【摘要】：目的:探討2型糖尿病大鼠模型的建模方法;討論2型糖尿病與腸道組織中鈉-葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白1(SGLT1)表達(dá)之間的關(guān)系;對比阿卡波糖(拜唐蘋)與格列美脲調(diào)節(jié)2型糖尿病大鼠的血糖水平,以及對大鼠空腸組織中SGLT1蛋白表達(dá)的影響;討論阿卡波糖與2型糖尿病模型大鼠空腸組織中SGLT1蛋白表達(dá)之間的關(guān)系。方法:將40只SPF級成年的雄性SD大鼠正常喂養(yǎng)一周后,采取隨機數(shù)法分成五組:正常對照組、正常對照+拜唐蘋干預(yù)組、2型糖尿病模型對照組、2型糖尿病模型+拜唐蘋干預(yù)組、2型糖尿病模型+格列美脲干預(yù)組,每組8只大鼠。2型糖尿病模型對照組及2型糖尿病模型藥物干預(yù)組的大鼠均進(jìn)行高糖飲水配合高脂乳劑連續(xù)灌胃4周,以誘導(dǎo)大鼠發(fā)生胰島素抵抗,正常組則給以正常飲水以及相等劑量的生理鹽水連續(xù)灌胃。隨后2型糖尿病模型對照組及2型糖尿病模型藥物干預(yù)組的大鼠均采取一次性腹部注入小劑量的鏈脲佐菌素(STZ),用于2型糖尿病大鼠模型的建立。三天后,測量大鼠的隨機血糖,數(shù)值超過16.7mmol/l,則判斷2型糖尿病大鼠成功建立。建模成功后,藥物干預(yù)組大鼠分別進(jìn)行拜唐蘋與格列美脲連續(xù)藥物灌胃干預(yù)4周;對照組則給以相等劑量的生理鹽水。隨時觀察大鼠的基本情況,定期測量大鼠的體重、血糖等水平。干預(yù)完成后處死大鼠,并采用心臟采血法留取大鼠的血液標(biāo)本,使用離心機分離血清,并保存?zhèn)溆�。同時留取各組大鼠的腸道組織,于4%多聚甲醛溶液與液氮中各保存一份,用于后期實驗使用。最后,運用western blot實驗方法檢測各組大鼠空腸組織中SGLT1蛋白的表達(dá)情況,qRT-PCR和免疫組化實驗方法分別檢測大鼠空腸組織中SGLT1 mRNA的表達(dá)水平。結(jié)果:1、與正常對照組大鼠相比,2型糖尿病模型對照組大鼠的血糖明顯升高78%,并顯著上調(diào)空腸組織中SGLT1基因和蛋白的表達(dá),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2、藥物干預(yù)4周后,與2型糖尿病模型對照組大鼠相比,2型糖尿病模型+拜唐蘋干預(yù)組、2型糖尿病模型+格列美脲干預(yù)組均能降低2型糖尿病大鼠的血糖,拜唐蘋干預(yù)組降低46%,格列美脲干預(yù)組降低24%;2型糖尿病模型+拜唐蘋干預(yù)組、2型糖尿病模型+格列美脲干預(yù)組均能夠下調(diào)大鼠空腸組織中SGLT1基因和蛋白的表達(dá)(P0.05),在相同血糖水平下,比較拜唐蘋和格列美脲的干預(yù)效果顯示,拜唐蘋對2型糖尿病大鼠腸道組織中SGLT1蛋白表達(dá)的影響更顯著。結(jié)論:1、對SD大鼠給以高脂乳劑灌胃和高糖飲水聯(lián)合一次性腹腔內(nèi)注入小劑量STZ可以成功建立2型糖尿病大鼠模型。與正常對照組相比,2型糖尿病模型對照組大鼠的血糖明顯上升。2、2型糖尿病模型對照組大鼠空腸組織中SGLT1基因和蛋白表達(dá)水平明顯增加。SGLT1所介導(dǎo)的腸道葡萄糖吸收加速可能是2型糖尿病患者病情發(fā)展的原因之一。3、拜唐蘋、格列美脲藥物對2型糖尿病模型大鼠均有降低血糖的治療作用,并且對2型糖尿病模型大鼠空腸組織中SGLT1蛋白的表達(dá)有一定的影響,兩組均能下調(diào)2型糖尿病模型大鼠空腸組織中SGLT1基因和蛋白的表達(dá)。在相同血糖水平下,比較拜唐蘋和格列美脲藥物的干預(yù)效果顯示,拜唐蘋對2型糖尿病模型大鼠空腸組織中SGLT1蛋白表達(dá)的影響更顯著,提示阿卡波糖與2型糖尿病模型大鼠腸道組織中SGLT1蛋白表達(dá)之間存在一定的關(guān)系。
【圖文】：

