【摘要】：目的1.初步闡明鏈脲佐菌素(STZ)誘導的成年糖尿病大鼠腸道痛覺敏感性改變及脊髓DRG神經元(DRG)細胞中P2X3受體表達的變化特征。2.探討α-硫辛酸(ALA)對糖尿病大鼠腸道痛覺敏感性的作用及其對P2X3受體表達的作用特征。方法1.實驗動物選擇成年雌性SD大鼠,應用STZ 65mg/kg腹腔注射誘導糖尿病模型。分組:將SD大鼠隨機分為對照組(CON),糖尿病組(STZ),糖尿病生理鹽水處理組(STZ+NS)及糖尿病α-硫辛酸處理組(STZ+ALA)。運用腹壁撤退反射(AWR)評分檢測大鼠在不同的結直腸充氣壓力下疼痛反應。2.應用Di I(1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate)熒光染料直結腸注射逆行標記直結腸投射的脊髓DRG神經元細胞后,利用細胞膜片鉗技術,檢測DRG神經元興奮性及ATP電流密度。3.使用Western Blotting技術檢測糖尿病大鼠直結腸特異性DRG神經元細胞中P2X3受體表達量的改變。結果1.STZ腹腔注射后1周起,大鼠血糖顯著升高,并伴體重不增(p0.01)。2.STZ注射后2-8周,糖尿病大鼠出現腸道痛敏(p0.05),腹腔注射抗氧化劑ALA能明顯緩解糖尿病大鼠腸道痛敏。3.糖尿病大鼠直結腸特異性DRG神經元細胞興奮性及ATP電流密度顯著增加,給予腹腔注射ALA一周后,神經元興奮性明顯及ATP電流密度下降。4.糖尿病大鼠直結腸特異性DRG神經元細胞中P2X3受體表達量顯著高于對照組(p0.01),而給予ALA腹腔注射一周后,P2X3受體蛋白表達顯著下調(p0.01)。結論STZ誘導的糖尿病大鼠腸道特異性DRG節(jié)神經元細胞中P2X3受體的表達量顯著上調,細胞興奮性增加,介導了糖尿病大鼠腸道痛覺過敏�？寡趸瘎│�-硫辛酸能從分子水平阻斷上述病理過程,表明氧化應激機制參與調控腸道特異性DRG神經元細胞中P2X3受體的表達及功能。
[Abstract]:Objective 1. To elucidate the changes of intestinal pain sensitivity induced by streptozotocin (STZ) and the expression of P2X3 receptor in (DRG) cells of spinal cord DRG neurons in adult diabetic rats. To investigate the effect of 偽 -lipoic acid (ALA) on intestinal pain sensitivity and expression of P2X3 receptor in diabetic rats. Method 1. Adult female SD rats were selected as experimental animals. Diabetic model was induced by intraperitoneal injection of STZ 65mg/kg. Group: SD rats were randomly divided into control group, (CON), diabetes group, (STZ), diabetic saline group, (STZ NS) group and diabetic 偽 -lipoic acid treated group (STZ ALA). Abdominal withdrawal reflex (AWR) score was used to measure the pain response of rats under different inflatable pressure of colon and rectum. After retrograde labeled spinal cord DRG neuron cells were injected with Di I (_ (1) ~ (-1) -dioctadecyl-3 (3) -tetramethylindocarbocyanine perchlorate, the excitability of DRG neurons and the density of ATP current 路3 were measured by using cell patch clamp technique. Western Blotting technique was used to detect the expression of P2X3 receptor in colon specific DRG neurons of diabetic rats. Results from the first week after intraperitoneal injection of 1.STZ, the blood glucose of the rats increased significantly, and with no weight gain (p0.01). 2. After injection of STZ, the diabetic rats developed intestinal hyperalgesia (p0.05). The abdominal injection of antioxidant ALA significantly alleviated the intestinal pain sensitivity of diabetic rats. The excitability and ATP current density of DRG neurons were significantly increased in diabetic rats. One week after intraperitoneal injection of ALA, the neuronal excitability was obvious and the ATP current density decreased by .4. The expression of P2X3 receptor in DRG neurons of diabetic rats was significantly higher than that in the control group (p0.01), but the expression of P2X3 receptor protein was down-regulated one week after intraperitoneal injection of ALA (p0.01). Conclusion the expression of P2X3 receptor in the intestinal specific DRG ganglion neurons of diabetic rats induced by STZ was significantly up-regulated and the cell excitability was increased, which mediated the intestinal hyperalgesia in diabetic rats. The antioxidant 偽 -lipoic acid can block these pathological processes at molecular level, suggesting that oxidative stress mechanism is involved in regulating the expression and function of P2X3 receptor in intestinal specific DRG neurons.
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R587.2

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