【摘要】：目的研究高糖對大鼠心肌成纖維細胞尾加壓素II(UII)及其受體(UT)表達的影響,為進一步研究UII系統在糖尿病心肌病中的作用提供實驗基礎。方法在無菌條件下取新生1-3天齡Wistar大鼠的心肌成纖維細胞,體外培養(yǎng)并傳代。待第三代心肌成纖維細胞生長密度為70%時,隨機分為正常對照組、高滲對照組、高糖處理組。三組細胞分別用含5.5mmol/L葡萄糖、5.5mmol/L葡萄糖+19.5mmol/L甘露醇、25.0mmol/L葡萄糖的培養(yǎng)基孵育48h,然后應用免疫熒光法、免疫印跡法檢測各組細胞中UII及UT蛋白量的表達。結果通過免疫熒光法和Western blot法可見高糖刺激可使心肌成纖維細胞中UII及其受體UT表達增加,高糖處理組UII和UT表達量明顯高于正常對照組和高滲對照組(F=15.08~192.2,q=3.751~30.00,P0.05)。結論大鼠心肌成纖維細胞中存在UII及UT表達,高糖刺激心肌成纖維細胞可使UII及UT表達增強,提示UII系統可能參與了糖尿病時心肌纖維化過程,為進一步的研究提供實驗基礎。
【圖文】：

×200）a 左側圖片為普通光鏡下心肌成纖維細胞圖b 右側圖片為 a 相應的波形蛋白免疫熒光圖2.2 免疫熒光實驗結果通過免疫熒光檢測可見，正常對照組中，心肌成纖維細胞呈長梭型或多角形，細胞密度較稀疏，胞體相對較狹長，細胞核體積小，多單核，胞質少，細胞核周圍可見綠色熒光，胞質亮度呈弱陽性，隱約可見成纖維細胞輪廓。高滲對照組與高糖處理組中心肌成纖維細胞較正常狀態(tài)胞體較圓，細胞核體積稍增大。其中，高糖處理組心肌成纖維細胞的形態(tài)發(fā)生明顯改變，細胞多呈不規(guī)則多邊型，細胞密度較正常對照組、高滲對照組的細胞密度明顯增高，細胞體積多變小，細胞內多有 1-2 個細胞核。與正常對照組、高滲對照組比較，高糖處理組成纖維細胞細胞核周圍綠色熒光呈明顯高亮狀態(tài)。高糖處理組心肌成纖維細胞在培養(yǎng) 48h 后其 UII、UT 熒光強度均有所增加（圖 2），其 UII、UT 灰度值與前兩組相比有顯著差異（F=192.2、128.2，q=23.96～30.00，p<0.05）（見表 1）。

×200）a 左側圖片為普通光鏡下心肌成纖維細胞圖b 右側圖片為 a 相應的波形蛋白免疫熒光圖2.2 免疫熒光實驗結果通過免疫熒光檢測可見，正常對照組中，心肌成纖維細胞呈長梭型或多角形，，細胞密度較稀疏，胞體相對較狹長，細胞核體積小，多單核，胞質少，細胞核周圍可見綠色熒光，胞質亮度呈弱陽性，隱約可見成纖維細胞輪廓。高滲對照組與高糖處理組中心肌成纖維細胞較正常狀態(tài)胞體較圓，細胞核體積稍增大。其中，高糖處理組心肌成纖維細胞的形態(tài)發(fā)生明顯改變，細胞多呈不規(guī)則多邊型，細胞密度較正常對照組、高滲對照組的細胞密度明顯增高，細胞體積多變小，細胞內多有 1-2 個細胞核。與正常對照組、高滲對照組比較，高糖處理組成纖維細胞細胞核周圍綠色熒光呈明顯高亮狀態(tài)。高糖處理組心肌成纖維細胞在培養(yǎng) 48h 后其 UII、UT 熒光強度均有所增加（圖 2），其 UII、UT 灰度值與前兩組相比有顯著差異（F=192.2、128.2，q=23.96～30.00，p<0.05）（見表 1）。
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R587.2

【參考文獻】

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1 陳曉燕;鄭曉敏;李莉;劉翠平;宋麗芬;耿傲;高蕾;李瑞杰;;血漿尾加壓素Ⅱ水平與糖尿病大血管病變的關系[J];臨床薈萃;2008年10期

本文編號：2570518