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白細(xì)胞介素-22促進(jìn)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維化膜細(xì)胞的增殖

發(fā)布時(shí)間:2018-06-07 02:04

  本文選題:類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎 + 成纖維滑膜細(xì)胞。 參考:《南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年12期


【摘要】:目的通過白細(xì)胞介素-22(IL-22)干預(yù)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)成纖維滑膜細(xì)胞(FLS)以期明確IL-22促進(jìn)其增殖的機(jī)制。方法無菌條件下獲取的RA滑膜組織,應(yīng)用組織塊分離法培養(yǎng)RA-FLS,含10%FBS的DMEM培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng),并對(duì)第4~5代FLS應(yīng)用vimentin/CD68進(jìn)行免疫組化法鑒定;不同濃度的IL-22干預(yù)FLS培養(yǎng)24、48、72 h后,MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖程度;聯(lián)合IL-22和/或AG490干預(yù)FLS,于冰面上用含蛋白酶抑制劑的細(xì)胞裂解液獲取細(xì)胞總蛋白,再經(jīng)超聲、離心提取、蛋白定量后,Western blot法檢測(cè)STAT3、ERK1/2、P38蛋白及其磷酸化蛋白的表達(dá),統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS20.0軟件進(jìn)行,P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果不同濃度IL-22干預(yù)FLS的增殖均較對(duì)照組呈梯度增高變化,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。隨著IL-22干預(yù)時(shí)間的延長(zhǎng),STAT3總蛋白表達(dá)相對(duì)灰度值的整體水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.68),但是其磷酸化蛋白表達(dá)相對(duì)灰度值整體水平差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001),且在干預(yù)的不同時(shí)間點(diǎn)STAT3磷酸化蛋白相對(duì)表達(dá)量較基線0 h時(shí)均顯著升高,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001)。IL-22干預(yù)后的ERK1/2和P38總蛋白及其磷酸化蛋白表達(dá)相對(duì)灰度值差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。聯(lián)合50 ng/m L IL-22和100μmol/L AG490干預(yù)FLS不同時(shí)間后,細(xì)胞的增殖程度較單用IL-22干預(yù)均顯著降低(P0.01)。結(jié)論 IL-22以濃度依賴方式促進(jìn)RA成纖維化膜細(xì)胞STAT3蛋白磷酸化所介導(dǎo)的細(xì)胞增殖,而非ERK1/2和P38蛋白所介導(dǎo)的信號(hào)通路。
[Abstract]:Objective To investigate the effect of IL - 22 ( IL - 22 ) on proliferation of cultured RA - FLS ( P0.05 ) .
【作者單位】: 南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院;南方醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金/海外及港澳學(xué)者合作研究基金(81628017,81573730) 廣東省自然科學(xué)基金(2017A030313868) 南方醫(yī)院院長(zhǎng)基金(2016C024) 南方醫(yī)科大學(xué)科研啟動(dòng)計(jì)劃(QD2017N022)~~
【分類號(hào)】:R593.22

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本文編號(hào):1989207

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