本文關(guān)鍵詞：siRNA干擾AT1R基因調(diào)控鏈脲佐菌素誘導(dǎo)NIT-1細(xì)胞凋亡的實驗研究

  更多相關(guān)文章： RNA干擾 胰島素瘤細(xì)胞 細(xì)胞血管緊張素Ⅱ型受體 鏈脲佐菌素 凋亡

【摘要】：目的用siRNA干擾技術(shù)沉默小鼠胰島素瘤NIT-1細(xì)胞血管緊張素Ⅱ1型受體(AT1R)基因,探討其對鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)的胰島素瘤細(xì)胞凋亡的影響。方法針對小鼠AT1R基因,設(shè)計并合成3對siRNA序列,脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染至NIT-1細(xì)胞,熒光顯微鏡觀察熒光強(qiáng)度檢測轉(zhuǎn)染效率,Real-time PCR檢測AT1R mRNA表達(dá)量判斷不同干擾序列及干擾時間的基因沉默效果;分4組:空白組不予任何干預(yù),STZ組予5 mmo L/L STZ干預(yù)30 min,si-AT1R組予40 nmol/L si-AT1R轉(zhuǎn)染24 h,si-AT1R+STZ組予40 nmo L/L si-AT1R轉(zhuǎn)染24 h后5mmo L/L STZ干預(yù)30 min;Real-time PCR檢測Caspase-3 mRNA表達(dá)量,Hoechst33342染色熒光顯微鏡和Annexin V-FITC/PI流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率。結(jié)果 40 nmol/L siRNA轉(zhuǎn)染的熒光強(qiáng)度最強(qiáng),轉(zhuǎn)染后AT1R mRNA表達(dá)量明顯下降,si-AT1R-2轉(zhuǎn)染24 h的沉默效果最佳(92.20%);Caspase-3 mRNA表達(dá)量:STZ組與空白組比增加了2.37倍(P0.05),si-AT1R+STZ組與STZ組比減少了11.28%,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義;細(xì)胞凋亡率:STZ組與空白組比增加了3.27倍(P0.05),si-AT1R+STZ組與STZ組比減少了26.82%(P0.05)。結(jié)論本研究建立了穩(wěn)定的胰島細(xì)胞AT1R基因沉默模型;RNA干擾沉默胰島細(xì)胞AT1R基因可通過下調(diào)Caspase-3mRNA表達(dá)量降低STZ誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡率,提示AT1R介導(dǎo)了STZ誘導(dǎo)的胰島細(xì)胞凋亡過程。
【作者單位】： 廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科;廣西醫(yī)科大學(xué)病理生理學(xué)教研室;中國人民解放軍第三0三醫(yī)院移植醫(yī)學(xué)研究院;
【關(guān)鍵詞】： RNA干擾 胰島素瘤細(xì)胞 細(xì)胞血管緊張素Ⅱ型受體 鏈脲佐菌素 凋亡
【基金】：廣西自然科學(xué)基金資助項目(編號:2013GXNSFAA019202,2013GXNSFAA019253)
【分類號】：R587.1
【正文快照】： 糖尿病患者在發(fā)病早期就已存在胰島β細(xì)胞功能損傷,主要表現(xiàn)為細(xì)胞凋亡增加[1]。減少細(xì)胞凋亡,保護(hù)胰島β細(xì)胞功能可從根本上減少新發(fā)糖尿病的風(fēng)險[1-2]。使用腎素-血管緊張素系統(tǒng)(RAS)阻斷劑可以減少新發(fā)糖尿病的發(fā)生[3],但具體機(jī)制不清。鏈尿佐菌素(STZ)是目前使用最廣泛的

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 范建高,鐘嵐,王國良,徐正婕,李明升,巫協(xié)寧;肥胖、高脂血癥性脂肪性肝炎細(xì)胞凋亡的實驗研究[J];中華消化雜志;2000年06期

2 何旭;劉仁樹;;細(xì)胞凋亡與中毒關(guān)系的研究近況[J];中國急救醫(yī)學(xué);2006年02期

3 劉會領(lǐng);陸偉;;細(xì)胞凋亡與肥胖相關(guān)的非酒精性脂肪性肝病[J];實用肝臟病雜志;2007年02期

4 劉俊達(dá);細(xì)胞凋亡與老年病[J];華夏長壽;1997年09期

5 王大江;糖尿病視網(wǎng)膜病變細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展[J];錦州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2002年02期

6 李朝輝;呂林;馬玲;;糖尿病視網(wǎng)膜病變中細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2009年21期

7 薩珍;歐珠旺姆;次仁白珍;次仁央宗;次仁布芷;張世馥;;高原紅細(xì)胞增多癥患者細(xì)胞凋亡研究[J];西藏醫(yī)藥雜志;2012年04期

8 陳群,熊詠民,王治倫,代曉霞,薛莉,王立新;鎵鹽對骨質(zhì)疏松大鼠細(xì)胞凋亡和基因組DNA含量及分子量的影響[J];中國地方病防治雜志;2004年02期

