液相芯片技術(shù)檢測血清過敏原特異性IgE實驗研究
發(fā)布時間:2017-11-03 19:03
本文關(guān)鍵詞:液相芯片技術(shù)檢測血清過敏原特異性IgE實驗研究
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【摘要】:目的:血清過敏原特異性IgE抗體檢測為過敏體外檢測的主要方法,過敏體外檢測方法諸多,其中ImmunoCap法為“金標準”,較傳統(tǒng)固相支持物,使用了纖維素衍生物,具有吸附蛋白更多,反應速度更快、敏感性和特異性更好的優(yōu)點,然而,價格相對較貴;免疫印跡法也稱蛋白質(zhì)印跡法,固相支持物為硝酸纖維素膜,雖敏感性差、特異性差,但同時能夠?qū)Χ喾N特異性IgE抗體進行檢測,臨床上得到廣泛應用;近年來,液相芯片技術(shù)在諸多領(lǐng)域的發(fā)展,越來越得到醫(yī)學科學領(lǐng)域的廣泛認可,現(xiàn)利用該技術(shù)建立液相芯片法檢測過敏原特異性IgE抗體水平,并與臨床上廣泛應用的免疫印跡法進行比較,評價該液相芯片法在過敏原特異性IgE抗體檢測中的線性、靈敏性、重復性等指標,為過敏臨床診斷提供新的更科學的參考依據(jù)。方法:收集天津市中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院皮膚科2015年10月—12月臨床上懷疑過敏患者的血清,應用免疫印跡法檢測120例患者血清過敏原特異性IgE水平,統(tǒng)計與液相芯片法對應的12種過敏原特異性IgE陽性率,并選取研究對象,以便作為對照組;建立過敏原總IgE和特異性IgE液相芯片檢測法,評價其線性、靈敏度等指標;利用液相芯片法檢測患者血清塵螨過敏原特異性IgE水平,與免疫印跡法進行相關(guān)性分析;檢測血清牛奶過敏原特異性IgE和血清艾蒿過敏原特異性IgE水平,評價其臨床符合率。應用SPSS18.0統(tǒng)計學軟件對各變量進行統(tǒng)計學分析,比較兩組間sIgE水平用非參數(shù)檢驗,P0.05被認為有統(tǒng)計學意義。用Spearman等級相關(guān)系數(shù)評價等級相關(guān)性,P0.05被認為有統(tǒng)計學意義。配對資料數(shù)值比較用Wilcoxon的秩和檢驗,P0.05被認為有統(tǒng)計學意義。結(jié)果:免疫印跡法檢測120例過敏患者血清中特異性IgE抗體水平,塵螨過敏原特異性IgE陽性率最高61.7%;液相芯片法檢測總IgE標準品的線性范圍為0.41ng/mL~100ng/m L;液相芯片法檢測過敏患者血清總IgE水平,評價其重復性,批內(nèi)CV介于1.20%~2.86%之間;批間CV介于1.84%~4.91%之間;應用液相芯片法與免疫印跡法同時檢測120例中隨機挑選的50患者血清塵螨過敏原特異性IgE抗體水平,進行統(tǒng)計學分析,結(jié)果r=0.55(p0.001,n=50),表明兩種方法檢測血清過敏原特異性IgE水平有相關(guān)性,且良好,應用液相芯片法分別對10例已確診為牛奶過敏的患者和10例艾蒿過敏的患者,檢測其過敏原特異性IgE水平,結(jié)果陽性率100%,說明該方法具有較好的臨床符合性。結(jié)論:1.傳統(tǒng)免疫印跡法檢測血清過敏原特異性IgE,發(fā)現(xiàn)塵螨陽性率最高,其次為蟑螂、大豆、牛奶和艾蒿。2.本研究利用液相芯片技術(shù)和博敏達液相芯片反應動力學專利,建立了血清總IgE和過敏原特異性IgE液相芯片檢測法,此方法線性范圍寬、重復性好、結(jié)果穩(wěn)定。3.液相芯片法與免疫印跡法相關(guān)性較好,前者靈敏度優(yōu)于后者。4.與臨床過敏確診病例比較,液相芯片法對牛奶和艾蒿的特異性IgE檢測符合率100%,靈敏度高。
【學位授予單位】:天津醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R446.6;R593.1
【參考文獻】
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,本文編號:1137473
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