背景:糖尿病認(rèn)知功能障礙是糖尿病最常見(jiàn)的慢性并發(fā)癥之一。Aβ清除障礙是引發(fā)腦內(nèi)Aβ沉積和糖尿病認(rèn)知功能障礙的啟動(dòng)因素和關(guān)鍵環(huán)節(jié)。目的:研究mTORC1/SREBP-1/LRP1信號(hào)通路在糖尿病引起的腦Aβ外排清除障礙中的作用和機(jī)制。方法:我們培養(yǎng)人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)建血腦屏障的體外模型。將HBMECs暴露于不同葡萄糖濃度環(huán)境下檢測(cè)高糖對(duì)腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞Aβ40/42外排轉(zhuǎn)運(yùn)的影響。經(jīng)高糖處理后（25mM,50mM）,采用qRT-PCR、Western blot、免疫熒光染色等方法檢測(cè)參與調(diào)節(jié)Aβ外排轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程的相關(guān)蛋白表達(dá)水平。使用抑制劑betulin和rapamycin阻斷SREBP-1和mTORC1信號(hào),檢測(cè)其下游基因的表達(dá)以及SREBP-1和mTORC1對(duì)Aβ清除的影響。結(jié)果:高糖能夠損傷血腦屏障對(duì)Aβ的外排清除作用,使得HBMECs中LRP1表達(dá)下調(diào),SREBP-1表達(dá)升高。抑制SREBP-1的表達(dá)能有效阻斷高糖對(duì)LRP1表達(dá)的下調(diào)作用,并且改善高糖引起的血腦屏障Aβ外排清除受損。高糖促進(jìn)mTOR、S6K1和4EBP1磷酸化,誘導(dǎo)mTORC1活化,并且抑制mTORC1信號(hào)后能夠改... 

【文章來(lái)源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：71 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

高糖對(duì)HBMECs外排轉(zhuǎn)運(yùn)Aβ40/42的影響

33圖 2.高糖對(duì) Aβ轉(zhuǎn)運(yùn)受體 LRP1 表達(dá)水平的影響。圖 A.B.在高糖作用下(50mM)LRP1 表達(dá)量隨著時(shí)間變化的 Western blot 結(jié)果；圖C.D.高糖組(25mM,50mM)和對(duì)照組LRP1的Western blot結(jié)果;圖E.高糖組和對(duì)照組LRP1的qRT-PCR結(jié)果(n=6, *: 與對(duì)照組相比，P<0.05；#: 與葡萄糖濃度25mM組相比，P<0.05)。

35 3.高糖下 Aβ降解酶(IDE 和 NEP) 及 P-gp 的表達(dá)水平 A.不同葡萄糖濃度下(25mM，50mM) IDE，NEP 和 P-gp 的 Western blot 結(jié)果； B.不同葡萄糖濃度下 IDE 蛋白含量的灰度分析結(jié)果以及 mRNA 表達(dá)水平；圖.不同葡萄糖濃度 NEP 蛋白含量的灰度分析結(jié)果以及 mRNA 表達(dá)水平;圖 D.不葡萄糖濃度下 P-gp 蛋白含量的灰度分析結(jié)果以及 mRNA 表達(dá)水平(n=4; *: 與照組相比，P<0.05；#: 與葡萄糖濃度 25mM 組相比，P<0.05)。


本文編號(hào)：2966870