【摘要】：研究背景系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一種由自身免疫介導(dǎo)的,以免疫性炎癥為突出表現(xiàn),主要累及皮膚和關(guān)節(jié),伴有腎、心臟和神經(jīng)多系統(tǒng)損害的的彌漫性結(jié)締組織病。血清中出現(xiàn)以抗核抗體為代表的的多種自身抗體和多系統(tǒng)受累是SLE的兩個主要臨床特征。隨著抗瘧藥和免疫抑制劑治療SLE中應(yīng)用的增多,SLE的預(yù)后與過去相比已經(jīng)顯著改善。但在病程中發(fā)生的高疾病活動度仍然為SLE死亡率的獨(dú)立風(fēng)險因子。所以及時監(jiān)測病情活動的改變,在SLE系統(tǒng)治療中有重要意義。目前對于引起SLE發(fā)病的因素尚未明。各種免疫細(xì)胞的異�；顒庸餐瑓⑴c了SLE的免疫功能紊亂。隨著新近對Toll樣受體家族(TLRs)和干擾素(IFN)研究的深入,顯示固有免疫反應(yīng)及其產(chǎn)物是SLE的重要致病因素。單核細(xì)胞是一群來源于骨髓髓系干細(xì)胞的免疫細(xì)胞,在對病原體的非特異性防御、組織修復(fù)、腫瘤監(jiān)視等發(fā)揮重要作用。同時單核細(xì)胞也執(zhí)行重要的免疫調(diào)節(jié)功能,分泌多種細(xì)胞因子,在固有免疫反應(yīng)還是在適應(yīng)性免疫反應(yīng)中均起到重要作用。近年來,越來越多的證據(jù)支持不同的單核細(xì)胞亞群具有不同的功能。CD14~(++)CD16~-單核細(xì)胞亞群在功能實(shí)驗(yàn)證明其吞噬能力在單核細(xì)胞亞群中最強(qiáng),是一種重要的清除細(xì)胞,在血液系統(tǒng)固有免疫防御的第一線發(fā)揮重要作用。CD14~(++)CD16~+中間型單核細(xì)胞亞群具有更突出的抗原提呈能力,激活T細(xì)胞,誘導(dǎo)T細(xì)胞增殖,同時具有較高的活化炎癥反應(yīng)的潛能。CD14~+CD16~(++)非經(jīng)典型單核細(xì)胞亞群執(zhí)行“巡邏”功能,持續(xù)觀察血管系統(tǒng),選擇性吞噬死亡和病變的內(nèi)皮細(xì)胞,在一定程度上起到保護(hù)性作用。雖然越來越多的研究證實(shí)單核細(xì)胞亞群在眾多自身免疫性疾病如SLE、RA、AS以及SSc等中起著重要的作用,但對于SLE患者外周血中單核細(xì)胞亞群的分布情況仍存在爭論。同時對于各單核細(xì)胞亞群在SLE疾病發(fā)生過程中的作用仍未能達(dá)成共識。目的1.研究在SLE患者和健康人群外周血中單核細(xì)胞亞群的分布情況,揭示其在SLE發(fā)病中的作用。2.研究SLE患者外周血中單核細(xì)胞亞群分布情況與SLE臨床相關(guān)指標(biāo)的關(guān)聯(lián),以探索其與SLE活動是否關(guān)聯(lián)。方法收集74例SLE患者(根據(jù)SLEDAI評分分為病情緩解組n=33例和病情活動組n=41例)以及36例健康人(健康對照組)的新鮮外周抗凝血,提取PBMC后利用流式細(xì)胞術(shù)檢測其中單核細(xì)胞總?cè)杭捌鋪喨?CD14~(++)CD16~-經(jīng)典型單核細(xì)胞、CD14~(++)CD16~+中間型單核細(xì)胞和CD14~+CD16~(++)非經(jīng)典型單核細(xì)胞)的比例。結(jié)合SLE患者在廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院就診期間,在醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室檢查得出的檢驗(yàn)結(jié)果,包括ESR、CRP、C3、C4、ANA和抗ds-DNA抗體,進(jìn)行SLE患者外周血中單核細(xì)胞及其亞群與疾病臨床活動度相關(guān)性分析。結(jié)果SLE患者與健康人群相比,外周血中單核細(xì)胞總?cè)罕壤梢詿o差異,但在病情活動時,單核細(xì)胞總?cè)罕壤仙�。SLE患者與健康人群相比,外周血中CD14~(++)CD16~-經(jīng)典型單核細(xì)胞亞群比例明顯下降,CD14~+CD16~(++)非經(jīng)典型單核細(xì)胞亞群比例明顯上升,但兩者均與SLE的病情活動無關(guān)。外周血中CD14~(++)CD16~+中間型單核細(xì)胞亞群比例隨著SLE病情活動的加重而上升(病情活動組病情緩解組健康對照組)。同時SLE患者外周血中CD14~(++)CD16~+中間型單核細(xì)胞亞群比例與病情活動指標(biāo)(ESR、CRP、C3、C4、ANA、抗ds-DNA抗體等)全部呈有意義的正相關(guān)。結(jié)論1.SLE患者外周血中各單核細(xì)胞亞群的比例與健康人群相比有明顯的差異性,提示單核細(xì)胞亞群可能在該疾病的發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮著重要的作用。2.CD14~(++)CD16~+中間型單核細(xì)胞亞群比例可能成為一個有效評估SLE疾病活動的生物學(xué)指標(biāo)。
【學(xué)位授予單位】：廣州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R593.241
【圖文】：

