背景卵巢早衰（premature ovarian failure,POF）是指女性40歲前以閉經(jīng)、不育、雌激素缺乏及促性腺激素水平升高為特征的一種疾病[1]�；熓悄壳爸委煇盒阅[瘤的有效手段,但化療藥會對患者卵巢造成不同程度的損傷,甚至有部分患者發(fā)展成為POF[2]。環(huán)磷酰胺（Cyclophosphamide,CTX）,是化療常用的烷化劑,研究CTX造成的POF治療方案具有十分重要的意義。目前治療POF的方案均不能從根本上起到修復卵巢的作用,近些年間充質干細胞治療POF成為研究熱點,人臍帶間充質干細胞（Human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUMSCs）來至廢棄的臍帶,資源豐富獲取便捷,屬于免疫缺陷細胞,具有多向分化潛能成為干細胞治療POF的重點研究對象[3]。我們將hUMSCs從臍帶中分離出來,期望探究出一種可修復卵巢,從根本上解決POF的治療方案。目的（1）采用組織貼壁法分離hUMSCs,對其進行鑒定并觀察其生物學特性。（2）觀察hUMSCs成脂、成骨、成軟骨分化能力。（3）評價CTX造POF動物模型方案是否成功。（4）探究hUMS... 

【文章來源】：廣東藥科大學廣東省

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

P0代細胞形態(tài)（×100）

圖 1.1：P0 代細胞形態(tài)（×100） 圖 1.2：P1 代細胞形態(tài)（×100） 圖 1.3：P5 代細胞形態(tài)（×100）2.4.2 hUMSCs 表面抗原鑒定流式細胞儀檢測結果如圖 2 所示，CD73、CD90、CD105 表達陽性，CD19、CD34、CD45、CD11b 和 HLA-DR 表達陰性。其中 CD73 的表達率為 99.5%，CD90 表達率為 100%，CD105 表達率為 99.8%。間充質干細胞表達 CD29、CD44、CD90、CD73、CD105、HLA-ABC，不表達造血細胞標志物 CD34、CD45、CD117、HLA-DR。根據(jù)我們測出的細胞免疫表型結果表明，我們培養(yǎng)并進行傳代擴增的細胞表達與 MSCs 相類似的抗原表面標志物。（鑒定結果見圖 2）圖 2 流式細胞儀測細胞表面抗原

圖 1.1：P0 代細胞形態(tài)（×100） 圖 1.2：P1 代細胞形態(tài)（×100） 圖 1.3：P5 代細胞形態(tài)（×100）2.4.2 hUMSCs 表面抗原鑒定流式細胞儀檢測結果如圖 2 所示，CD73、CD90、CD105 表達陽性，CD19、CD34、CD45、CD11b 和 HLA-DR 表達陰性。其中 CD73 的表達率為 99.5%，CD90 表達率為 100%，CD105 表達率為 99.8%。間充質干細胞表達 CD29、CD44、CD90、CD73、CD105、HLA-ABC，不表達造血細胞標志物 CD34、CD45、CD117、HLA-DR。根據(jù)我們測出的細胞免疫表型結果表明，我們培養(yǎng)并進行傳代擴增的細胞表達與 MSCs 相類似的抗原表面標志物。（鑒定結果見圖 2）圖 2 流式細胞儀測細胞表面抗原

【參考文獻】：
期刊論文
[1]臍帶血血漿分離培養(yǎng)臍帶間充質干細胞及體外擴增人臍血CD34+細胞的研究[J]. 吳潔瑩,陸琰,陳勁松,吳韶清,湯雪薇,李焱.  中國實驗血液學雜志. 2015(04)
[2]卵巢早衰的治療現(xiàn)狀及進展[J]. 徐暉.  中國現(xiàn)代醫(yī)生. 2015(21)
[3]卵巢功能早衰動物模型建立方法的研究進展[J]. 向瀾,姚廣濤,李瑞霞,張杰,黃元澤.  中國藥學雜志. 2015(05)
[4]Mesenchymal stem cells: Emerging mechanisms of immunomodulation and therapy[J]. Justin D Glenn,Katharine A Whartenby.  World Journal of Stem Cells. 2014(05)
[5]Migration capacity of human umbilical cord mesenchymal stem cells towards glioma in vivo[J]. Cungang Fan,Dongliang Wang,Qingjun Zhang,Jingru Zhou.  Neural Regeneration Research. 2013(22)
[6]An update on primary ovarian insufficiency[J]. JIN Min,YU YiQi & HUANG HeFeng * Women’s Hospital,School of Medicine,Zhejiang University,Hangzhou 310006,China.  Science China（Life Sciences）. 2012(08)
[7]人臍帶間充質干細胞分離擴增方法的優(yōu)化[J]. 楊卿,楊揚,劉劍戎,潘國政,張英才,陳規(guī)劃,張琪.  中山大學學報(醫(yī)學科學版). 2011(06)
[8]卵巢早衰臨床治療及促排卵后妊娠率研究[J]. 馮慧嫻.  山西醫(yī)藥雜志(下半月刊). 2010(01)

博士論文
[1]人臍帶間充質干細胞治療卵巢早衰的初步實驗研究[D]. 俞凌.中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院 2012
[2]促性腺激素釋放激素拮抗劑（GnRHant）預防化療損傷性卵巢功能早衰的實驗研究[D]. 趙雪靜.第四軍醫(yī)大學 2011
[3]人臍帶間充質干細胞移植改善化療損傷卵巢功能的實驗研究[D]. 朱少芳.南方醫(yī)科大學 2011

碩士論文
[1]臍帶間充質干細胞移植治療卵巢早衰的實驗研究[D]. 呂曉丹.北京協(xié)和醫(yī)學院 2016
[2]臍帶基質干細胞在不同誘導條件下向生殖細胞分化的實驗研究[D]. 冷少華.第三軍醫(yī)大學 2009



本文編號：2986230