PDK1靶向AKT調(diào)控小鼠骨髓巨噬細胞向破骨細胞分化的機制研究
發(fā)布時間：2021-01-15 14:01
背景與目的:在我國骨質(zhì)疏松癥已成為一種在常見多發(fā)病,其嚴重影響中老年人,尤其是絕經(jīng)后婦女的身體健康。骨質(zhì)疏松引起的骨折等并發(fā)癥,不僅給患者本人造成極大的痛苦,也給家庭和社會帶來沉重的生活和經(jīng)濟負擔。骨代謝的穩(wěn)定需要破骨細胞介導的骨吸收和成骨細胞介導的骨形成有關,在健康個體中,二者維持功能平衡,而平衡一旦打破則可能導致包括骨質(zhì)疏松、骨關節(jié)炎、類風濕性關節(jié)炎等骨骼疾病的發(fā)生。破骨細胞是體內(nèi)唯一負責骨吸收的細胞,靶向抑制破骨細胞的活性已被公認為是逆轉(zhuǎn)骨溶解最有效、最直接的治療策略,目前已成為骨質(zhì)疏松領域的研究熱點。研究表明,破骨細胞異�；罨鸵种破乒羌毎钚运幬�,對骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生發(fā)展及治療起到至關重要的作用,然而現(xiàn)有治療骨質(zhì)疏松藥物存在諸多不足。因此,有必要進一步加強完善對破骨細胞分化過程中信號傳導通路的分子機制研究,研發(fā)新的靶向藥物來有效提高骨質(zhì)疏松癥的治療效果,這將具有非常重要的臨床診療價值、基礎研究價值和社會經(jīng)濟價值。在骨科領域,目前關于PDK1的研究尚淺,尚未得到重視和系統(tǒng)研究。因此,本研究將初步探索PDK1對RANKL和MCSF誘導的小鼠骨髓巨噬細胞向破骨細胞分化產(chǎn)生的影響,探索...
【文章來源】：廣西醫(yī)科大學廣西壯族自治區(qū)
【文章頁數(shù)】：77 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
TRAP染色鑒定破骨細胞Fig.1-1IdentificationofosteoclastbyTRAPstaining
鼠骨髓巨噬細胞向破骨細胞分化的機制研究 髓巨噬細胞向破骨細胞分化過程中PDK1 mRNA PDK1 在小鼠骨髓巨噬細胞向破骨細胞分化過CSF+RANKL 分別誘導小鼠骨髓巨噬細胞 0，2為對照組。在誘導分化的第 0、2、4、6 天分別提取e PCR 技術檢測小鼠骨髓巨噬細胞在向破骨細 的表達水平。結果發(fā)現(xiàn)，與誘導分化的第 0 天NA 的表達量逐漸增高，有統(tǒng)計學差異（P<0.05RNA 的表達量最高（圖 1-2）。
圖 1-3 Western blot 檢測對照組與實驗組 PDK1 和 AKT 蛋白的表達及磷酸化情況Fig.1-3 The expression of PDK1 andAKT protein in the control group and the experimental grouWestern blot3 討論破骨細胞來源于骨髄源造血干細胞，屬單核/巨噬細胞家族，為多高度分化的巨細胞，其重要標志為抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）及降受體（CTR），破骨細胞參與機體骨吸收并在骨代謝平衡中扮演重要作當其異常激活或過度活化會引起骨質(zhì)疏松、類風濕性關節(jié)炎等多種骨病[26-29]。骨髓基質(zhì)細胞和成骨細胞所分泌的 MCSF、RANKL 及 OPG胞因子參與調(diào)控破骨細胞的分化成熟，當敲除小鼠的 RANKL 基因后現(xiàn)出典型的骨質(zhì)疏松癥[30,31]。大量研究表明，RANKL 在破骨細胞分化
【參考文獻】：
期刊論文
[1]OPG/RANK/RANKL信號通路在骨質(zhì)疏松癥中的研究進展和應用[J]. 李子怡,李玉坤. 中華老年骨科與康復電子雜志. 2017(02)
[2]破骨細胞分化機制的研究進展[J]. 任莉榮,徐永清. 中國骨質(zhì)疏松雜志. 2015(12)
[3]中國大陸地區(qū)以-2.5SD為診斷的骨質(zhì)疏松癥發(fā)病率文獻回顧性研究[J]. 張智海,劉忠厚,石少輝,李艷寧. 中國骨質(zhì)疏松雜志. 2015(01)
[4]PDK1結構與功能研究進展[J]. 李欣. 攀枝花學院學報. 2014(02)
[5]RNA干擾技術與骨質(zhì)疏松癥[J]. 劉祿林,林華,徐又佳. 中華骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病雜志. 2014(01)
[6]重組核因子κB活化因子受體蛋白預防小鼠骨質(zhì)疏松的研究[J]. 張里程,呂厚辰,熊琦,張立海,唐佩福. 中國骨傷. 2013(05)
