本文選題：橋本甲狀腺炎 + 甲狀腺乳頭狀癌��； 參考：《第四軍醫(yī)大學(xué)》2015年博士論文

【摘要】：橋本甲狀腺炎(Hashimoto’s thyroiditis,HT),因日本學(xué)者橋本策于1912年首先報(bào)道而命名,是最常見的器官特異性自身免疫性疾病。該病不僅會引起永久性甲狀腺功能低下,還與甲狀腺癌和淋巴瘤發(fā)生密切相關(guān),尤其是甲狀腺乳頭狀癌(Papillary thyroid carcinoma,PTC)。HT的核心病理學(xué)特征是顯著的淋巴細(xì)胞及大量漿細(xì)胞浸潤和淋巴濾泡形成、甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞變性和破壞,直至晚期形成纖維化。雖然已經(jīng)歷逾百年的研究,其病因仍不明確。目前研究表明,HT的發(fā)病是環(huán)境因素和遺傳因素共同作用的結(jié)果。而在環(huán)境因素中,病毒感染可能起重要作用,但其病因和發(fā)病機(jī)制仍未闡明。人類微小病毒B19(Parvovirus B19,PVB19)是單鏈DNA病毒,屬于微小病毒科,僅對人類致病。PVB19感染普遍存在,并與多種自身免疫性疾病的發(fā)生密切相關(guān),但既往研究未涉及HT與PTC。我們課題組一直致力于PVB19在疾病發(fā)生發(fā)展中的作用研究,發(fā)現(xiàn)PVB19在HT的發(fā)病及HT向PTC惡性轉(zhuǎn)化中發(fā)揮作用。正性調(diào)控域鋅指蛋白1(Positive regulatory domain zinc finger protein 1,PRDM1)是一種具有鋅指結(jié)構(gòu)域的抑制性蛋白,其主要功能包括早期胚胎發(fā)育和漿細(xì)胞分化。PRDM1也表達(dá)于T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等淋巴濾泡的主要細(xì)胞成分,提示其在淋巴濾泡形成和機(jī)體免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。綜上所述,我們自然會問,ht的病變組織中是否存在prdm1表達(dá)?其定位如何?另外,鑒于ht-ptc存在惡性轉(zhuǎn)化,那么,prdm1在此過程中是否也起作用?其分子機(jī)理為何?同時(shí),由于pvb19與ht及ptc的發(fā)病關(guān)系密切,那么,pvb19感染與prdm1表達(dá)是否有關(guān)?對這些問題的回答不僅對闡明ht的發(fā)病和轉(zhuǎn)化機(jī)制有重要的意義,而且也可以為ht及ptc的防治提供新的理論依據(jù)。本研究首先用含有16種人類腫瘤及瘤旁組織(包括食道、胃、結(jié)腸、直腸、肝、肺、腎、乳腺、宮頸、卵巢、膀胱、淋巴結(jié)、皮膚、腦、前列腺和胰腺)組織芯片以及甲狀腺癌及癌旁組織芯片篩查prdm1的表達(dá),以明確其組織特異性及其蛋白表達(dá)譜;通過回顧性研究prdm1蛋白在正常甲狀腺(30例)、結(jié)節(jié)性甲狀腺腫(20例)、ht(86例)、甲狀腺腺瘤(42例)、ptc(54例)、甲狀腺濾泡癌(6例)和甲狀腺髓樣癌(9例)手術(shù)標(biāo)本的表達(dá),明確其在正常甲狀腺及多種甲狀腺疾病組織的表達(dá)模式,并對其陽性率和陽性等級進(jìn)行評價(jià),探討該分子在甲狀腺疾病發(fā)生中的作用;通過配對比較4例ht和4例ptc新鮮組織中prdm1和pvb19基因及蛋白表達(dá)情況,對兩種蛋白的相互關(guān)系進(jìn)行初步分析;通過在原代培養(yǎng)人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞中轉(zhuǎn)染prdm1和pvb19基因,檢測基因變化,探討prdm1在ht發(fā)生中的潛在作用機(jī)制;通過沉默人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞系sw579中的prdm1基因,初步探討其在ptc中的生物學(xué)功能。本研究的主要結(jié)果與發(fā)現(xiàn)如下:1.在人體16種腫瘤及瘤旁組織芯片檢測中,prdm1呈散在表達(dá);而在甲狀腺癌及癌旁組織芯片中(ptc23例、ftc16例和正常組織8例),發(fā)現(xiàn)22例ptc和9例ftc癌細(xì)胞胞漿表達(dá)陽性,正常組織全部陰性。同時(shí),根據(jù)芯片提供的臨床分期資料將甲狀腺癌的tnm分期與prdm1表達(dá)程度進(jìn)行spearman相關(guān)分析。結(jié)果顯示,prdm1表達(dá)陽性程度與直接浸潤能力t(p=0.464)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移n(p=0.064)并無相關(guān)性。擴(kuò)大甲狀腺疾病病變類型和病例數(shù)后進(jìn)行了手術(shù)標(biāo)本的大樣本分析,發(fā)現(xiàn)在ht、甲狀腺腺瘤、ptc、甲狀腺濾泡癌和髓樣癌組織中prdm1陽性率分別為96.5%、35.7%、79.6%、83.3%、77.8%,而在正常甲狀腺和結(jié)節(jié)性甲狀腺腫中表達(dá)均陰性。綜合統(tǒng)計(jì)分析顯示prdm1在ht(p=0.000)和ptc(p=0.002)的表達(dá)陽性率與其它類型組織具有顯著性差異;2.