背景:成骨分化是一個(gè)復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò),包括多種信號(hào)通路轉(zhuǎn)錄水平和轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控,具體機(jī)制仍不清楚。研究關(guān)鍵miR NA對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的調(diào)控作用對(duì)于治療骨質(zhì)疏松和骨缺損具有重要意義。目的:探索mi R-21/Sprouty1功能軸調(diào)控絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨能力。方法:分離培養(yǎng)正常人和絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,比較2組細(xì)胞的成骨能力。Real time RT-PCR和Western Blot檢測(cè)2組細(xì)胞中miR-21和Spry1的表達(dá)。利用轉(zhuǎn)染的方法上調(diào)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的miR-21水平,檢測(cè)其成骨能力及Spry1的表達(dá)變化,Real time RT-PCR和Western Blot檢測(cè)成骨標(biāo)志性基因Runx2和Osterix的表達(dá)。結(jié)果與結(jié)論:（1）與正常人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞相比,絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨能力明顯減弱,而且miR-21表達(dá)下降,Spry1表達(dá)上升,mi R-21-Spry1功能軸受到抑制;（2）通過轉(zhuǎn)染mi R-21,下調(diào)Spry1,增加Runx2和Osterix的表達(dá),能夠部分恢復(fù)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者... 

【文章來源】：中國組織工程研究. 2017,21(21)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 設(shè)計(jì)
    1.2 時(shí)間及地點(diǎn)
    1.3 材料
    1.4 實(shí)驗(yàn)方法
        1.4.1 樣本的收集
        1.4.2 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)
        1.4.3 mi R-21和Spry1表達(dá)的檢測(cè)
        1.4.4 熒光素酶報(bào)告基因載體的構(gòu)建
        1.4.5 Sprouty1慢病毒載體的構(gòu)建
        1.4.6 mi R-21的轉(zhuǎn)染
        1.4.7 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨基因的表達(dá)
    1.5 主要觀察指標(biāo)
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果Results
    2.1 干細(xì)胞培養(yǎng)和鑒定結(jié)果
    2.2 絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨分化能力減弱
    2.3 mi R-21在絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)量下降
    2.4 Spry1在絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中表達(dá)明顯上升
    2.5 高表達(dá)mi R-21能夠恢復(fù)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞受損的成骨能力
3 討論Discussion



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