柚皮素防護(hù)2型糖尿病的作用及分子機(jī)制研究
發(fā)布時間:2021-04-10 02:04
研究目的:糖尿。―iabetes Mellitus,DM)是影響人類健康的一個重大疾病,DM患者中90%-95%是2型DM(T2DM)患者。T2DM的有效防治已是全球關(guān)注的熱點(diǎn),更是我國亟需解決的重大課題。近年來研究發(fā)現(xiàn),二氫黃酮類化合物柚皮素在體內(nèi)明顯降低T2DM大鼠空腹血糖及糖化血紅蛋白含量,對T2DM有防治作用,但柚皮素防治T2DM機(jī)制及具體分子靶點(diǎn)是什么?尚不清楚。柚皮素對T2DM胰島素抵抗是否有抑制作用?目前還有爭議,需進(jìn)一步研究證實(shí)。研究方法:分別對MIN6細(xì)胞、HepG2和3T3-L1細(xì)胞進(jìn)行以下處理:用高糖培養(yǎng)基培養(yǎng)MIN6細(xì)胞建立高糖損傷模型,用高糖/高胰島素培養(yǎng)基培養(yǎng)3T3-L1和HepG2細(xì)胞建立胰島素抵抗(IR)模型;分別轉(zhuǎn)染mi R-375和miR-29b mimic和inhibitor到MIN6高糖損傷模型細(xì)胞和HepG2/3T3-L1 IR模型細(xì)胞。用不同濃度柚皮素對三種細(xì)胞進(jìn)行分組干預(yù)。然后用MTT檢測細(xì)胞的增殖活力,用GOD檢測細(xì)胞對葡萄糖攝取的能力,用ELISA檢測胰島素釋放能力;用qRT-PCR和Western Blotting檢測胰島素信號傳導(dǎo)...
【文章來源】:電子科技大學(xué)四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
英文縮略語對照
第一章 緒論
1.1 研究工作的背景與意義
1.2 國內(nèi)外研究歷史與現(xiàn)狀
1.2.1 T2DM的發(fā)病機(jī)理和治療現(xiàn)狀
1.2.2 柚皮素在T2DM的防治領(lǐng)域研究進(jìn)展
1.2.3 微小RNA在T2DM的防治機(jī)制方面的研究進(jìn)展
1.3 本文的主要創(chuàng)新與貢獻(xiàn)
1.4 本論文的結(jié)構(gòu)安排
第二章 柚皮素對MIN6高糖模型細(xì)胞和3T3-L1/HEPG2胰島素抵抗模型細(xì)胞的防護(hù)作用
2.1 材料
2.2 方法
2.3 結(jié)果
2.3.1 柚皮素干預(yù)對MIN6高糖模型細(xì)胞增殖的影響
2.3.2 3T3-L1細(xì)胞和成熟脂肪細(xì)胞的形態(tài)及鑒定
2.3.3 柚皮素干預(yù)對3T3-L1胰島素抵抗模型細(xì)胞增殖的影響
2.3.4 柚皮素干預(yù)對3T3-L1胰島素抵抗模型細(xì)胞葡萄糖攝取和胰島素敏感性的影響
2.3.5 柚皮素干預(yù)對HepG2胰島素抵抗模型細(xì)胞增殖的影響
2.3.6 柚皮素干預(yù)對HepG2胰島素抵抗模型細(xì)胞葡萄糖攝取和胰島素敏感性的影響
2.4 討論
2.5 本章小結(jié)
第三章 柚皮素對MIRNA-375上調(diào)/下調(diào)后MIN6高糖模型細(xì)胞胰島素分泌的影響
3.1 材料
3.2 方法
3.3 結(jié)果
3.3.1 不同濃度柚皮素對高糖培養(yǎng)MIN6細(xì)胞胰島素釋放的影響
3.3.2 轉(zhuǎn)染MIN6細(xì)胞后miR-375表達(dá)的測定
3.3.3 miR-375上調(diào)/下調(diào)表達(dá)在柚皮素調(diào)節(jié)高糖培養(yǎng)MIN6細(xì)胞胰島素釋放的作用
3.4 討論
3.5 本章小結(jié)
第四章 柚皮素對胰島素抵抗3T3-L1/HEPG2細(xì)胞IRS-1/AKT/GLUT4基因或蛋白表達(dá)的影響
4.1 材料
4.2 方法
4.3 結(jié)果
4.3.1 柚皮素對胰島素抵抗3T3-L1模型細(xì)胞IRS-1/AKT/GLUT4基因表達(dá)的影響
4.3.2 柚皮素對胰島素抵抗3T3-L1模型細(xì)胞IRS-1/p-AKT蛋白表達(dá)的影響..
4.3.3 柚皮素對胰島素抵抗HepG2模型細(xì)胞IRS-1/AKT/GLUT4基因表達(dá)的影響
4.3.4 柚皮素對HepG2胰島素抵抗模型細(xì)胞IRS-1/p-AKT蛋白表達(dá)的影響..
