｏｌ?｜?５１?■?■?Ｃｏｎｔｒｏｌ??Ｚ?４００－?Ｔ?＊?？?ＲＡＮＫＬ?？?４－?＾?Ｈ?ＲＡＮＫＬ??？＝?＾?？?ＲＡＮＫＬ＋ＰＥＭＦ?１?■?＊＊?？?ＲＡＮＫＬ＋ＰＥＭＦ??ｆｉ?３０°－?ｍ?＿?■?＿?ＰＥＭＦ?＾?３－?｜?Ｊ．?ｍ?ＰＥＭＦ??ｈｉ?＿＿?ＩＩ?ｉｌｌｉ??＾?Ｚ?＾??ｃ??ｌ?＾?ｍ?Ｃｏｎｔｒｏｌ??ｔ?８００－?Ｗ?＊?＿?ＲＡＮＫＬ??？｜?ｉ?？?ＲＡＮＫＬ＋ＰＥＭＦ??￡?６００＇?ｍ?＾?圍■?＿?ＰＥＭｆ??卜＿?｜｜｜?ＩＩ??？Ｖ?ｂ＞??圖２－１?ＰＥＭＦ抑制ＲＡＮＫＬ誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞分化相關(guān)基因表達(dá)ＲＡＮＫＬ處理細(xì)胞后三個(gè)基??２４??

?領(lǐng)士學(xué)位論文???Ｂ?２５０??｜?＃＃??｜?＿?２００－?＊??１?１?１５０－?－?＾??Ｎａｌｌ??ｃ／?，?／??°?＾??圖３－ｌ?ＰＥＭＦ抑制ＲＡＷ２６４．７細(xì)胞內(nèi)ＲＯＳ水平地升高?Ａ：在熒光顯微鏡下細(xì)胞內(nèi)活性氧??呈現(xiàn)綠色斑點(diǎn)狀。Ｂ：在５３０�。織l件下檢測(cè)各組ＤＣＦ的ＯＤ值，每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)３次，組間??差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。??Ｆｉｇ．?３－ｌ?ＰＥＭＦ?ｒｅｄｕｃｅｄ?ｔｈｅ?ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?ｉｎｄｕｃｅｄ?ＲＯＳ．?ＲＡＷ２６４．７?ｃｅｌｌｓ?ｗｅｒｅ?ｔｒｅａｔｅｄ??ｗｉｔｈ?Ｈ２Ｏ２?（ｌ?ｍＭ）?ｆｏｒ?３０?ｍｉｎ?ｉｎ?ｔｈｅ?ａｂｓｅｎｃｅ?ａｎｄ?ｐｒｅｓｅｎｃｅ?ｏｆ?ＰＥＭＦ．?（Ａ）?Ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ?ｏｆ??ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ?ＲＯＳ?ｉｎ?Ｈ２〇２－ｔｒｅａｔｅｄ?ｇｒｏｕｐｓ?ｗａｓ?ａｓｓｅｓｓｅｄ?ｂｙ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ?（ｓｃａｌｅ??ｂａｒ＝ｌ００?｜ｉｍ）?ａｎｄ?（Ｂ）?ＯＤ?ｖａｌｕｅｓ?ｏｆ?ＤＣＦ?ｉｎ?ｔｈｅｓｅ?ｇｒｏｕｐｓ?ｗｅｒｅ?ｍｅａｓｕｒｅｄ?ｕｓｉｎｇ?ａ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ??ｒｅａｄｅｒ?ａｔ?Ｘ＝５３０?ｎｍ．?＃＃Ｐ＜０．０ｌ?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｔｏ?ｔｈｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ；?＊Ｐ＜０．０５?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｔｏ?Ｈ２０２?ａｌｏｎｅ．??ＰＥＭＦ，?ｐｕｌｓｅｄ?ｅｌｅｃｔｒｏｍａｇｎｅｔｉｃ?ｆｉｅｌｄ；?Ｈ２０２，?ｈｙｄｒｏｇｅｎ?ｐｅｒｏｘｉｄｅ；?ＤＣＦ，?２，，７＇－ｄｉｃｈｌｏｒｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ；??ＯＤ


本文編號(hào)：3274735