尿病模型＋拜唐蘋干預(yù)組、２型糖尿病模型＋格列美脲干預(yù)組明顯降低了糖尿病大逡逑鼠的血糖，差異具有統(tǒng)計學(xué)意（Ｐ＜0．0５），并且２型糖尿病模型＋拜唐蘋干預(yù)組逡逑降低４６％，２型糖尿病模型＋格列美脲干預(yù)組降低２４％，詳細(xì)情況見表１，圖１。逡逑表１邋一般資料比較（ｘ±ｓ）逡逑組別邐隨機血糖（ｍｍｏｌ／Ｌ）逡逑正常對照組邐５．９７邋士邋０．８６逡逑正常對照＋拜唐蘋千預(yù)組邐５．５８±０．６７逡逑２型糖尿病模型對照組邐２７．１６±４．２３＊逡逑２型糖尿病模型＋拜唐蘋干預(yù)組邐１４．５６±２．４０＃逡逑２型糖尿病模型＋格列美脲干預(yù)組邐２０．６８±０．５１＃邐逡逑４０－１逡逑？ｋ逡逑ｄ３0－邐Ｔ逡逑ｅ邐ｍｍ邐＃逡逑｜邋２０－邋＃逡逑Ｉ邐卜■逡逑ｍ邋ｉ0－逡逑一。１＿二：－：ｒ：＿邐，邐＿逡逑Ｎ邐＂Ｖ邐＜５逡逑圖１給藥后４周各組大鼠隨機血糖檢測結(jié)果逡逑（注：１一正常對照組；２—正常對照＋拜唐蘋干預(yù)組；３—２型糖尿病模型對照組；逡逑４—２型糖尿病模型＋拜唐蘋干預(yù)組；５—２型糖尿病模型＋格列美脲干預(yù)組；與正逡逑常對照組相比

照組大鼠空腸組織中的ＳＧＬＴ１蛋白表達(dá)明顯增加，與２型糖尿病模型對照組相逡逑比，２型糖尿病模型＋拜唐蘋干預(yù)組、２型糖尿病模型＋格列美脲干預(yù)組大鼠空腸逡逑組織中的ＳＧＬＴ１蛋白表達(dá)均減少，見圖４。逡逑‘，；}0巧、，~枺浚澹觶茫海В哄危鰣澹澹皰義希驏埽簾a灥逡逑憸V/逡逑ｉｍｗ逡逑栥＿．３媝＆；桯逡逑１１邐~栧義希村危靛義賢跡錘髯櫬笫罌粘ψ櫓校櫻牽蹋裕泵庖咦榛冉希ǎ兀矗埃埃╁義希ㄗⅲ海幣徽６哉兆椋唬病６哉眨萏破桓稍ぷ�；霆埻糖南姟模型对照组：辶x希礎(chǔ)殘吞悄蠆∧Ｐ停萏破桓稍ぷ椋唬怠殘吞悄蠆∧Ｐ停窳忻離甯稍ぷ椋╁義希保卞義，

本文編號：2683246