對81例ht和54例ptcprdm1表達(dá)和pvb19蛋白切片進(jìn)行數(shù)字化測量和配對分析,發(fā)現(xiàn)兩種疾病中prdm1和pvb19表達(dá)顯著相關(guān)(htp=0.000,ptcP=0.002);在對4例HT和4例PTC新鮮組織基因和蛋白表達(dá)進(jìn)行檢測,在2例HT和1例PTC中PRDM1和PVB19共存,進(jìn)一步使用免疫熒光共聚焦技術(shù)分析,發(fā)現(xiàn)兩種蛋白具有共定位,免疫沉淀也證實(shí)二者具有相互作用;3.原代培養(yǎng)人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞中分別瞬時(shí)轉(zhuǎn)染PRDM1和PVB19基因后進(jìn)行NFκB mRNA檢測,發(fā)現(xiàn)與轉(zhuǎn)入PVB19 VP1相比,轉(zhuǎn)入PVB19 NS1基因后PRDM1和NFκB表達(dá)均顯著上調(diào)(PRDM1 P=0.017;NFκB P=0.040)。PRDM1和NFκB表達(dá)峰值分別出現(xiàn)于轉(zhuǎn)染后36 h和24 h,提示NFκB在PVB19 NS1介導(dǎo)PRDM1表達(dá)中起重要作用。4.檢測PRDM1 RNA干涉前后甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞系SW579的狀態(tài)和周期,發(fā)現(xiàn)處理后細(xì)胞凋亡現(xiàn)象明顯增加;處理前細(xì)胞周期G1、G2和S期比例分別為53.9%、36.4%和9.71%,處理后分別變?yōu)?9.5%、6.92%和23.6%,G1期(P=0.030)、G2期(P=0.000)和S期(P=0.006)細(xì)胞比例變化有顯著性差異。綜合以上結(jié)果,可以得出以下結(jié)論:PRDM1在人體多數(shù)組織中都有表達(dá),但表達(dá)方式有所不同;PRDM1在甲狀腺疾病特別是HT和PTC發(fā)病中有重要作用,并與PVB19感染密切相關(guān),其表達(dá)很可能是PVB19感染誘導(dǎo)所致,并且NFκB參與該過程;PRDM1在甲狀腺癌總體表達(dá)程度與浸潤和轉(zhuǎn)移能力無關(guān),但其表達(dá)強(qiáng)度與增殖能力有關(guān),并在PTC細(xì)胞周期調(diào)控和抗凋亡方面有重要作用。
[Abstract]:Hashimoto ' s thyroid carcinoma ( HT ) , named after first reported in 1912 , is the most common type of organ - specific autoimmune disease . The disease not only causes permanent hypothyroidism but also closely related to thyroid cancer and lymphoma , especially papillary thyroid carcinoma ( PTC ) . In this study , it is suggested that the pathogenesis and pathogenesis of HT may play an important role in the development of lymphoid follicles . The expression of prdm1 and pvb19 genes in thyroid carcinoma and adjacent tissues were analyzed . The results showed that the positive rates of prdm1 and pvb19 in thyroid adenoma , thyroid adenoma , thyroid follicular carcinoma ( 6 cases ) and medullary thyroid carcinoma ( n = 0.064 ) were analyzed . The results showed that the positive rates of prdm1 and pvb19 in thyroid carcinoma and adjacent tissues were 96.5 % , 33.7 % , 79.6 % , 83.3 % and 77.8 % respectively . The results showed that the expression of PRDM1 and NF - 魏B in human thyroid follicular epithelial cells increased significantly ( PRDM1 P = 0 . 017 ; NF - 魏B P = 0 . 040 ) . Conclusion : PRDM1 plays an important role in the pathogenesis of thyroid diseases , especially in HT and PTC .
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R736.1;R581.4

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 王洪江;李培華;劉穩(wěn);許學(xué)谷;;PRDM1基因在喉癌組織中表達(dá)的研究及臨床意義[J];徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年02期

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本文編號：1967912