本文關鍵詞：P-糖蛋白在不同膀胱癌細胞株間的選擇性轉移

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【摘要】：目的探討功能性P-糖蛋白在膀胱癌不同細胞株間是否存在選擇性轉移及其機制。方法用Transwell將膀胱癌耐藥株細胞BIU-87/ADM分別與敏感膀胱癌細胞株T24和EJ進行共培養(yǎng),共聚焦顯微鏡觀察共培養(yǎng)Transwell下室的T24和EJ細胞(即獲得性耐藥細胞Aq MDR)P-糖蛋白的轉移,利用Western Blot檢測BIU-87/ADM、T24/aq MDR、T24、EJ/aq MDR及EJ細胞P-gp的表達量,利用RT-PCR分析這些細胞MDR1 m RNA的表達水平。采用流式細胞術測BIU-87/ADM、T24/aq MDR、T24、EJ/aq MDR及EJ細胞內羅丹明-123熒光強度。利用RT-PCR分別對BIU-87/ADM、BIU-87、EJ、T24細胞中幾種介導腫瘤細胞間惡性特質轉移的細胞膜蛋白或受體(CD44分子、Ezrin蛋白、整合素b1)的m RNA表達情況進行檢測。結果共聚焦結果顯示這些細胞核均呈藍色熒光,胞漿和胞膜呈不同程度的綠色熒光,BIU-87/ADM呈強綠色熒光,T24/aq MDR呈中等強度綠色熒光,而T24、EJ/aq MDR及EJ細胞均呈現(xiàn)弱綠色熒光。Western Blot檢測結果顯示,BIU-87/ADM細胞中P-gp的表達水平最高,T24/aq MDR細胞中P-gp的表達弱于BIU-87/ADM細胞(p0.05),卻明顯強于T24細胞(p0.05),而EJ/aq MDR和EJ細胞中P-gp表達水平均較低。RT-PCR結果顯示,只有BIU-87/ADM細胞中MDR1 m RNA表水平較高,而其余四種細胞表達水平很低且彼此間差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。羅丹明123試驗顯示:BIU-87/ADM、T24/aq MDR、T24、EJ/aq MDR及EJ細胞內熒光強度依次增高,其中T24、EJ/aq MDR及EJ細胞中熒光強度均較強且彼此間差異亦無統(tǒng)計學意義(p0.05)。RT-PCR檢測CD44分子、Ezrin蛋白、整合素b1在七種細胞中表達水平均較高,但彼此間差異也無統(tǒng)計學意義(p0.05)。結論P-gp能夠從耐藥的膀胱癌細胞株BIU-87/ADM轉移到敏感的膀胱癌細胞株T24中,且這種獲得性P-gp具有藥物外排功能。而P-gp不能或者很少量從耐藥的膀胱癌細胞株BIU-87/ADM轉移到敏感的膀胱癌細胞EJ中。在共培養(yǎng)前后P-gp轉移的過程中不伴有多藥耐藥基因MDR1的轉移。這一現(xiàn)象說明P-gp在膀胱癌不同細胞株間轉移具有選擇性,在以微粒(MPs)介導的膀胱癌細胞株間P-gp轉移的機制中,CD44分子、Ezrin蛋白、整合素b1在各種細胞中表達均無明差異,即無充分證據(jù)支持這些粘附分子參與了P-gp在膀胱癌細胞間的轉移,這也為進一步研究P-gp介導的膀胱癌多藥耐藥的機制提供了新的思路及研究方向。
【關鍵詞】：膀胱癌細胞 P-糖蛋白 mdr1基因 多藥耐藥 膜微粒
【學位授予單位】：福建醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R737.14
【目錄】：

• 英文縮寫一覽表4-5
• 摘要5-6
• Abstract6-7
• 前言7-10
• 材料與方法10-22
• 1 實驗材料10-13
• 2 實驗方法13-22
• 結果22-31
• 1 激光共聚焦顯微鏡觀察P-gp在不同AqMDR 細胞的轉移22-23
• 2 Western Blot 分析各種細胞P-gp表達水平23-24
• 3 RT-PCR 檢測各組細胞 MDR1 的 m RNA 表達24-25
• 4 羅丹明-123 外排實驗25-27
• 5 RT-PCR檢測編碼CD44 、Ezrin、整合素β1等蛋白的基因的mRNA在各種細胞中的表達水平27-31
• 討論31-35
• 結論35-36
• 參考文獻36-39
• 綜述39-46
• 參考文獻44-46
• 致謝46

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 朱寶英;黃靜;王永林;方翼;;P-糖蛋白及腫瘤多藥耐藥的逆轉[J];中國藥房;2011年06期

2 聞鎳;張雙慶;朱凌;于敏;李佐剛;;P-糖蛋白最新研究進展[J];中國藥事;2011年07期

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本文編號：973064