【摘要】：背景:我國(guó)肥胖、糖尿病、心腦血管疾病、脂肪肝等糖脂代謝紊亂病患病率迅速上升,已成為主要的衛(wèi)生難題。生活方式在糖脂代謝病發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。流行病學(xué)、權(quán)威指南等研究證據(jù)表明,安逸生活方式(Sedentary lifestyle)與糖脂代謝病發(fā)生聯(lián)系緊密,但是在基礎(chǔ)研究少有報(bào)道。目的:本研究在動(dòng)物水平開展,比較安逸生活方式和艱苦生活方式對(duì)SD大鼠糖脂代謝的影響,為糖脂代謝病基礎(chǔ)研究提供證據(jù)。方法:1.分組設(shè)計(jì):動(dòng)物于普通級(jí)環(huán)境下維持飼料觀察一周,光照條件為13hL/11hD,自由進(jìn)食,飲水。按體重?zé)o差異隨機(jī)分成4組:空白對(duì)照,安逸生活方式組,艱苦生活方式干預(yù)A組,艱苦生活方式干預(yù)B組。2.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):正常組為正常光照13hL/11hD,自由飲食4周;安逸生活方式組為正常光照13hL/11hD,自由高糖高脂飲食12周;艱苦生活方式干預(yù)A組光照條件為持續(xù)24hL,并置于小平臺(tái)水環(huán)境4周,后高脂飲食8周;艱苦生活方式干預(yù)B組正常光照13hL/11hD,高脂飲食4周,然后進(jìn)行生活干預(yù),光照條件為持續(xù)24hL,并置于水環(huán)境小平臺(tái)4周,最后繼續(xù)高脂飲食4周。3.觀察指標(biāo):大鼠每天8:00測(cè)量體重,每周換墊料2次;第4、8、12周進(jìn)行OGTT實(shí)驗(yàn),經(jīng)過(guò)12周后,大鼠在處死前禁食8小時(shí),并在不同時(shí)間點(diǎn)處死,測(cè)定大鼠TC、TG、HDL-C、LDL-C、FBG、FINS、HOMA-IR、TNF-α、IL-6、總脂聯(lián)素、HMW脂聯(lián)素。取大鼠肝臟、皮下脂肪、附睪脂肪、褐色脂肪,制作脂肪組織病理組織切片,Western blot法檢測(cè)脂肪組織中PPARγ蛋白和C/EBPβ蛋白表達(dá)量,免疫組化染色技術(shù)檢測(cè)PPARγ、C/EBPβ在脂肪組織中的表達(dá),RT-PCR法檢測(cè)脂肪組織PPARγ和C/EBPβ基因表達(dá)。結(jié)果:1.12周以后,各組大鼠的體重均有增高,安逸生活方式組的肝指數(shù)對(duì)比正常組顯著增加,而艱苦生活方式干預(yù)的兩組對(duì)比安逸生活方式組,肝指數(shù)均降低。正常組SD大鼠與安逸生活方式組在4周內(nèi)體重增加明顯,體型胖碩,安逸生活方式組大鼠毛發(fā)油亮,腹部脂肪沉積,性情溫順,不喜動(dòng),行動(dòng)緩慢。艱苦生活方式組SD大鼠毛發(fā)脫落明顯,稍抓捏皮膚則毛發(fā)隨即掉落。而且,艱苦期內(nèi)動(dòng)物易激怒。2.脂代謝:與正常飲食組相比,安逸生活方式組血清TG水平升高,TC、HDL-C、LDL-C水平無(wú)顯著性差異,表現(xiàn)為高甘油三酯血脂特點(diǎn);生活干預(yù)A組及生活干預(yù)B組與安逸生活方式組對(duì)比,并未顯著性改善血脂TG(P0.05);生活干預(yù)A組HDL-C均值降低,但未有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),生活干預(yù)B組HDL-C水平顯著降低(P0.05);生活干預(yù)A組及生活干預(yù)B組LDL-C水平顯著降低(P0.05),生活干預(yù)A組和生活干預(yù)B組間無(wú)顯著性差異(P0.05)。3.糖代謝:與正常組相比,安逸生活方式組的FBG、FINS、HOMA-IR顯著性升高(P0.05),生活干預(yù)組大鼠FBG、FINS、HOMA-IR水平明顯較安逸生活方式組降低(P0.05);OGTT、HOMA-IR結(jié)果顯示安逸生活方式組較正常組升高,生活干預(yù)組較安逸生活方式組顯著下降(P0.05)。對(duì)比正常組,安逸生活方式組血清TNF-α的水平呈顯著性升高(P0.05),生活干預(yù)組對(duì)比安逸生活方式組顯著性下降(P0.01)。4.組織病理切片染色:正常組皮下脂肪和附睪脂肪組織病理切片與安逸生活方式組脂肪組織病理切片呈數(shù)量少,體積較大,生活干預(yù)組并未顯著改善白色脂肪組織的形態(tài)。與正常組對(duì)比,安逸生活方式組褐色脂肪細(xì)胞呈體積增大,脂肪組織出現(xiàn)白色化,生活干預(yù)兩組對(duì)比安逸生活方式組,細(xì)胞體積顯著變小,數(shù)量增加的情況。5.Western blot結(jié)果顯示,與正常組對(duì)比,安逸生活方式組大鼠脂肪組織的PPARγ、C/EBPβ蛋白及基因表達(dá)下調(diào),生活干預(yù)A組PPARγ、C/EBPβ蛋白表達(dá)較安逸生活方式組顯著上調(diào),生活干預(yù)B組PPARγ、C/EBPβ蛋白表達(dá)較安逸生活方式組上調(diào)。免疫組化結(jié)果顯示,與安逸生活方式組對(duì)比,生活干預(yù)組的皮下脂肪中PPARγ的表達(dá)無(wú)顯著性差異,C/EBPβ兩組均顯著性升高;生活干預(yù)A組附睪脂肪中PPARγ顯著性升高,生活干預(yù)B組無(wú)顯著性差異,生活干預(yù)兩組C/EBPβ均無(wú)顯著性差異;生活干預(yù)A組褐色脂肪中PPARγ顯著性升高,生活干預(yù)B組無(wú)顯著性差異,生活干預(yù)兩組中C/EBPβ均顯著性升高。RT-PCR結(jié)果顯示,生活干預(yù)A組的PPARγ、C/EBPβ的m RNA水平顯著上調(diào),生活干預(yù)B組無(wú)顯著性差異。結(jié)論:安逸生活方式與艱苦生活方式對(duì)大鼠糖脂代謝的影響作用不同;艱苦生活方式能有效上調(diào)脂肪組織中的PPARγ、C/EBPβ表達(dá),改善脂肪分化,增加脂肪細(xì)胞因子的分泌,改善安逸生活方式下大鼠的糖脂代謝紊亂。
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【學(xué)位授予單位】：廣東藥科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R58

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2253877