9 劉俊達(dá);;細(xì)胞凋亡與老年病[J];國外醫(yī)學(xué)情報;1996年15期

10 劉菲,劉郁;流式細(xì)胞儀檢測急性一氧化碳中毒后大鼠腦細(xì)胞凋亡[J];中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2000年06期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 于青;袁偉杰;姚建;;晚期糖基化終末產(chǎn)物引起足細(xì)胞凋亡的機(jī)制[A];2007年浙滬兩地腎臟病學(xué)術(shù)年會資料匯編[C];2007年

2 陳斌;胡劍麟;童菊芳;易靜;許雁萍;王益鑫;黃翼然;;高脂對兔陰莖海綿體平滑肌細(xì)胞凋亡的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第八次全國男科學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2007年

3 馮正平;鄧華聰;姜蓉;杜佳;梁曉燕;陳丹燕;;p38MAPK在高糖誘導(dǎo)成骨細(xì)胞凋亡中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會第三次骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病中青年學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

4 劉冬娟;祝素文;徐彥平;郭玉坤;石玉秀;;狼瘡性腎小球腎炎毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的超微結(jié)構(gòu)觀察[A];第十三屆全國電子顯微學(xué)會議論文集[C];2004年

5 錢占華;白榮杰;閆東;程曉光;屈輝;;原發(fā)性甲狀旁腺機(jī)能亢進(jìn)甲狀旁腺細(xì)胞凋亡[A];中華醫(yī)學(xué)會第三次骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病中青年學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

6 李楠;王和鳴;鄭良樸;林一萍;沈霖;林旭;周林瑛;鐘秀容;林芳;;IL-6影響骨髓基質(zhì)細(xì)胞凋亡機(jī)理的初步探討[A];全國中華骨傷名醫(yī)名院名所論壇論文集[C];2005年

7 王慧方;鄭振中;;Bcl-2家族與糖尿病細(xì)胞凋亡的相關(guān)研究[A];江西省第六次中西醫(yī)結(jié)合心血管學(xué)術(shù)交流會論文集[C];2013年

8 吳思英;李煌元;蔡鳳霞;鐘偉藝;張桂梅;湯燕萍;;百草枯誘導(dǎo)PC12細(xì)胞損害和miR-133b表達(dá)的影響[A];經(jīng)濟(jì)發(fā)展方式轉(zhuǎn)變與自主創(chuàng)新——第十二屆中國科學(xué)技術(shù)協(xié)會年會（第三卷）[C];2010年

9 張培澤;王輝;張明霞;彭巧麗;陳心春;周伯平;李桂英;劉水騰;劉艷;;CD59在HIV感染者CD4+T細(xì)胞表面表達(dá)情況及對細(xì)胞凋亡的影響分析[A];中華醫(yī)學(xué)會第五次全國艾滋病、病毒性丙型肝炎暨全國熱帶病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

10 徐明彤;程樺;黎鋒;薛聲能;嚴(yán)勵;;Survivin基因轉(zhuǎn)染對NIT-1細(xì)胞凋亡的影響[A];2006年中華醫(yī)學(xué)會糖尿病分會第十次全國糖尿病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 張曉倩;高糖誘導(dǎo)Bim蛋白高表達(dá)而促腎近曲小管上皮細(xì)胞凋亡的機(jī)制探討[D];山東大學(xué);2015年

2 洪永鋒;miR-29b,miR-29c在Toll樣受體調(diào)控糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)漿細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞凋亡中的作用[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2014年

3 李妍;α-Synuclein在錳誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞凋亡中的作用機(jī)制[D];中國醫(yī)科大學(xué);2009年

4 馮正平;p38MAPK通路在高糖誘導(dǎo)成骨細(xì)胞凋亡中作用的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

5 曹朝暉;LIGHT-LTβR信號通路在NOD小鼠中的作用[D];南華大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉粵丹;含硒化合物拮抗糖尿病引起腫瘤耐藥的機(jī)制研究[D];暨南大學(xué);2015年

2 張雙雙;胰高血糖素樣肽-1對晚期氧化蛋白產(chǎn)物誘導(dǎo)足細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

3 齊文文;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對高糖致足細(xì)胞凋亡的作用[D];山東大學(xué);2015年

4 周玉;IRF-4結(jié)合蛋白（IBP）對T細(xì)胞凋亡的影響及其作用機(jī)制的初步研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2007年

5 李小艷;糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)成骨細(xì)胞凋亡的機(jī)制探討[D];中南大學(xué);2009年

6 李爭明;激光光鑷?yán)到y(tǒng)中高葡萄糖對NIT-1細(xì)胞凋亡影響的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

7 隋文婕;Substance P抑制高糖誘導(dǎo)的小鼠角膜上皮細(xì)胞凋亡的體外實驗研究[D];濟(jì)南大學(xué);2014年

8 孔令超;IL-1β和IFNγ介導(dǎo)胰島INS-1E細(xì)胞凋亡的機(jī)制[D];南昌大學(xué);2014年

9 張瑞;Sirt1/FoxO1在高糖誘導(dǎo)小鼠系膜細(xì)胞凋亡中的作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

10 余少珍;TRPC1參與氯化鎘誘導(dǎo)人胚腎細(xì)胞凋亡的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年

，

本文編號：1022094