強(qiáng)直性脊柱炎TCR二次重排及BV CDR3譜型和分子特征初步研究
本文關(guān)鍵詞:強(qiáng)直性脊柱炎TCR二次重排及BV CDR3譜型和分子特征初步研究
更多相關(guān)文章: 強(qiáng)直性脊柱炎 T細(xì)胞受體 互補(bǔ)決定區(qū)3(互補(bǔ)決定區(qū)) 免疫掃描譜型分析
【摘要】:目的:通過(guò)分析對(duì)AS患者外周血CD4+、CD8+T細(xì)胞TCR BV CDR3譜型多樣性特點(diǎn)及檢測(cè)TCR二次重排的相關(guān)基因,探討TCR CDR3氨基酸序列和TCR二次重排與AS發(fā)病的相關(guān)性,為AS中T細(xì)胞致病機(jī)制的研究和個(gè)性化治療提供一條新的途徑。方法:(1)免疫磁珠法分離AS患者與健康對(duì)照組外周血中的CD4+、CD8+淋巴細(xì)胞。(2)提取各樣本總RNA并按RT-PCR Kit操作說(shuō)明書(shū)逆轉(zhuǎn)錄合成c DNA。(3)參照文獻(xiàn)設(shè)計(jì)并合成TCR BV亞家族及實(shí)驗(yàn)對(duì)照引物,RT-PCR法擴(kuò)增各樣本TCR亞家族,并用2%瓊脂凝膠電泳鑒定PCR產(chǎn)物。(4)免疫掃描技術(shù)分析PCR產(chǎn)物,并用將單/寡克隆基因進(jìn)行測(cè)序,分析AS患者CD4+、CD8+TCR BV家族CDR3區(qū)譜系多態(tài)性及克隆性的特點(diǎn)(5)RT-PCR法檢測(cè)各樣本RAG1、RAG2、Td T、Ku70、Ku80表達(dá)情況,同時(shí)檢測(cè)TCR重排過(guò)程中間產(chǎn)物BD2-BJ2重排刪除環(huán)。結(jié)果:(1)健康對(duì)照組及AS患者CD4+、CD8+TCR BV各家族PCR產(chǎn)物在2%瓊脂糖凝膠電泳圖顯示,各家族均有表達(dá)。正常健康人CD4+、CD8+TCR BV亞家族免疫掃描均呈正態(tài)分布。(2)12例AS患者CD4+TCR BV家族絕大多數(shù)呈現(xiàn)與健康對(duì)照相似的正態(tài)分布的鐘型峰圖,僅少數(shù)家族呈不規(guī)則異常峰型或偏峰,極少家族出現(xiàn)寡克隆趨勢(shì),僅2例患者各出現(xiàn)1個(gè)單克隆家族單峰。不同患者的CD4+TCR BV家族異常峰型率在4%(1/26)~27%(7/26),異常率出現(xiàn)較高的家族有BV 2和BV 3均為75%(9/12),BV 19為50%(6/12),異常率較低的家族為BV 9和BV 13.2均為8.3%(1/12)。(3)12例AS患者CD8+TCR BV家族大多數(shù)呈現(xiàn)非正態(tài)異常峰型,其中7例患者CD8+TCR BV家族異常分型率高于50%以上,明顯多于CD4+T細(xì)胞。AS患者CD8+TCR BV 26個(gè)亞家族均出現(xiàn)異常峰率,其中異常率較高的家族為BV 3和BV 19均為83%(10/12),異常率較低的家族為BV 8為17%(2/12)。(4)同一患者出現(xiàn)不同BV亞家族單克隆增生,其TCR BV CDR3區(qū)長(zhǎng)度和序列有所不同。同一BV亞家族在不同患者其CDR3區(qū)長(zhǎng)度和序列也不相同。顯示同時(shí)存在一些共同基序。(5)6例AS患者治療前后CD8+TCR BV亞家族異常率均高于治療前后CD4+T細(xì)胞,其中3例患者治療后CD4+TCR BV亞家族異常率下降,4例患者CD8+TCR BV亞家族異常率均下降。(6)20例健康對(duì)照、病例對(duì)照組及AS患者RAG1、RAG2、Td T、Ku70、Ku80PCR產(chǎn)物在2%瓊脂糖凝膠電泳圖顯示,AS患者、正常健康對(duì)照組均表達(dá)Ku70;8例AS患者、3例正常健康檢測(cè)到Ku80的特異性條帶。其他條帶未檢測(cè)出。(7)16例正常對(duì)照檢出BD1-BJl sj TRECs S1,AS患者均未檢出sj TRECs。結(jié)論:(1)AS患者CD4+、CD8+TCR BV CDR3譜系存在顯著多態(tài)性,CD8+T細(xì)胞在AS患者的免疫發(fā)病機(jī)制中占據(jù)主導(dǎo)地位。(2)AS患者治療前后CD4+、CD8+TCR BVCDR3譜系的監(jiān)測(cè),有可能成為了解患者病情進(jìn)展?fàn)顩r,間接反映療效和預(yù)后的一種新的有效技術(shù)手段。(3)AS患者外周TCR不存在二次重排,AS患者TCR BV家族的異常改變可能并非由TCR二次重排而形成。
【學(xué)位授予單位】:石河子大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R593.23
【相似文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
1 譚永霞;強(qiáng)直性脊柱炎誤診1例[J];中國(guó)綜合臨床;2000年03期
2 李軍,陳列;手法配合中藥治療強(qiáng)直性脊柱炎9例臨床報(bào)導(dǎo)[J];甘肅中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2000年03期
3 李朝暉,姜永慶;中西醫(yī)結(jié)合治療強(qiáng)直性脊柱炎臨床體會(huì)[J];黑龍江醫(yī)學(xué);2000年12期
4 徐翠華;強(qiáng)直性脊柱炎12例誤診分析[J];遼寧醫(yī)學(xué)雜志;2000年01期
