目的:在細(xì)胞水平上探索HIF-1α/BNIP3通路對(duì)類中性粒細(xì)胞自噬、凋亡的影響,為中性粒細(xì)胞性哮喘發(fā)病機(jī)制的研究提供理論依據(jù)。方法:1.類中性粒細(xì)胞誘導(dǎo)分化:培養(yǎng)人急性早幼粒白血病細(xì)胞（HL-60）,取對(duì)數(shù)生長期的HL-60細(xì)胞加入1.3%DMSO培養(yǎng)4天后,Diff染色檢測細(xì)胞形態(tài),流式細(xì)胞術(shù)檢測CD11b表達(dá)水平,確定類中性粒細(xì)胞是否誘導(dǎo)成功;2.構(gòu)建IL-8培養(yǎng)下的類中性粒細(xì)胞模型:HL-60細(xì)胞誘導(dǎo)分化為類中性粒細(xì)胞后加入0ng/ml、100ng/ml、200ng/ml、400ng/m L、800ng/ml濃度的IL-8培養(yǎng)24h,流式細(xì)胞術(shù)檢測類中性粒細(xì)胞的凋亡率,選擇凋亡率最低組的IL-8濃度與類中性粒細(xì)胞培養(yǎng)0h、6h、12h、24h、48h,檢測各組類中性粒細(xì)胞的凋亡率,選擇凋亡率最低的組進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn);3.驗(yàn)證HIF-1α調(diào)控BNIP3對(duì)類中性粒細(xì)胞自噬、凋亡的影響:分為6個(gè)組:1.空白組2.IL-8組3.IL-8+HIF-1α組4.IL-8+HIF-1α-vector組5.IL-8+HIF-1αsi RNA組6.IL-8+HIF-1αsi RNA-vector組,... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

HL-60和dHL-60細(xì)胞迪夫快速染色（×1000油鏡）

HL-60與dHL-60CD11b陽性率表達(dá)情況

圖 3.3 HIF-1α干擾組和空載組慢病毒轉(zhuǎn)染（×100）：V1、T1、V2、T2 分別代表 HIF-1α過表達(dá)空載組、HIF-1α過表達(dá)組、HIF-1α沉默空載組、HIF-1α默組

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]低氧對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞HIF-1α、BNIP3表達(dá)及自噬和侵襲能力的影響[J]. 閆廣偉,丁燕子,邢金芳,代延朋,杜紅梅,袁恩武.  鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2018(02)
[2]低氧對(duì)人支氣管上皮細(xì)胞氣道重塑相關(guān)因子表達(dá)的影響[J]. 鄧楠琳,朱芮,李敏超.  西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2018(02)
[3]miR-199a-5p抑制低氧條件下大鼠氣道平滑肌增殖和低氧誘導(dǎo)因子1α表達(dá)[J]. 章輝,朱述陽,張燦堂,劉文靜,朱潔晨.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2015(09)
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碩士論文
[1]HIF-1α與Th17/Treg失衡對(duì)煙霧暴露哮喘大鼠氣道炎癥的影響及西羅莫司治療作用的研究[D]. 劉巧維.中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院 2013
[2]α5-nAChR/HIF-1α/VEGF信號(hào)軸對(duì)人肺癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響[D]. 祖珊珊.山東大學(xué) 2013



本文編號(hào)：3100331