本文選題：糖尿病腎病　切入點(diǎn)：系膜細(xì)胞　出處：《青海大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的:探討基質(zhì)素2在糖尿病腎小球硬化中發(fā)揮的作用以及TGF-β1/Smad3信號(hào)途徑對(duì)基質(zhì)素2的調(diào)節(jié)作用。方法:1.應(yīng)用HE和PAS染色技術(shù)觀察糖尿病腎病小鼠腎臟的病理變化。2.利用RT-PCR和蛋白印跡技術(shù)定量分析正常和糖尿病腎病小鼠腎臟內(nèi)基質(zhì)素2的表達(dá)水平。3.采用高糖和TGF-β1刺激培養(yǎng)的小鼠腎小球系膜細(xì)胞及對(duì)高糖刺激小鼠系膜細(xì)胞進(jìn)行TGF-β1中和抗體干預(yù),定量分析高糖和TGF-β1刺激及TGF-β1中和抗體干預(yù)情況下基質(zhì)素2蛋白表達(dá)的水平。結(jié)果:1.實(shí)驗(yàn)組的小鼠腎臟出現(xiàn)系膜基質(zhì)增加等DN早期癥狀,20周齡時(shí)腎臟病理改變明顯,基底膜增厚、腎小管擴(kuò)張、出現(xiàn)了DN典型的硬化性結(jié)節(jié)。2.RT-PCR和蛋白印跡結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組小鼠基質(zhì)素2的m RNA和蛋白的表達(dá)顯著高于正常組小鼠(P0.05,n=10)。3.高糖和TGF-β1培養(yǎng)的小鼠系膜細(xì)胞基質(zhì)素2m RNA和蛋白的表達(dá)顯著增高。TGF-β1/Smad3抑制劑可以阻止高糖和TGF-β1誘導(dǎo)基質(zhì)素2的表達(dá)。結(jié)論:1.KKAy自發(fā)2型DN模型小鼠的尿白蛋白增加,腎臟病理改變顯著,基底膜增厚,小管擴(kuò)張,出現(xiàn)DN典型的結(jié)節(jié)性硬化。2.實(shí)驗(yàn)組KKAy小鼠基質(zhì)素2的m RNA和蛋白表達(dá)均顯著高于正常C57BL/6J小鼠。3.高糖刺激的小鼠腎小球系膜細(xì)胞SV40 MES 13高表達(dá)Matrilin-2蛋白。4.TGF-β1以時(shí)間依賴方式調(diào)節(jié)小鼠腎小球系膜細(xì)胞SV40 MES 13Matrilin-2的表達(dá)。
[Abstract]:Objective: to investigate the role of matrix 2 in diabetic glomerulosclerosis and the regulatory effect of TGF- 尾 1/Smad3 signal pathway on matrix 2. Methods: 1. The pathological changes of kidney in diabetic nephropathy mice were observed by HE and PAS staining. Using RT-PCR and Western blotting techniques to quantitatively analyze the expression of matrix 2 in kidney of normal and diabetic nephropathy mice. 3. Glomerular Mesangial cells stimulated by high glucose and TGF- 尾 1 and Mesangial cells stimulated by high glucose in mice. TGF- 尾 _ 1 neutralizing antibody was used to interfere with TGF- 尾 _ 1, The expression of matrix 2 protein was quantitatively analyzed under the stimulation of high glucose and TGF- 尾 1 and the intervention of TGF- 尾 1 neutralizing antibody. Results: 1. The renal pathological changes and basement membrane thickening were observed in the kidney of the experimental group at the age of 20 weeks after early DN symptoms such as Mesangial matrix increase. Tubule dilatation, The results of RT-PCR and Western blotting showed that the expression of m RNA and protein of matrix 2 in experimental group mice was significantly higher than that in normal group mice (P0. 05). 3. 2 m RNA and egg of Mesangial cells of mice cultured with high glucose and TGF- 尾 1. TGF- 尾 1/Smad3 inhibitor could inhibit the expression of matrix 2 induced by high glucose and TGF- 尾 1. Conclusion: 1. The pathological changes of the kidney were obvious, the basement membrane thickened, the tubules dilated. The expression of m RNA and protein of matrix 2 in experimental group KKAy mice was significantly higher than that in normal C57BL/6J mice. 3. High expression of Matrilin-2 protein. 4. TGF- 尾 1 in glomerular Mesangial cells of mice stimulated by high glucose. Methods to regulate the expression of SV40 MES 13Matrilin-2 in glomerular Mesangial cells of mice.
【學(xué)位授予單位】：青海大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R587.2;R692.9

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本文編號(hào)：1699954