發(fā)布時間：2020-03-05 11:28

【摘要】：電離輻射會對生物體的遺傳物質造成損傷,引發(fā)細胞壞死和凋亡。會對機體損傷嚴重的電離輻射,常出現(xiàn)于醫(yī)院用于治療腫瘤病人的放療以及太空上的宇宙射線。人的大腦作為重要器官之一,結構復雜且功能強大,當腦部受到輻射損傷,往往會伴隨這一系列炎癥反應。因為生物體過于復雜,所以在本文中使用細胞系建立了神經(jīng)免疫相互作用的細胞模型,探索受到γ射線輻射損傷的神經(jīng)細胞會對免疫細胞產生的效應。本文使用SH-SY5Y細胞(神經(jīng)細胞的體外模型)、U87 MG(膠質細胞的體外模型)、THP-1/U937(單核巨噬細胞的體外模型)和Jurkat(T細胞的體外模型)這五種細胞系構建體外神經(jīng)免疫作用模型。共培養(yǎng)時,神經(jīng)細胞SH-SY5Y和U87 MG細胞是混合培養(yǎng)的,在輻射后換液再培養(yǎng)24小時、48小時、72小時,并將收集的神經(jīng)細胞的培養(yǎng)基再次用于培養(yǎng)免疫細胞,24小時后,收集免疫細胞,并對免疫細胞進行檢測實驗。首先,進行輻射劑量和培養(yǎng)時間的確定,然后在選取了10Gy培養(yǎng)72小時作為THP-1后續(xù)研究的條件,選取了7Gy培養(yǎng)24小時作為研究Jurkat研究和實驗條件。THP-1細胞進行了Brd U增殖實驗、免疫熒光染色、活化細胞表面糖蛋白流式檢測以及趨化實驗。對Jurkat細胞進行了細胞計數(shù)、周期流式檢測和凋亡流式檢測。從實驗中可以得知,受到輻射損傷的共培養(yǎng)細胞會在10、15Gy時會對THP-1產生抑制增殖促活化作用,并會對THP-1細胞產生趨化作用。受到輻射損傷的共培養(yǎng)細胞會抑制Jurkat的增殖。因此,我們推斷當神經(jīng)系統(tǒng)受到輻射后損傷時,會活化單核巨噬細胞并產生趨化因子募集更多免疫細胞,但此時,適應性免疫中T細胞的增殖是被抑制的。
【圖文】：

北京理工大學碩士學位論文.2 不同輻射劑量損傷的神經(jīng)膠質 U87 MG 單獨培養(yǎng)的培養(yǎng)基對免疫細胞的作用為了觀測單獨培養(yǎng)的神經(jīng)膠質細胞 U87 MG 在受到輻射損傷后會對免疫細生何種作用，將 U87 MG 按 4.5%s105 接種量種于 T25 的培養(yǎng)瓶中，培養(yǎng)了48、72 小時后收集培養(yǎng)上清，將培養(yǎng)上清繼續(xù)用于培養(yǎng)免疫細胞 24 小時使用 MTS 法來檢測細胞的存活率。（1）不同輻射劑量的神經(jīng)膠質單獨培養(yǎng)的培養(yǎng)基對 THP-1 的作用受到不同程度輻射損傷的 U87 MG 細胞的培養(yǎng)基對 THP-1 細胞的作用主要為，在低劑量 5Gy 時無反應，在高劑量 7、10、15Gy 對 THP-1 產生促活作用。因為 U87 MG 細胞的半致死劑量為 10Gy，所以 5Gy 的輻射劑量可于 U87 MG 來說，只是造成輕微的損傷，所以基本沒有效應。從 7Gy 開始 72 小時的 U87 MG 細胞的培養(yǎng)基對 THP-1 產生促活化作用。

北京理工大學碩士學位論文.2 不同輻射劑量損傷的神經(jīng)膠質 U87 MG 單獨培養(yǎng)的培養(yǎng)基對免疫細胞的作用為了觀測單獨培養(yǎng)的神經(jīng)膠質細胞 U87 MG 在受到輻射損傷后會對免疫細生何種作用，將 U87 MG 按 4.5%s105 接種量種于 T25 的培養(yǎng)瓶中，培養(yǎng)了48、72 小時后收集培養(yǎng)上清，將培養(yǎng)上清繼續(xù)用于培養(yǎng)免疫細胞 24 小時使用 MTS 法來檢測細胞的存活率。（1）不同輻射劑量的神經(jīng)膠質單獨培養(yǎng)的培養(yǎng)基對 THP-1 的作用受到不同程度輻射損傷的 U87 MG 細胞的培養(yǎng)基對 THP-1 細胞的作用主要為，在低劑量 5Gy 時無反應，，在高劑量 7、10、15Gy 對 THP-1 產生促活作用。因為 U87 MG 細胞的半致死劑量為 10Gy，所以 5Gy 的輻射劑量可于 U87 MG 來說，只是造成輕微的損傷，所以基本沒有效應。從 7Gy 開始 72 小時的 U87 MG 細胞的培養(yǎng)基對 THP-1 產生促活化作用。
【學位授予單位】：北京理工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R594.8

【參考文獻】

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1 吳少雄,鄧美玲,李巧巧,趙充,盧泰祥,李鳳巖,崔念基;腦膠質瘤放射治療的預后因素分析[J];癌癥;2004年S1期

本文編號：2584991