4.4 討論
4.5 本章小結(jié)
第五章 柚皮素對3T3-L1/HEPG2細(xì)胞MIR-29B上調(diào)/下調(diào)后IRS-1/AKT/GLUT表達(dá)的影響
5.1 材料
5.2 方法
5.3 結(jié)果
5.3.1 對3T3-L1/HepG2細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-29b的鑒定
5.3.2 柚皮素對3T3-L1細(xì)胞miR-29b上調(diào)/下調(diào)后IRS-1/AKT/GLUT4基因表達(dá)的影響
5.3.3 柚皮素對3T3-L1細(xì)胞miR-29b上調(diào)/下調(diào)后IRS-1/p-AKT蛋白表達(dá)的影響
5.3.4 柚皮素對HepG2細(xì)胞miR-29b上調(diào)/下調(diào)后IRS-1/AKT/GLUT4基因表達(dá)的影響
5.3.5 柚皮素對HepG2細(xì)胞miR-29b上調(diào)/下調(diào)后IRS-1、p-AKT蛋白表達(dá)的影響
5.4 討論
5.5 本章小結(jié)
第六章 全文總結(jié)與展望
6.1 全文總結(jié)
6.2 后續(xù)工作展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間取得的成果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Fructose as a key player in the development of fatty liver disease[J]. Metin Basaranoglu,Gokcen Basaranoglu,Tevfik Sabuncu,Hakan Sentürk. World Journal of Gastroenterology. 2013(08)
本文編號:3128736
【文章來源】:電子科技大學(xué)四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:72 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
英文縮略語對照
第一章 緒論
1.1 研究工作的背景與意義
1.2 國內(nèi)外研究歷史與現(xiàn)狀
1.2.1 T2DM的發(fā)病機(jī)理和治療現(xiàn)狀
1.2.2 柚皮素在T2DM的防治領(lǐng)域研究進(jìn)展
1.2.3 微小RNA在T2DM的防治機(jī)制方面的研究進(jìn)展
1.3 本文的主要創(chuàng)新與貢獻(xiàn)
1.4 本論文的結(jié)構(gòu)安排
第二章 柚皮素對MIN6高糖模型細(xì)胞和3T3-L1/HEPG2胰島素抵抗模型細(xì)胞的防護(hù)作用
2.1 材料
2.2 方法
2.3 結(jié)果
2.3.1 柚皮素干預(yù)對MIN6高糖模型細(xì)胞增殖的影響
2.3.2 3T3-L1細(xì)胞和成熟脂肪細(xì)胞的形態(tài)及鑒定
2.3.3 柚皮素干預(yù)對3T3-L1胰島素抵抗模型細(xì)胞增殖的影響
2.3.4 柚皮素干預(yù)對3T3-L1胰島素抵抗模型細(xì)胞葡萄糖攝取和胰島素敏感性的影響
2.3.5 柚皮素干預(yù)對HepG2胰島素抵抗模型細(xì)胞增殖的影響
2.3.6 柚皮素干預(yù)對HepG2胰島素抵抗模型細(xì)胞葡萄糖攝取和胰島素敏感性的影響
2.4 討論
2.5 本章小結(jié)
第三章 柚皮素對MIRNA-375上調(diào)/下調(diào)后MIN6高糖模型細(xì)胞胰島素分泌的影響
3.1 材料
3.2 方法
3.3 結(jié)果
3.3.1 不同濃度柚皮素對高糖培養(yǎng)MIN6細(xì)胞胰島素釋放的影響
3.3.2 轉(zhuǎn)染MIN6細(xì)胞后miR-375表達(dá)的測定
3.3.3 miR-375上調(diào)/下調(diào)表達(dá)在柚皮素調(diào)節(jié)高糖培養(yǎng)MIN6細(xì)胞胰島素釋放的作用
3.4 討論
3.5 本章小結(jié)
第四章 柚皮素對胰島素抵抗3T3-L1/HEPG2細(xì)胞IRS-1/AKT/GLUT4基因或蛋白表達(dá)的影響
4.1 材料
4.2 方法
4.3 結(jié)果
4.3.1 柚皮素對胰島素抵抗3T3-L1模型細(xì)胞IRS-1/AKT/GLUT4基因表達(dá)的影響
4.3.2 柚皮素對胰島素抵抗3T3-L1模型細(xì)胞IRS-1/p-AKT蛋白表達(dá)的影響..
4.3.3 柚皮素對胰島素抵抗HepG2模型細(xì)胞IRS-1/AKT/GLUT4基因表達(dá)的影響
4.3.4 柚皮素對HepG2胰島素抵抗模型細(xì)胞IRS-1/p-AKT蛋白表達(dá)的影響..
4.4 討論
4.5 本章小結(jié)
第五章 柚皮素對3T3-L1/HEPG2細(xì)胞MIR-29B上調(diào)/下調(diào)后IRS-1/AKT/GLUT表達(dá)的影響
5.1 材料
5.2 方法
5.3 結(jié)果
5.3.1 對3T3-L1/HepG2細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-29b的鑒定
5.3.2 柚皮素對3T3-L1細(xì)胞miR-29b上調(diào)/下調(diào)后IRS-1/AKT/GLUT4基因表達(dá)的影響
5.3.3 柚皮素對3T3-L1細(xì)胞miR-29b上調(diào)/下調(diào)后IRS-1/p-AKT蛋白表達(dá)的影響
5.3.4 柚皮素對HepG2細(xì)胞miR-29b上調(diào)/下調(diào)后IRS-1/AKT/GLUT4基因表達(dá)的影響
5.3.5 柚皮素對HepG2細(xì)胞miR-29b上調(diào)/下調(diào)后IRS-1、p-AKT蛋白表達(dá)的影響
5.4 討論
5.5 本章小結(jié)
第六章 全文總結(jié)與展望
6.1 全文總結(jié)
6.2 后續(xù)工作展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間取得的成果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Fructose as a key player in the development of fatty liver disease[J]. Metin Basaranoglu,Gokcen Basaranoglu,Tevfik Sabuncu,Hakan Sentürk. World Journal of Gastroenterology. 2013(08)
本文編號:3128736
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