5 宋偉東;女性強(qiáng)直性脊柱炎誤診一例[J];中國(guó)療養(yǎng)醫(yī)學(xué);2000年01期
6 楊清銳,遇曉,張?jiān)闯?強(qiáng)直性脊柱炎的治療[J];山東醫(yī)藥;2001年09期
7 龔衛(wèi)娟,范麗安;強(qiáng)直性脊柱炎發(fā)病的遺傳因素研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).遺傳學(xué)分冊(cè);2001年01期
8 葉新生;三兄弟同患強(qiáng)直性脊柱炎報(bào)告[J];海南醫(yī)學(xué);2001年04期
9 潘建玲,于威,蒲米娜;強(qiáng)直性脊柱炎合并急性早幼粒細(xì)胞白血病1例[J];黑龍江醫(yī)學(xué);2001年08期
10 信素英,樊愛(ài)華,陳永漢;中西醫(yī)結(jié)合治療強(qiáng)直性脊柱炎50例[J];現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志;2001年07期
中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
1 張?jiān)闯?楊清銳;遇曉;張春玲;陳立輝;;強(qiáng)直性脊柱炎的治療[A];中國(guó)免疫學(xué)會(huì)第四屆學(xué)術(shù)大會(huì)會(huì)議議程及論文摘要集[C];2002年
2 馬麗;;強(qiáng)直性脊柱炎患者的健康教育[A];第十屆全國(guó)風(fēng)濕病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2005年
3 沈友軒;周定華;王艷艷;柯瑤;王嬙;;強(qiáng)直性脊柱炎79例臨床特點(diǎn)分析[A];第十屆全國(guó)風(fēng)濕病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2005年
4 潘文友;劉焱;劉華;;晚發(fā)強(qiáng)直性脊柱炎十例分析[A];第十屆全國(guó)風(fēng)濕病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2005年
5 張麗穎;劉朋;;晚發(fā)強(qiáng)直性脊柱炎八例臨床分析[A];第十屆全國(guó)風(fēng)濕病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2005年
6 張自強(qiáng);方澤志;汪方記;;強(qiáng)直性脊柱炎證治附60例療效觀察[A];第十三屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合骨傷科學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2005年
7 卞曙曉;劉江濤;勾麗;劉興中;;強(qiáng)直性脊柱炎的早診斷早治療[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)疼痛學(xué)分會(huì)第六屆年會(huì)論文摘要[C];2005年
8 張秀英;董硯奉;國(guó)艷霞;焦紅梅;王麗;;強(qiáng)直性脊柱炎誤診24例分析[A];全國(guó)自身免疫性疾病專題研討會(huì)暨第十一次全國(guó)風(fēng)濕病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年
9 閻小萍;;強(qiáng)直性脊柱炎誤診131例分析[A];全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合強(qiáng)直性脊柱炎專題研討會(huì)論文匯編[C];2007年
10 張育;王艷茹;馬瑩瑩;;強(qiáng)直性脊柱炎患者721例的臨床回顧分析[A];第17次全國(guó)風(fēng)濕病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2012年
中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
1 中日友好醫(yī)院風(fēng)濕免疫科主任醫(yī)師 馬麗;強(qiáng)直性脊柱炎結(jié)成群害親人[N];保健時(shí)報(bào);2007年
2 南京軍區(qū)福州總醫(yī)院內(nèi)分泌科 馮修高 整理 吳志 張文明;肺炎衣原體可引發(fā)強(qiáng)直性脊柱炎[N];健康報(bào);2013年
3 中華醫(yī)學(xué)會(huì)風(fēng)濕病學(xué)分會(huì)候任主任委員 北京協(xié)和醫(yī)院風(fēng)濕科主任醫(yī)師 曾小峰;強(qiáng)直性脊柱炎能被有效控制[N];光明日?qǐng)?bào);2013年
4 本報(bào)記者 姜晨怡;強(qiáng)直性脊柱炎 易被誤診的“不死癌癥”[N];科技日?qǐng)?bào);2013年
5 本報(bào)記者 熊昌彪;治療強(qiáng)直性脊柱炎要走出兩個(gè)誤區(qū)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2013年
6 馮興華;中醫(yī)治療強(qiáng)直性脊柱炎[N];健康報(bào);2003年
7 ;強(qiáng)直性脊柱炎及早治療是關(guān)鍵[N];上?萍紙(bào);2002年
8 石蘭;強(qiáng)直性脊柱炎的康復(fù)護(hù)理[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2005年
