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Chk1基因表達(dá)對(duì)精子密度和活力影響的相關(guān)研究

發(fā)布時(shí)間:2017-08-07 15:45

  本文關(guān)鍵詞:Chk1基因表達(dá)對(duì)精子密度和活力影響的相關(guān)研究


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【摘要】:目的:通過(guò)檢測(cè)不同密度和活力的精子的DFI(DNA fragmentation rate,DNA碎片率)、精子細(xì)胞存活率及Chk1基因的相關(guān)表達(dá),研究精子細(xì)胞的密度及活力與Chk1基因表達(dá)的關(guān)系,并進(jìn)一步探討Chk1基因與男性不育之間的相關(guān)性。方法:將收集的人類男性精液標(biāo)本行精液常規(guī)檢查,根據(jù)密度和活力分別分為正常對(duì)照組、少精組、弱精組和少弱精組,每組標(biāo)本各20份。采用吖啶橙法(AOT)檢測(cè)4組精子中DNA的碎片率,采用伊紅—Y染色法檢測(cè)4組精子存活率,采用RT-PCR方法檢測(cè)各組精子中Chk1 m RNA的表達(dá),并計(jì)算其相對(duì)表達(dá)量,采用western-blot方法檢測(cè)各組精子中Chk1蛋白的表達(dá),并計(jì)算其相對(duì)表達(dá)量。結(jié)果:1)吖啶橙法檢測(cè)DNA碎片率發(fā)現(xiàn),與正常組相比,少精子組、弱精子組、少弱精子組DNA碎片率無(wú)明顯差異(P0.05);伊紅—Y染色法檢測(cè)精子存活率發(fā)現(xiàn),與正常組相比,少精子組、弱精子組、少弱精子組的精子存活率明顯降低,各組間比較均有顯著性差異(P0.05);2)將各組依照DFI%值分為DFI30%和DFI≤30%兩組后,兩組精子活力、精子密度和精子存活率之間的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);3)RT-PCR檢測(cè)表明Chk1基因在正常對(duì)照組和其他3組的精子中均有表達(dá),四組Chk1基因的相對(duì)表達(dá)量的組間差異具有顯著性(P0.01)。其相對(duì)表達(dá)量同精子密度和活力進(jìn)行Pearson相關(guān)分析結(jié)果表明,Chk1基因的相對(duì)表達(dá)量與精子的密度和活力存在相關(guān)性(P0.05)。4)Western-Blot檢測(cè)表明Chk1蛋白在正常對(duì)照組和其他3組的精子中均有表達(dá),四組Chk1蛋白的相對(duì)表達(dá)量的組間差異具有顯著性(P0.01)。結(jié)論:1)DFI與精子密度、活力無(wú)顯著相關(guān)性,但DFI異常可能為影響精子密度和活力的重要因素;2)精子存活率與精子的密度、活力密切相關(guān);3)Chk1在人類精子中有顯著表達(dá),且在正常男性與少精、弱精及少弱精患者中的表達(dá)顯著不同,其表達(dá)的改變可能影響精子細(xì)胞的密度和活力。
【關(guān)鍵詞】:精子 Chk1 DNA損傷 不育
【學(xué)位授予單位】:山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R698.2
【目錄】:
  • 中文摘要5-7
  • 英文摘要7-9
  • 常用縮寫詞中英文對(duì)照表9-10
  • 前言10-12
  • 1 材料與方法12-19
  • 1.1 研究對(duì)象12
  • 1.2 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器12-15
  • 1.3 實(shí)驗(yàn)主要測(cè)定指標(biāo)與方法15-18
  • 1.4 統(tǒng)計(jì)分析18-19
  • 2 結(jié)果19-23
  • 2.1 正常組、少精組、弱精組、少弱精組DFI及精子存活率結(jié)果比較19-20
  • 2.2 精子DFI與精子濃度、前向運(yùn)動(dòng)精子(PR)、精子存活率(%)的相關(guān)性分析20
  • 2.3 精子細(xì)胞Chk1 mRNA在各組之間的表達(dá)20-22
  • 2.4 精子細(xì)胞Chk1 基因蛋白在各組之間的表達(dá)22-23
  • 3 討論23-25
  • 4 結(jié)論25-26
  • 參考文獻(xiàn)26-28
  • 綜述28-40
  • 參考文獻(xiàn)35-40
  • 致謝40-41
  • 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果41-42
  • 個(gè)人簡(jiǎn)歷42

【引證文獻(xiàn)】

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 陳建偉;崔云;張曉霞;;精子DNA完整性分析技術(shù)及其男性不育中醫(yī)證治應(yīng)用[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)第十一屆男科學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2011年



本文編號(hào):635434

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