目的1.探討E2F2對類風濕性關節(jié)炎滑膜炎癥的調(diào)控及其機制;2.探討E2F2對類風濕性關節(jié)炎滑膜成纖維細胞自噬的調(diào)控及其機制。方法1.設計并合成靶向E2F2和STAT1的small interfering RNA（siRNA）,轉(zhuǎn)染類風濕性關節(jié)炎滑膜成纖維細胞（RASFs）以沉默E2F2的表達,以轉(zhuǎn)染negative siRNA（NC）為陰性對照;構(gòu)建過表達E2F2,STAT1的重組腺病毒載體;RT-qPCR和Western Blot檢測E2F2和STAT1的表達。2.構(gòu)建E2F2基因編輯小鼠,傳代并鑒定獲取E2F2雙敲(E2F2^-/-)和野生型（WT）小鼠。取8周齡小鼠用II型膠原誘導成CIA模型;對小鼠關節(jié)腫脹程度進行評分;HE染色和番紅固綠染色檢測不同基因型小鼠的關節(jié)損壞情況;取13.5天E2F2基因編輯小鼠的胚胎,進行鑒定和體外原代培養(yǎng),獲取小鼠胚胎成纖維細胞（MEFs）;ELISA和RT-qPCR檢測LPS刺激下E2F2^-/-和WT小鼠血清中炎癥因子IL-1α,IL-1β和TNF-α的表達。3.采用RNA-seq,RT-qPCR和W... 

【文章來源】：濟南大學山東省

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

普通PCR進行小鼠基因型鑒定結(jié)果示意圖


本文編號：3271416