神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1對高糖損傷的心肌細(xì)胞的保護(hù)作用及其機(jī)制
本文選題:神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白- + 肌細(xì)胞; 參考:《中國循環(huán)雜志》2016年09期
【摘要】:目的:研究神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG-1)對高糖損傷的心肌細(xì)胞的保護(hù)作用及其機(jī)制。方法:培養(yǎng)大鼠胚胎期心臟組織H9c2心肌細(xì)胞,進(jìn)行分組處理。分別為對照組(不加任何誘導(dǎo)藥物處理24 h)、高糖作用組(HG組,用含終濃度33 mmol/L的葡萄糖培養(yǎng)基培養(yǎng)心肌細(xì)胞處理24 h)、不同濃度NRG-1作用組(分別在含有33 mmol/L高濃度葡萄糖的培養(yǎng)基中同時(shí)加入10、50、250 nmol/L的NRG-1培養(yǎng)心肌細(xì)胞處理24 h,設(shè)定為N1、N2、N3組)。細(xì)胞計(jì)數(shù)(CCK-8)方法檢測各組心肌細(xì)胞存活率;流式細(xì)胞術(shù)檢測各組心肌細(xì)胞胞內(nèi)活性氧(ROS)水平和細(xì)胞凋亡情況;同時(shí)測定各組心肌細(xì)胞中肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量;蛋白免疫印跡(Western-blot)方法檢測各組心肌細(xì)胞中NRG-1的受體,即表皮生長因子受體-2(Erb B2)和表皮生長因子受體-4(Erb B4)的表達(dá);原位缺口末端標(biāo)記法(Tunel)染色檢測2型糖尿病心肌病模型大鼠經(jīng)NRG-1處理后的心肌細(xì)胞凋亡。結(jié)果:N1組至N3組心肌細(xì)胞的存活率由(63.33±3.56)%上升至(85.88±4.55)%;心肌細(xì)胞中ROS含量由(33.57±4.23)%下降至(15.88±4.55)%;細(xì)胞凋亡率由(36.44±4.86)%下降至(14.77±4.21)%;心肌細(xì)胞中Erb B2和Erb B4受體表達(dá)隨之分別由(0.26±0.04)、(0.39±0.03)上升至(0.84±0.03)、(0.72±0.04),與HG組比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);CK、LDH酶活力和MDA含量逐漸下降而SOD活性逐漸回升,與HG組比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。NRG-1作用的2型糖尿病心肌病模型大鼠心肌組織細(xì)胞凋亡也顯著下降。結(jié)論:NRG-1能夠提升高糖作用下心肌細(xì)胞存活率,減輕高糖對心肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷和細(xì)胞凋亡,可能通過與心肌細(xì)胞中Erb B2/Erb B4受體結(jié)合發(fā)揮作用。
[Abstract]:Aim: to study the protective effect and mechanism of neuroregulatory protein 1 (NRG-1) on hyperglycemic cardiomyocytes. Methods: H9c2 cardiomyocytes from rat embryonic heart were cultured and treated in groups. The rats were divided into two groups: control group (without any induced drugs for 24 h), high glucose group (HG group), and high glucose group (HG group). Cardiomyocytes were cultured on glucose medium containing final concentration of 33 mmol/L for 24 h. The cardiomyocytes were treated with different concentrations of NRG-1 for 24 h. The cultured cardiomyocytes were treated with NRG-1 containing 33 mmol/L high concentration glucose for 24 h. The survival rate of cardiac myocytes in each group was detected by CCK-8 method, the intracellular reactive oxygen species (Ros) level and apoptosis of cardiac myocytes in each group were detected by flow cytometry. At the same time, the activities of creatine kinase (CK), lactate dehydrogenase (LDH), superoxide dismutase (SOD) and malondialdehyde (MDA) in cardiac myocytes were measured, and the receptors of NRG-1 in cardiac myocytes were detected by Western blot. The expression of epidermal growth factor receptor (EGF receptor -2Erb B2) and epidermal growth factor receptor (EGF receptor -4e Erb B4) was detected by in situ Nick end labeling (Tunel) staining in order to detect cardiomyocyte apoptosis in rats with type 2 diabetic cardiomyopathy treated with NRG-1. Results the survival rate of cardiomyocytes increased from 63.33 鹵3.56% to 85.88 鹵4.55%, the content of ROS decreased from 33.57 鹵4.23% to 15.88 鹵4.55%, the apoptosis rate decreased from 36.44 鹵4.86% to 14.77 鹵4.21%, and the expression of Erb B2 and Erb B 4 receptors increased from 0.26 鹵0.044 鹵0.39 鹵0.03 to 0.84 鹵0.03 鹵0.72 鹵0.04, respectively. Compared with HG group, the activity of LDH and the content of MDA decreased gradually, but the activity of SOD increased gradually. Compared with the HG group, the apoptosis of cardiomyocytes in type 2 diabetic cardiomyopathy model rats with P0.05 and NRG-1 was significantly decreased. Conclusion: the effect of 1: NRG-1 on the survival rate of cardiomyocytes and the reduction of oxidative stress and apoptosis induced by high glucose may play a role by binding to Erb B2/Erb B4 receptor in cardiomyocytes.
【作者單位】: 蘇州市吳中人民醫(yī)院心內(nèi)科;蘇州市吳中人民醫(yī)院門診部;成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院地方干部病房科;
【分類號(hào)】:R587.2;R54
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