本文選題：微模式 + 粘附形狀��； 參考：《北京理工大學》2016年碩士論文

【摘要】：老齡化、婦女絕經(jīng)、病人長期臥床以及宇航員長期在太空中失重等都會造成骨量的大量流失,從而嚴重影響人們的健康。骨吸收和骨形成是骨重建的兩個重要過程,其中骨吸收由破骨細胞完成。破骨前體細胞來源于骨髓造血干細胞,其為單核巨噬細胞,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)可在化學因子的誘導下分化為多核的成熟破骨細胞,而細胞所處的力學微環(huán)境是否參與調(diào)控破骨細胞的融合則不清楚。我們此前已經(jīng)發(fā)現(xiàn),單層鋪展的細胞在圓環(huán)和圓形模式的邊界處其細胞單層內(nèi)的剪應力最大,因此擬研究這種局部力學微環(huán)境是否影響破骨前體細胞的融合以及其機制是什么。本文利用微接觸印刷技術(shù)構(gòu)建了多細胞單層鋪展的圓環(huán)形和圓形微模式,然后觀測了內(nèi)外不同區(qū)域的細胞融合率分布,進而利用免疫熒光染色技術(shù)觀察了F-actin、Vinculin、β-catenin、E-cadherin四種蛋白在圓環(huán)形和圓形微模式上不同位置的表達。實驗結(jié)果顯示,用MC3T3-E1上清液誘導破骨前體細胞在圓環(huán)和圓形微模式上融合4天和6后,在圓環(huán)和圓形的最外側(cè)融合率最低;而F-actin、Vinculin、β-catenin、E-cadherin四種蛋白在圓環(huán)形和圓形微模式最外側(cè)表達也最高。因此我們推測,細胞單層的外邊界處細胞會受到較高水平的剪應力,從而細胞骨架張力、細胞與基底間的作用力以及細胞間的相互作用力都較大,最終導致破骨細胞融合率較小。以上實驗結(jié)果表明細胞單層內(nèi)的力學微環(huán)境對破骨前體細胞的融合具有重要作用,并初步闡明了調(diào)控此融合過程的分子機制。
[Abstract]:Aging, menopause, prolonged bed rest and weightlessness of astronauts in space can cause massive bone loss, which can seriously affect people's health. Bone resorption and bone formation are two important processes of bone reconstruction, in which bone resorption is accomplished by osteoclasts. Osteoclast derived from bone marrow hematopoietic stem cells, which are mononuclear macrophages, have been found to differentiate into multinucleated mature osteoclasts induced by chemical factors. Whether the mechanical microenvironment in which the cells are located is involved in the regulation of osteoclast fusion is unclear. We have previously found that monolayer cells exhibit the greatest shear stress in the monolayer at the boundaries of the circular and circular patterns, so we are going to study whether this local mechanical microenvironment affects the fusion of osteoclast precursor cells and what the mechanism is. In this paper, the circular and circular micromodels of multi-cell monolayer were constructed by microcontact printing, and the distribution of cell fusion rate in different regions of the cell was observed. The expression of four proteins of F-actinine Vinculin, 尾 -cateninine E-cadherin in circular and circular micropatterns was observed by immunofluorescence staining. The results showed that the fusion rate of osteoclast precursor cells induced by MC3T3-E1 supernatant was the lowest in circle and circle after 4 days and 6 days. The expression of F-actinin Vinculin, 尾 -cateninine E-cadherin was also the highest in the outermost of circular and circular micropatterns. So we speculate that the outer boundary of monolayer cells will be subjected to a higher level of shear stress, thus the cytoskeleton tension, the force between the cell and the substrate, and the interaction between the cells are larger. Finally, the rate of osteoclast fusion is small. The above results indicate that the mechanical microenvironment in the monolayer plays an important role in the fusion of osteoclast precursor cells, and the molecular mechanism that regulates the fusion process is elucidated.
【學位授予單位】：北京理工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R580

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本文編號：1836685