[7]OPG/RANKL/RANK系統(tǒng)與軟骨及軟骨下骨[J]. 封志云,賀振年,陳中. 國際骨科學雜志. 2013(02)
[8]RNA干擾抑制食管癌EC9706細胞中3-磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1基因的表達及其對腫瘤細胞惡性生物學行為的影響[J]. 于婧,陳奎生,李亞南,楊娟,趙路. 中華腫瘤雜志. 2011 (06)
[9]小分子干擾RNA基因沉默與骨肉瘤治療[J]. 范磊,邵增務. 國際骨科學雜志. 2011(01)
[10]小RNA干擾PDK1抑制乳腺腫瘤細胞侵襲[J]. 吳敏,吳靜,徐玥,董秋萍,王洪玉,郭立莎,張寧,牛瑞芳,應國光. 中國腫瘤臨床. 2009(12)
本文編號：2978996
【文章來源】：廣西醫(yī)科大學廣西壯族自治區(qū)
【文章頁數(shù)】：77 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
TRAP染色鑒定破骨細胞Fig.1-1IdentificationofosteoclastbyTRAPstaining
鼠骨髓巨噬細胞向破骨細胞分化的機制研究 髓巨噬細胞向破骨細胞分化過程中PDK1 mRNA PDK1 在小鼠骨髓巨噬細胞向破骨細胞分化過CSF+RANKL 分別誘導小鼠骨髓巨噬細胞 0，2為對照組。在誘導分化的第 0、2、4、6 天分別提取e PCR 技術檢測小鼠骨髓巨噬細胞在向破骨細 的表達水平。結果發(fā)現(xiàn)，與誘導分化的第 0 天NA 的表達量逐漸增高，有統(tǒng)計學差異（P<0.05RNA 的表達量最高（圖 1-2）。
圖 1-3 Western blot 檢測對照組與實驗組 PDK1 和 AKT 蛋白的表達及磷酸化情況Fig.1-3 The expression of PDK1 andAKT protein in the control group and the experimental grouWestern blot3 討論破骨細胞來源于骨髄源造血干細胞，屬單核/巨噬細胞家族，為多高度分化的巨細胞，其重要標志為抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）及降受體（CTR），破骨細胞參與機體骨吸收并在骨代謝平衡中扮演重要作當其異常激活或過度活化會引起骨質(zhì)疏松、類風濕性關節(jié)炎等多種骨病[26-29]。骨髓基質(zhì)細胞和成骨細胞所分泌的 MCSF、RANKL 及 OPG胞因子參與調(diào)控破骨細胞的分化成熟，當敲除小鼠的 RANKL 基因后現(xiàn)出典型的骨質(zhì)疏松癥[30,31]。大量研究表明，RANKL 在破骨細胞分化
【參考文獻】：
期刊論文
[1]OPG/RANK/RANKL信號通路在骨質(zhì)疏松癥中的研究進展和應用[J]. 李子怡,李玉坤. 中華老年骨科與康復電子雜志. 2017(02)
[2]破骨細胞分化機制的研究進展[J]. 任莉榮,徐永清. 中國骨質(zhì)疏松雜志. 2015(12)
[3]中國大陸地區(qū)以-2.5SD為診斷的骨質(zhì)疏松癥發(fā)病率文獻回顧性研究[J]. 張智海,劉忠厚,石少輝,李艷寧. 中國骨質(zhì)疏松雜志. 2015(01)
[4]PDK1結構與功能研究進展[J]. 李欣. 攀枝花學院學報. 2014(02)
[5]RNA干擾技術與骨質(zhì)疏松癥[J]. 劉祿林,林華,徐又佳. 中華骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病雜志. 2014(01)
[6]重組核因子κB活化因子受體蛋白預防小鼠骨質(zhì)疏松的研究[J]. 張里程,呂厚辰,熊琦,張立海,唐佩福. 中國骨傷. 2013(05)
[7]OPG/RANKL/RANK系統(tǒng)與軟骨及軟骨下骨[J]. 封志云,賀振年,陳中. 國際骨科學雜志. 2013(02)
[8]RNA干擾抑制食管癌EC9706細胞中3-磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1基因的表達及其對腫瘤細胞惡性生物學行為的影響[J]. 于婧,陳奎生,李亞南,楊娟,趙路. 中華腫瘤雜志. 2011 (06)
[9]小分子干擾RNA基因沉默與骨肉瘤治療[J]. 范磊,邵增務. 國際骨科學雜志. 2011(01)
[10]小RNA干擾PDK1抑制乳腺腫瘤細胞侵襲[J]. 吳敏,吳靜,徐玥,董秋萍,王洪玉,郭立莎,張寧,牛瑞芳,應國光. 中國腫瘤臨床. 2009(12)
本文編號：2978996
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