將健康對照組和 SLE 患者血常規(guī)中單核細(xì)胞絕對值分別作出比較。經(jīng)分析后發(fā)現(xiàn)，健康對照組和 SLE 患者的血常例是不相同的（Kruskal-Wallis 檢驗(yàn)，p＜0.05）。再進(jìn)行組別間對照組 6.82（5.53,7.43）、病情緩解組 9.9（7.62,12.08）和（5.10,12.17）三者之間存在明顯差異。兩兩對比后，可以得出健患者兩者實(shí)驗(yàn)組均有顯著差異（p＜0.05），但病情緩解組與病差異（p=0.084）。同時，單核細(xì)胞絕對值在三組間也是不相同的檢驗(yàn)，p＜0.05）。再進(jìn)行組別間兩兩比較，健康對照組 0.42（緩解組 0.53（0.44,0.74）和病情活動組 0.55（0.30,0.88）三者之兩兩對比后，可以得出健康對照組與 SLE 患者兩者實(shí)驗(yàn)組均0.05），但病情緩解組與病情活動組無明顯差異（p=0.691）。健康人群相比，血常規(guī)中的單核細(xì)胞比例和單核細(xì)胞絕對值均情活動無關(guān)。

圖 2：三組實(shí)驗(yàn)組血常規(guī)中單核細(xì)胞絕對值比較：Control：健康對照組；S緩解組；SLE（activity）：病情活動組。二、健康對照組和 SLE 患者外周血中單核細(xì)胞總?cè)罕壤谋容^采用流式細(xì)胞術(shù)劃分健康對照組[Control]、病情緩解組[SL病情活動組[SLE(activity)]單核細(xì)胞總?cè)涸谕庵苎准?xì)胞中的比分析后發(fā)現(xiàn)，單核細(xì)胞總?cè)涸谕庵苎准?xì)胞中的比例在三（Kruskal-Wallis 檢驗(yàn)，p＜0.05）。再進(jìn)行組別間兩兩比較，健（11.65,17.58）；病情緩解組：15.9（12.65,20.45）；病情活動28.4），經(jīng)分析（Mann-Whitney U 檢驗(yàn)）得出，健康對照組與病差異（p=0.319），但兩組均與病情活動組有顯著差異（p＜0.0證明 SLE 患者與健康人群相比，外周血中單核細(xì)胞總?cè)罕壤刹∏榛顒訒r，單核細(xì)胞總?cè)罕壤仙?

圖 3-A 圖 3-B圖 3：流式細(xì)胞術(shù)檢測單核細(xì)胞亞群比例的設(shè)門策略 外周血PBMC 后，采用 APC-CD14，PE-CD16 熒光標(biāo)記染色，流式細(xì)胞術(shù)檢測單核細(xì)胞總后檢測 CD14++CD16-經(jīng)典型單核細(xì)胞、CD14++CD16+中間型單核細(xì)胞和 CD14+C胞的比例。圖 1-A：單核細(xì)胞門：單核細(xì)胞總?cè)�；圖 1-B classical subset：CD14++CDintermediate subset：CD14++CD16+中間型單核細(xì)胞門；non-classical subset：CD14細(xì)胞門。

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本文編號：2769799