visfatin對體外脂肪細胞胰島素受體底物和PI3K表達的影響
本文選題:糖尿病 切入點:型 出處:《吉林大學學報(醫(yī)學版)》2017年02期
【摘要】:目的:從胰島素經(jīng)典信號傳導通路磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)角度探討內(nèi)臟脂肪素(visfatin)與2型糖尿病(T2DM)胰島素抵抗(IR)的關(guān)系。方法:復蘇、傳代和誘導分化人源T2DM前脂肪細胞,構(gòu)建visfatin過表達載體,進行載體轉(zhuǎn)化、培養(yǎng)和提取;以4個不同表達梯度(0.0、1.0、2.5和5.0μg)轉(zhuǎn)染傳代脂肪細胞,以0.0μg組為對照組,其余3組為觀察組;Q-PCR法檢測visfatin、胰島素受體底物1(IRS-1)、胰島素受體底物2(IRS-2)和PI3K(P85α)mRNA表達水平,Western blotting法檢測visfatin、IRS-1、IRS-2和PI3K(P85α)蛋白表達水平及IRS-1和IRS-2酪氨酸磷酸化水平,[3 H]-2-脫氧-D-葡萄糖攝取法測定細胞葡萄糖攝取率的變化。結(jié)果:各組visfatin mRNA及蛋白表達水平隨轉(zhuǎn)染濃度梯度升高而升高(P0.01),所構(gòu)建visfatin過表達載體有效。隨visfatin表達增加,各組IRS-1和PI3K(P85α)mRNA和蛋白表達水平以及IRS-1磷酸化程度均明顯升高(P0.01),但IRS-2mRNA和蛋白表達水平未出現(xiàn)明顯變化(P0.05)。脂肪細胞的葡萄糖攝取率隨visfatin表達增加而升高(P0.05)。結(jié)論:體外脂肪細胞visfatin過表達可增加IRS-1和PI3K的表達水平。
[Abstract]:Aim: to investigate the relationship between visfatin visfatin (visfatin) and insulin resistance (IRI) in type 2 diabetes mellitus (T2DM) from the point of view of phosphatidylinositol 3 kinase PI3K.Methods: after resuscitation, subculture and differentiation of human T2DM preadipocytes, the overexpression vector of visfatin was constructed, transformed, cultured and extracted, and the adipocytes were transfected with four different expression gradients of 0.01.0,2.5 and 5.0 渭 g, and the control group was treated with 0.0 渭 g.The changes of glucose uptake rate were measured by the method.Results: the expression level of visfatin mRNA and protein increased with the increase of transfection concentration gradient. The visfatin overexpression vector constructed was effective.With the increase of visfatin expression, the expression levels of IRS-1 and PI3K(P85 偽 -tir mRNA and protein, as well as the degree of IRS-1 phosphorylation, increased significantly in each group, but the expression of IRS-2mRNA and protein did not change significantly (P0.05).Glucose uptake of adipocytes increased with the increase of visfatin expression.Conclusion: overexpression of visfatin in adipocytes can increase the expression of IRS-1 and PI3K.
【作者單位】: 昆明醫(yī)科大學第六附屬醫(yī)院檢驗科;云南省玉溪市中心血站質(zhì)管科;昆明醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院產(chǎn)科;
【基金】:國家自然科學基金資助課題(81160082)
【分類號】:R587.1
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,本文編號:1691532
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