【摘要】：背景和目的近年來磺脲類降糖藥對骨質(zhì)疏松的影響引起越來越多學者的關(guān)注。多項大型臨床研究發(fā)現(xiàn),應(yīng)用不同降糖藥物的患者骨折的發(fā)生率有顯著差異,其中應(yīng)用噻唑烷二酮類藥物者骨折的發(fā)生率最高,胰島素次之,再其次為二甲雙胍,骨折發(fā)生率最低的是應(yīng)用磺脲類降糖藥的患者[1-3]。也有部分研究發(fā)現(xiàn)磺脲類藥物與骨折的發(fā)生無明顯相關(guān)性[4-6],最近統(tǒng)計結(jié)果顯示,服用不同劑量磺脲類藥物的患者骨折風險反而增加,顯著高于二甲雙胍組[7-8]。關(guān)于磺脲類降糖藥對骨改建的影響,尚未見國外相關(guān)研究,而國內(nèi)馬攀等人[9-11]報道:磺脲類降糖藥格列美脲可以在高糖環(huán)境下通過上調(diào)葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白-1(GLUT-1)和葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白-4(GLUT-4)的表達來促進大鼠下頜骨成骨細胞攝取葡萄糖,并通過磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路直接促進大鼠成骨細胞的增殖和分化,并且可以提高堿性磷酸酶(ALP)的活性以及增加I型膠原蛋白(COL-1)和骨鈣素(OCN)m RNA表達水平。格列吡嗪和格列喹酮能夠促進MC3T3-E1細胞的增殖和I型膠原蛋白的表達,抑制其凋亡[12-13]。格列苯脲作為第二代磺脲類降糖藥具有強大的降糖作用,臨床應(yīng)用廣泛,且格列苯脲在國外常用于糖尿病合并妊娠的患者。本實驗主要探討不同濃度的格列苯脲在高糖環(huán)境下(16.5mmol/l)對體外培養(yǎng)的小鼠胚胎成骨細胞株MC3T3-E1增殖、分化及凋亡的影響。方法經(jīng)不同濃度格列苯脲干預(yù)MC3T3-E1細胞48小時后,CCK-8比色法被用來檢測MC3T3-E1細胞的增殖率,應(yīng)用實時熒光定量PCR(RT-q PCR)檢測分化相關(guān)標志物I型膠原蛋白(COL-1)和骨橋蛋白(OPN)的表達水平。流式細胞術(shù)被用來檢測細胞的凋亡率,利用Western blot法檢測凋亡蛋白(Bax)和抗凋亡蛋白(Bcl-2)的表達。結(jié)果1.CCK-8比色法與對照組相比,隨著格列苯脲濃度的升高,MC3T3-E1細胞的增殖率逐漸上升,即1μmol/l格列苯脲組,10μmol/l格列苯脲組和20μmol/l格列苯脲組與對照組相比增殖率依次增加了13.1%、24.2%和31.3%,且差異均具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。2.實時熒光定量PCR研究顯示,與對照組相比,COL-1、OPN m RNA的表達量隨著一定范圍內(nèi)格列苯脲濃度(1μmol/l,10μmol/l,20μmol/l)的升高而增加(P0.05)。3.流式細胞檢測術(shù)MC3T3-E1細胞的早期凋亡率隨著格列苯脲濃度的升高而逐漸下降,即對照組、1μmol/l格列苯脲組,10μmol/l格列苯脲組,20μmol/l格列苯脲組的早期凋亡率依次為19.63%,11.20%,7.9%,4.7%,各組相比差異均具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。4.Western Blot與對照組相比,隨著格列苯脲濃度的增加,Bcl-2蛋白逐步高表達,Bax蛋白的表達逐步下降,即Bcl-2/Bax的值呈逐步增大的趨勢(P0.05)。結(jié)論格列苯脲能夠在高糖環(huán)境下促進MC3T3-E1細胞的增殖和分化,并抑制其凋亡,且在一定范圍內(nèi),具有濃度依賴性。
[Abstract]:Background and objective in recent years, the effect of sulfonylurea hypoglycemic drugs on osteoporosis has attracted more and more scholars' attention. A number of large clinical studies have found that there are significant differences in the incidence of fracture in patients treated with different hypoglycemic drugs, among which thiazolidinediketone has the highest incidence of fracture, followed by insulin, followed by metformin. The lowest incidence of fracture was in patients treated with sulfonylurea hypoglycemic drugs. Some studies have also found that sulfonylurea drugs have no significant correlation with fracture occurrence [4 鈮，

本文編號：2483596