9 劉秀鳳;強(qiáng)直性脊柱炎的康復(fù)運(yùn)動(dòng)[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2005年
10 周武;強(qiáng)直性脊柱炎為何易誤診?[N];浙江日?qǐng)?bào);2003年
中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
1 管明強(qiáng);強(qiáng)直性脊柱炎診療現(xiàn)狀的臨床研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年
2 趙英華;磁共振成像對(duì)強(qiáng)直性脊柱炎骶髂關(guān)節(jié)炎活動(dòng)性的檢測(cè)[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年
3 劉軍;ANO6,HAPLN1,EDIL3在中國(guó)漢族人群中與強(qiáng)直性脊柱炎的易感性及嚴(yán)重程度的相關(guān)性的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2015年
4 陳猛;調(diào)節(jié)性B細(xì)胞在強(qiáng)直性脊柱炎(Ankylosing spondylitis AS)患者中的分布及功能[D];山東大學(xué);2016年
5 周穎燕;補(bǔ)腎強(qiáng)督法治療強(qiáng)直性脊柱炎的療效及抗骨化作用初探[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2016年
6 李岱鶴;強(qiáng)直性脊柱炎患者局部與全身基質(zhì)Gla蛋白(MGP)表達(dá)下降與影像學(xué)進(jìn)展的聯(lián)系[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年
7 冉博;HRH4基因多態(tài)性與強(qiáng)直性脊柱炎易感性相關(guān)研究[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2016年
8 李大河;強(qiáng)直性脊柱炎韌帶組織比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究及膜聯(lián)蛋白A2功能驗(yàn)證[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2016年
9 張虎;強(qiáng)直性脊柱炎關(guān)節(jié)滑膜高表達(dá)碳酸酐酶1[D];山東大學(xué);2011年
10 朱洪民;強(qiáng)直性脊柱炎早期診斷的臨床研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2011年
中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
1 齊文蓉;清利活血方治療強(qiáng)直性脊柱炎髖關(guān)節(jié)病變的臨床觀察[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2015年
2 徐剛;脊痹飲治療強(qiáng)直性脊柱炎的臨床研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2015年
3 王宏晶;玄駒珍丸治療強(qiáng)直性脊柱炎緩解期(肝腎不足證)的臨床療效觀察[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2016年
4 黃漢清;非磷酸化MGP蛋白在強(qiáng)直性脊柱炎患者血清中的表達(dá)及其與骨重建的相關(guān)性研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年
5 陳伯勝;基于經(jīng)絡(luò)腧穴理論對(duì)針刀治療強(qiáng)直性脊柱炎的效應(yīng)機(jī)制探討[D];甘肅中醫(yī)藥大學(xué);2016年
6 杜娟;溫陽(yáng)通絡(luò)法治療寒濕痹阻型強(qiáng)直性脊柱炎的臨床療效觀察[D];云南中醫(yī)學(xué)院;2016年
7 姚蘭;火針聯(lián)合督灸治療寒濕痹阻型強(qiáng)直性脊柱炎的臨床療效觀察[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2016年
8 辛利紅;2p15區(qū)域候選基因與中國(guó)漢族人群中強(qiáng)直性脊柱炎的關(guān)聯(lián)性研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2016年
9 王麗;microRNA-125a和A20在AS患者PBMCs中的表達(dá)水平及其臨床意義[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2016年
10 蔡國(guó)旗;維生素D受體基因單核苷酸多態(tài)性與強(qiáng)直性脊柱炎遺傳易感性的關(guān)聯(lián)性研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2016年
,本文編號(hào):1235059
本文鏈接:http://www.sikaile.net/yixuelunwen/nfm/1235059.html